Estudio de los mecanismos de enriquecimiento endosomal de app y de la secreción de vesículas extracelulares inducidas por formas agregadas patológicas de Aβ

• Autores: Debiagge, Ángela
• Año de publicación: 2025
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis de grado
• Colaborador/a o director/a de tesis: Bignante, Elena Anahi; Moyano, Ana Lis
• Materia: Proteína precursora de amiloide; Péptido beta-amiloide (Aβ); Endosomas de reciclaje; Enfermedad de Alzheimer; NATURAL SCIENCES::Biology
• Institución: Universidad Nacional de Córdoba

Fil: Debiagge, Ángela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Carrera de Ciencias Biológicas; Argentina.
La enfermedad de Alzheimer es una patología neurodegenerativa que conduce al desarrollo de demencia, y tiene como evento central la agregación y deposición extracelular del péptido beta amiloide (Aβ) en el cerebro. Esta enfermedad ha sido asociada a una disfunción en la vía endocítica. Coincidentemente nuestro grupo de trabajo demostró que la exposición a ensambles patológicos de Aβ induce un agrandamiento en endosomas de reciclaje Rab11 en neuronas humanas derivadas de células madre pluripotentes inducidas (iPSC), mediante señalización Gβγ. En este trabajo estudiamos cómo el Aβ afecta el tráfico de la proteína precursora del amiloide (APP) en la vía endocítica, y su impacto en biogénesis de vesículas extracelulares (VEs). Empleando cultivos celulares N2a y utilizando experimentos de pulso y caza, observamos que el Aβ fibrilar (Aβ-f) incrementa la endocitosis de APP y disminuye su reciclaje, efectos mediados por señalización Gβγ ya que fueron prevenidos por el tratamiento con galeína, una droga inhibidora de la subunidad Gβγ. Estos hallazgos pueden explicar el agrandamiento endosomal previamente reportado. Además, analizamos la secreción de VEs en neuronas expuestas a Aβ-f en diferentes etapas del desarrollo. En neuronas de 11 días in vitro (DIV), el Aβ-f aumentó la cantidad de VEs Rab11+, CD81+ y Sintenina-1+, efectos prevenidos por el tratamiento con galeína. En neuronas más maduras (15 DIV), se observó una disminución en el número de VEs Rab11+ junto con un aumento en su tamaño, además de un aumento en el número de VEs CD81+ y una disminución de VEs positivas para Sintenina-1, cambios no prevenidos por galeína. Estos resultados sugieren que las neuronas ajustan la producción y secreción de VEs para compensar la disfunción endocítica, pero esta capacidad adaptativa disminuye con el envejecimiento celular. Mediante microscopía de super-resolución determinamos que las VEs Rab11+ constituyen una subpoblación distinta de las VEs clásicas positivas para CD63, CD81 y Sintenina-1. Finalmente, analizamos la participación de las VEs en la secreción de Aβ1-42, no observándose cambios inducidos por Aβ-f. Sin embargo, el tratamiento con galeína per sé aumentó la liberación de VEs Aβ1-42, especialmente en neuronas envejecidas, lo que advierte sobre el uso potencialmente adverso de esta droga en individuos sanos.
Fil: Debiagge, Ángela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Carrera de Ciencias Biológicas; Argentina.