Fabricación y caracterización de membranas compuestas de gel/fosfato de calcio obtenidas por electrohilado para su uso en regeneración de tejido óseo

• Autores: Garcia Sabarots, Manuel; Miguez, Martín Andrés
• Año de publicación: 2020
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis de grado
• Colaborador/a o director/a de tesis: Comín, Romina; Cid, Mariana Paula
• Materia: Proyecto Integrador I. Biom; Proyecto Integrador IB; Ingeniería biomédica; Medicina regenerativa; Membranas; Fibras; Tejidos (Biología); Huesos; Materiales biomédicos
• Institución: Universidad Nacional de Córdoba

Proyecto Integrador (I.Biom.)--FCEFN-UNC, 2020
Fil: Garcia Sabarots, Manuel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales; Argentina.
Fil: Miguez, Martín Andrés. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales; Argentina.
El tejido óseo tiene la capacidad de repararse sin dejar cicatrices, pero en situaciones extremas como grandes fracturas u osteonecrosis, esta capacidad de reparación se ve afectada y el tejido no logra recuperar sus funciones ni es- tructura iniciales. Como solución a este problema, nace la ingeniería en tejidos para restablecer la función de varios órganos, mediante la fabricación de anda- mios al combinar células con biomateriales. El objetivo del presente trabajo fue obtener y caracterizar membranas de regeneración ósea formadas por fibras na- nométricas de Gelatina/Fosfato de Calcio mediante la técnica de electrohilado. El fosfato de calcio se obtuvo a partir de hidroxiapatita bovina previamente obte- nida en nuestro laboratorio sometida a tratamiento con HCl durante diferentes tiempos de incubación. Las fases presentes en el material luego del tratamiento ácido se analizaron por difracción de rayos X, la cuantificación de calcio se realizó por titulación complejométrica y la de fósforo mediante espectofotometría. El tamaño de partículas se determinó utilizando la técnica de difracción dinámica de la luz. Como resultado, se obtuvo un fosfato de calcio cuya relación molar se corresponde con el fosfato monocálcico (MCP) con un tamaño de partículas ho- mogéneo en el rango de los 200 nanómetros, con una relación molar Ca/P de aproximadamente 0,5 y una cristalinidad de alrededor del 73%. Posteriormente, se fabricaron y caracterizaron membranas de gelatina y fosfato de calcio me- diante la técnica de electrohilado. Las membranas obtenidas, en primer lugar, fueron entrecruzadas con glutaraldehído para mejorar la estabilidad en agua y luego ser caracterizadas. Se evaluó la morfología y el tamaño de las fibras por microscopia confocal. El porcentaje de hinchamiento, porosidad y estabilidad en agua de las membranas se determinó mediante un procedimiento gravimétrico convencional. Además, se evaluó el potencial efecto tóxico de las membranas sobre la línea celular fibroblástica NIH 3T3 mediante un ensayo de contacto di- recto. Finalmente, se evaluó la adherencia de las células a la superficie de las membranas mediante microscopía de fluorescencia y electrónica de barrido. Los ensayos realizados mostraron membranas compuestas de fibras ho- mogéneas con tamaños de diámetro en el rango de 100 a 1000 nanómetros aproximadamente. Éstas alcanzaron porcentajes de hinchamiento en el rango - 2 -de 1400-1600% y porosidad del 85% y se mantuvieron estables luego de 15 días de inmersión en agua. Por último, las células cultivadas en presencia de las membranas proliferaron y mantuvieron su morfología mostrando que las mem- branas no fueron citotóxicas. Más aún, las células pudieron adherirse y proliferar sobre la superficie de las mismas como se evidenció mediante las diferentes técnicas microscópicas. Finalmente, la microscopía SEM mostró además que las membranas mantuvieron su morfología fibrosa luego de 8 días de incubación a 37ºC en medio de cultivo. Los resultados obtenidos demostraron que estos materiales tienen poten- cial uso en la reparación de tejido óseo.
Fil: Garcia Sabarots, Manuel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales; Argentina.
Fil: Miguez, Martín Andrés. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales; Argentina.