Actividad antiviral presente en hojas de Melia azedarach L. : modelo de acción contra el virus de la estomatitis vesicular

• Autores: Barquero, Andrea Alejandra
• Año de publicación: 2001
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Coto de Ravaschino, Celia Esther
• Materia: MELIACINA; VSV; M. AZEDARACH L.; ANTIVIRAL; V-ATPASA; MELIACINE; VSV; M. AZADARACH L.; ANTIVIRAL; V-ATPASE
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Meliacina (MA), un principio antiviral presente en las hojas de la planta Meliaazedarach L., es capaz de inhibir in-vitro la multiplicación de un amplio espectro de virus,algunos patógenos para el hombre como HSV-1 y el virus Junín (agente de la fiebrehemorrágica argentina), entre otros. El tratamiento con MA de células en cultivo antes de lainfección (pretratamiento) también desencadena un estado antiviral que afecta lamultiplicación de diferentes virus. En el presente trabajo de tesis los objetivos planteadosfueron, caracterizar el establecimiento del estado refractario a la infección viral en células Vero y determinar el mecanismo de acción de MA sobre el virus de la estomatitis vesicular (VSV), elegido como modelo de estudio. Los resultados obtenidos al utilizar inhibidores dediferentes funciones o procesos celulares permiten concluir que para inducir el estadoantiviral MA no requiere de los mecanismos de transcripción y traducción celulares activos;ni de la paiticipación de la PKR ni the ninguna otra quinasa o fosfatasa de Ser/Thr, mientrasque, tanto la actinomicina D como el vanadato y la tirfostina B46 potenciaron suestablecimiento. Al estudiar el efecto de MA sobre distintos pasos del ciclo de multiplicaciónde VSV se logró identificar al desnudamiento y al transporte de la glicoproteína G cómo losblancos de acción del pre y del post-tramiento, respectivamente. Considerando que, ambosprocesos tienen lugar en compartimentos celulares ácidos (endosomas y sistema de Golgi) yque hay una correlación entre la acción antiviral y la basificación que MA provoca en losendosomas, se plantea la hipótesis de que la acción antiviral de MA es una consecuenciadirecta de su efecto sobre la ATPasa vacuolar responsable de la acidificación de dichasorganelas.
Meliacine (MA), an antiviral compound present in purified leaf extracts of Meliaazedarach L., exhibits a broad range of virus inhibition in-vitro. Besides, the pretreatment ofcells with MA induces an antiviral state refractory to viral infection. The objectives of thepresent thesis work was to characterize the antiviral state triggers in cells by MA and toreveal the stage of VSV virus replication in Vero cells, used as a model system, affected bythe antiviral. Using several inhibitors to characterize the induction of the antiviral state, we havefound that transcription and translation protein processes are not necessary. The enzymaticactivity of PKR, Ser/Thr kinases or phosphatases are not required for the stablishment of theanviral state. Whereas. actinomycin D, sodium vanadate and tyrphostin B46 used incombination with MA during pre-treatment significantly enhance the antiviral activity against VSV. The antiviral effect of MA in Vero or BHK-21 cells pre or post-treated prevents virusuncoating and blocks the transport of VSV-G protein to the plasma membrane. It was foundthat MA raised the pH within the endosomes, this effect was in correlation with the antiviralstate duration. Taking into account that vacuolar type ATPase is responsible for maintaining thelower intraluminal pH in endosomes and Golgi complex we propose here that the inhibition of VSV uncoating and the block in the transport of G protein may be related to the effect of MAon the V-ATPase-mediated acidification
Fil: Barquero, Andrea Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.