Impacto del inflamasona NLRP3 en la respuesta immune innata y adaptativa durante la infección experimental aguda de Trypanosoma Cruzi

• Autores: Paroli, Augusto F.
• Año de publicación: 2017
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Gea, Susana Elba; Degano, Alicia Laura; Fretes, Ricardo Emilio; Cerban, Fabio Marcelo; Perdigón, Gabriela del Valle
• Materia: Enfermedad de Chagas; Trypanosoma cruzi; Proteínas; Inmunidad innata; Activación de macrófagos; Macrófagos
• Institución: Universidad Nacional de Córdoba

Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2017
Fil: Gea, Susana Elba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Gea, Susana Elba. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Degano, Alicia Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina.
Fil: Degano, Alicia Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.
Fil: Fretes, Ricardo Emilio. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Cátedra de Biología Celular, Histología y Embriología; Argentina.
Fil: Fretes, Ricardo Emilio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. nstituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.
Fil: Cerban, Fabio Marcelo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Cerban, Fabio Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Perdigón, Gabriela del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Referencia para Lactobacilos. Centro Científico Tecnológico NOA SUR; Argentina.
RESUMEN El ensamblado de inflamasomas ha sido ampliamente reportado como mecanismo de control frente a diversos agentes infecciosos durante la respuesta inmune innata y más recientemente durante la inmunidad adaptativa. En este trabajo de tesis se investigó el papel del inflamasoma NLRP3 y caspasa-l/ll en la inducción de la resistencia a la infección. Además, su posible participación en el daño hepático en un modelo de infección aguda con T. cruzi - Tulahuén utilizando animales deficientes NLRP3 y caspasa-l/ll en comparación con ratones C57BL/6 WT. Los resultados obtenidos mostraron que la infección en ratones WT indujo un incremento de IL-l~ e IL-18 en plasma sumado a un aumento de la expresión de NLRP3, casp-l e IL-l~ en el hígado indicando la activación del inflamasoma NLRP3 en este tejido. La infección también indujo un incremento en el infiltrado de células inflamatorias incluyendo la presencia de macrófagos que co-expresan NLRP3 y TLR9 siendo capaces de producir IL-l~. Notablemente, en ratones nlrp3-/- se observó un incremento significativo de macrófagos que expresan TLR9, mientras que en los casp-l/ll-/- este fenómeno no fue observado. A diferencia de los ratones WT, los nlrp3-/- y casp-l/ll-/- infectados exhibieron un menor número de células T C08+ y C04+ aunque presentaron un fuerte incremento en el número de macrófagos infiltrantes del hígado. A su vez, los macrófagos hepáticos de ratones nlrp3-/- y casp-l/ll-/- mostraron una alta producción intracelular de especies reactivas de oxígeno y óxido nítrico. Por otro lado, los animales casp-l/ll-/- tuvieron un marcado perfil Th2 a diferencia de los animales nlrp3-/- y WT que mostraron perfiles mezclados de linfocitos T helper (Thl, Th2 Y Th17). En concordancia con los resultados descriptos, los receptores para IL-l~ e IL-18 fueron detectados en linfocitos T C04+ y C08+ de ratones nlrp3-/- y WT mientras que, en los animales casp-l/ll-/- su expresión fue significativa mente menor. Por otra parte, la infección de ratones WTy nlrp3-/- indujo niveles elevados de citoquinas pro-inflamatorias además de IL-10, sugiriendo la activación de otros inflamasomas independientemente de NLRP3. Uno de los hallazgos más importantes de este trabajo fue demostrar la falta de Tesis doctoral- Líe. Augusto F. Paroli 2 capacidad de inducción de células T C08+ productoras de IFN-y en animales casp-l/ll-/-. Otro aporte novedoso, fue demostrar en los ratones casp-l/ll-/- un retraso en la aparición de marcadores de daño tisular (ALTy LDH) asociado con la ausencia de citoquinas inflamatorias (IL-l~/IL-18, IL-6 e IFN-y). Por último, el análisis de las parasitemias y sobrevida reveló que los animales nlrp3-/- mostraron un comportamiento similar a los WT, mientras que los casp-l/ll-/- presentaron elevadas parasitemias y menor sobrevida. Notablemente, la carga parasitaria fue mayor en las cepas KO, siendo la más elevada en casp-l/ll-/-. En conjunto, los resultados de esta tesis demuestran que el inflamasoma NLRP3 contribuye a la resistencia del huésped contra la infección aunque no es esencial. Es de destacar que la vía de caspasa-l/ll es clave para la producción de una efectiva inmunidad innata y adaptativa capaz de controlar la infección. Sin embargo, los mismos mecanismos efectores que participan en la defensa contra T. cruzi contribuyen al daño hepático entre otros tejidos.
Fil: Gea, Susana Elba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Gea, Susana Elba. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Degano, Alicia Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina.
Fil: Degano, Alicia Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.
Fil: Fretes, Ricardo Emilio. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Cátedra de Biología Celular, Histología y Embriología; Argentina.
Fil: Fretes, Ricardo Emilio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. nstituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.
Fil: Cerban, Fabio Marcelo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Cerban, Fabio Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Perdigón, Gabriela del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Referencia para Lactobacilos. Centro Científico Tecnológico NOA SUR; Argentina.