Mecanismos implicados en el daño hepático y la modulación de la respuesta inmune desarrollada en el hígado frente a la infección por Brucella spp.

• Autores: Arriola Benítez, Paula Constanza
• Año de publicación: 2017
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Baldi, Pablo César; Delpino, María Victoria; Power, Pablo; Trevani, Analía; Botasso, Oscar
• Materia: Brucella spp; Afección hepática; Hígado; Respuesta inmune; Daño hepático; Ciencia de la vida
• Institución: Universidad de Buenos Aires

Fil: Arrola Benítez, Paula Constanza. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina
La brucelosis es una zoonosis de distribución mundial causada por bacterias del género Brucella. La afección hepática es una manifestación frecuente en los pacientes con brucelosis; sin embargo, los mecanismos implicados en el daño hepático no han sido dilucidados. El objetivo general del presente trabajo fue determinar cuáles son los mecanismos implicados en el daño hepático y en la modulación de la respuesta inmune desarrollada en el hígado frente a la infección por Brucella abortus.\nLos resultados obtenidos demostraron que B. abortus es capaz de invadir y multiplicarse en las células hepáticas estrelladas humanas (LX-2) y que las activa e induce la adquisición de un fenotipo fibrogénico, caracterizado por la deposición de colágeno y la inhibición de la actividad de la metaloproteasa de matriz (MMP)-9 por un mecanismo que implica la secreción de TGF-?1.\nLos estudios de la interacción de las células estrelladas con monocitos y hepatocitos revelaron que los sobrenadantes de los hepatocitos y de los monocitos infectados con B. abortus inducen la secreción de MMP-9 e inhiben la deposición de colágeno por parte de las células LX-2 no infectadas. Sin embargo, cuando los sobrenadantes de los monocitos y de los hepatocitos infectados fueron agregados a las células estrelladas previamente infectadas con B. abortus, la infección de las células LX-2 revirtió el efecto inducido por los sobrenadantes de los monocitos y de los hepatocitos infectados con B. abortus. La respuesta de las células estrelladas puede ser inflamatoria o fibrogénica de acuerdo a si las células LX-2 están infectadas o no y de su interacción con otros tipos celulares.\nLa activación de las células LX-2 mediada por B. abortus fue dependiente de la presencia de su sistema de secreción de tipo 4 (SST4) y de la proteína efectora BPE005 por un mecanismo que involucra la vía de señalización AMPc/PKA.\nLa respuesta fibrogénica que se desencadena frente a la infección con B. abortus está asociada a la activación de la vía autofágica. La bacteria induce la expresión de los marcadores de autofagia Beclin-1, LC3 II y p62 y al bloquear la vía se revierte el fenotipo fibrogénico adquirido por las células estrelladas, mediante un mecanismo dependiente del SST4 y BPE005, confirmando así la correlación entre fibrosis y autofagia. Luego de la activación de la vía autofágica la infección induce la muerte por apoptosis de las células estrelladas. Ésta podría ser una estrategia para que el depósito de matriz extracelular se produzca de manera controlada y autolimitada, tal como se observa en los pacientes con Brucelosis, en los que el desarrollo de cirrosis es un evento raro.\nEstos mecanismos estudiados in vitro fueron corroborados in vivo utilizando el modelo murino. Los hígados de los ratones infectados con B. abortus presentaron simultáneamente focos con infiltrado inflamatorio y regiones de tejido fibrótico, siendo las células estrelladas las principales productoras de TGF-? en respuesta a la infección. A su vez, los hígados de los ratones infectados con B. abortus mutante para la proteína BPE005 presentaron menos fibrosis que aquellos provenientes de los infectados con la bacteria wild type, demostrando que BPE005 tiene un papel preponderante en la modulación del fenotipo fibrótico.\nEn conjunto, estos resultados indican que B. abortus vía el SST4 y la proteína secretada BPE005 modula a las células LX-2 hacia un fenotipo fibrótico mediante una vía que involucra la activación de la vía autofágica, PKA y AMPc; y que lleva en última instancia a la muerte de las células LX-2 por apoptosis. Todos estos mecanismos contribuyen a explicar al menos en parte los mecanismos involucrados en el daño hepático observado en la brucelosis humana.
Ciencia de la salud
Doctora de la Universidad de Buenos Aires en Farmacia y Bioquímica