Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers

Autores
Favaro, Paula Melisa; Molineri, Ana Ines; Dus Santos, Maria Jose; Calvinho, Fernando Luis; Pecora, Andrea
Año de publicación
2023
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión aceptada
Descripción
Bovine pestiviruses are the causative agents of bovine viral diarrhea, a disease thatcauses severe economic losses in cattle. The aim of this study was to improve their diagnosisby developing a RT-qPCR to detect bovine pestiviruses A, B and H; and to set up a protocolfor collecting, shipping and preserving bovine pestiviral RNA on filter papers. The developedRT-qPCR showed high sensitivity in detecting these viruses in different matrices: viral stocks,semen and serum samples. With regard to the possibility of using the technique to test serumpools, it was possible to identify a positive serum sample within a pool containing 30 sera.In addition to evaluating the qPCR from fresh samples, the use of filter papers to sow bovinesamples was analyzed. The sampling method on two different filter papers using bovine blooddrops was a useful alternative for diagnostic purposes and allowed to preserve pestiviral RNAfor up to 12 months under refrigeration.
Los Pestivirus bovinos son los agentes causales de la diarrea viral bovina, una enfermedad que genera importantes pérdidas económicas en el ganado vacuno. El objetivo de este trabajo fue mejorar su diagnóstico mediante el desarrollo de una RT-qPCR para detectar los Pestivirus bovinos A, B y H y diseñar un protocolo de recolección, envío y conservación de ARN viral en papeles de filtro. La RT-qPCR desarrollada demostró alta sensibilidad en la detección de estos virus en diferentes matrices: stock viral, suero y semen. Respecto de la posibilidad de usar la técnica para testear pools de suero, fue posible identificar un suero positivo dentro de un pool compuesto por 30 sueros. Además de evaluar la qPCR en muestras frescas, se analizó el uso de papeles de filtro para sembrar muestras de bovinos. La metodología de toma de muestras en dos tipos de papeles de filtro usando gotas de sangre fue una alternativa útil para el diagnóstico y permitió conservar ARN viral por hasta 12 meses a temperaturas de refrigeración.
EEA Rafaela
Fil: Favaro, Paula M. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina
Fil: Molineri, Ana Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Molineri, Ana Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Dus Santos, Maria J. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); Argentina
Fil: Dus Santos, Maria J. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Calvinho, Luis. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Calvinho, Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Calvinho, Luis. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina
Fil: Pecora, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); Argentina
Fil: Pecora, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fuente
Revista Argentina de Microbiología : 1-9 (Available online 17 January 2023)
Materia
Diagnosis
Bovine Diarrhoea Pestivirus
Animal Diseases
Diagnóstico
Pestivirus de la Diarrea Bovina
Enfermedades de los Animales
Bovine Pestiviruses
Filter Papers
RT-qPCR
Bovine Viral Diaorrhea
Pestivirus de Bovinos
Papeles de Filtro
Diarrea Viral Bovina
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
Repositorio
INTA Digital (INTA)
Institución
Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria
OAI Identificador
oai:localhost:20.500.12123/14582
Acceder
id INTADig_641cc68983903a06fba7f6ff12abd70b
oai_identifier_str oai:localhost:20.500.12123/14582
network_acronym_str INTADig
repository_id_str l
network_name_str INTA Digital (INTA)
spelling Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papersFavaro, Paula MelisaMolineri, Ana InesDus Santos, Maria JoseCalvinho, Fernando LuisPecora, AndreaDiagnosisBovine Diarrhoea PestivirusAnimal DiseasesDiagnósticoPestivirus de la Diarrea BovinaEnfermedades de los AnimalesBovine PestivirusesFilter PapersRT-qPCRBovine Viral DiaorrheaPestivirus de BovinosPapeles de FiltroDiarrea Viral BovinaBovine pestiviruses are the causative agents of bovine viral diarrhea, a disease thatcauses severe economic losses in cattle. The aim of this study was to improve their diagnosisby developing a RT-qPCR to detect bovine pestiviruses A, B and H; and to set up a protocolfor collecting, shipping and preserving bovine pestiviral RNA on filter papers. The developedRT-qPCR showed high sensitivity in detecting these viruses in different matrices: viral stocks,semen and serum samples. With regard to the possibility of using the technique to test serumpools, it was possible to identify a positive serum sample within a pool containing 30 sera.In addition to evaluating the qPCR from fresh samples, the use of filter papers to sow bovinesamples was analyzed. The sampling method on two different filter papers using bovine blooddrops was a useful alternative for diagnostic purposes and allowed to preserve pestiviral RNAfor up to 12 months under refrigeration.Los Pestivirus bovinos son los agentes causales de la diarrea viral bovina, una enfermedad que genera importantes pérdidas económicas en el ganado vacuno. El objetivo de este trabajo fue mejorar su diagnóstico mediante el desarrollo de una RT-qPCR para detectar los Pestivirus bovinos A, B y H y diseñar un protocolo de recolección, envío y conservación de ARN viral en papeles de filtro. La RT-qPCR desarrollada demostró alta sensibilidad en la detección de estos virus en diferentes matrices: stock viral, suero y semen. Respecto de la posibilidad de usar la técnica para testear pools de suero, fue posible identificar un suero positivo dentro de un pool compuesto por 30 sueros. Además de evaluar la qPCR en muestras frescas, se analizó el uso de papeles de filtro para sembrar muestras de bovinos. La metodología de toma de muestras en dos tipos de papeles de filtro usando gotas de sangre fue una alternativa útil para el diagnóstico y permitió conservar ARN viral por hasta 12 meses a temperaturas de refrigeración.EEA RafaelaFil: Favaro, Paula M. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Molineri, Ana Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); ArgentinaFil: Molineri, Ana Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); ArgentinaFil: Dus Santos, Maria J. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); ArgentinaFil: Dus Santos, Maria J. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Calvinho, Luis. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); ArgentinaFil: Calvinho, Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); ArgentinaFil: Calvinho, Luis. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Pecora, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); ArgentinaFil: Pecora, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaElsevier2023-04-26T16:29:46Z2023-04-26T16:29:46Z2023-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_6501info:ar-repo/semantics/articuloapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/20.500.12123/14582https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0325754122001043P.M. Favaro, A. Molineri, M.J. Dus Santos et al., Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers, Revista Argentina de Microbiología, https://doi.org/10.1016/j.ram.2022.10.0020325-7541https://doi.org/10.1016/j.ram.2022.10.002Revista Argentina de Microbiología : 1-9 (Available online 17 January 2023)reponame:INTA Digital (INTA)instname:Instituto Nacional de Tecnología Agropecuariaenginfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0)2025-09-04T09:49:48Zoai:localhost:20.500.12123/14582instacron:INTAInstitucionalhttp://repositorio.inta.gob.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://repositorio.inta.gob.ar/oai/requesttripaldi.nicolas@inta.gob.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:l2025-09-04 09:49:49.379INTA Digital (INTA) - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuariafalse
dc.title.none.fl_str_mv Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
title Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
spellingShingle Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
Favaro, Paula Melisa
Diagnosis
Bovine Diarrhoea Pestivirus
Animal Diseases
Diagnóstico
Pestivirus de la Diarrea Bovina
Enfermedades de los Animales
Bovine Pestiviruses
Filter Papers
RT-qPCR
Bovine Viral Diaorrhea
Pestivirus de Bovinos
Papeles de Filtro
Diarrea Viral Bovina
title_short Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
title_full Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
title_fullStr Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
title_full_unstemmed Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
title_sort Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
dc.creator.none.fl_str_mv Favaro, Paula Melisa
Molineri, Ana Ines
Dus Santos, Maria Jose
Calvinho, Fernando Luis
Pecora, Andrea
author Favaro, Paula Melisa
author_facet Favaro, Paula Melisa
Molineri, Ana Ines
Dus Santos, Maria Jose
Calvinho, Fernando Luis
Pecora, Andrea
author_role author
author2 Molineri, Ana Ines
Dus Santos, Maria Jose
Calvinho, Fernando Luis
Pecora, Andrea
author2_role author
author
author
author
dc.subject.none.fl_str_mv Diagnosis
Bovine Diarrhoea Pestivirus
Animal Diseases
Diagnóstico
Pestivirus de la Diarrea Bovina
Enfermedades de los Animales
Bovine Pestiviruses
Filter Papers
RT-qPCR
Bovine Viral Diaorrhea
Pestivirus de Bovinos
Papeles de Filtro
Diarrea Viral Bovina
topic Diagnosis
Bovine Diarrhoea Pestivirus
Animal Diseases
Diagnóstico
Pestivirus de la Diarrea Bovina
Enfermedades de los Animales
Bovine Pestiviruses
Filter Papers
RT-qPCR
Bovine Viral Diaorrhea
Pestivirus de Bovinos
Papeles de Filtro
Diarrea Viral Bovina
dc.description.none.fl_txt_mv Bovine pestiviruses are the causative agents of bovine viral diarrhea, a disease thatcauses severe economic losses in cattle. The aim of this study was to improve their diagnosisby developing a RT-qPCR to detect bovine pestiviruses A, B and H; and to set up a protocolfor collecting, shipping and preserving bovine pestiviral RNA on filter papers. The developedRT-qPCR showed high sensitivity in detecting these viruses in different matrices: viral stocks,semen and serum samples. With regard to the possibility of using the technique to test serumpools, it was possible to identify a positive serum sample within a pool containing 30 sera.In addition to evaluating the qPCR from fresh samples, the use of filter papers to sow bovinesamples was analyzed. The sampling method on two different filter papers using bovine blooddrops was a useful alternative for diagnostic purposes and allowed to preserve pestiviral RNAfor up to 12 months under refrigeration.
Los Pestivirus bovinos son los agentes causales de la diarrea viral bovina, una enfermedad que genera importantes pérdidas económicas en el ganado vacuno. El objetivo de este trabajo fue mejorar su diagnóstico mediante el desarrollo de una RT-qPCR para detectar los Pestivirus bovinos A, B y H y diseñar un protocolo de recolección, envío y conservación de ARN viral en papeles de filtro. La RT-qPCR desarrollada demostró alta sensibilidad en la detección de estos virus en diferentes matrices: stock viral, suero y semen. Respecto de la posibilidad de usar la técnica para testear pools de suero, fue posible identificar un suero positivo dentro de un pool compuesto por 30 sueros. Además de evaluar la qPCR en muestras frescas, se analizó el uso de papeles de filtro para sembrar muestras de bovinos. La metodología de toma de muestras en dos tipos de papeles de filtro usando gotas de sangre fue una alternativa útil para el diagnóstico y permitió conservar ARN viral por hasta 12 meses a temperaturas de refrigeración.
EEA Rafaela
Fil: Favaro, Paula M. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina
Fil: Molineri, Ana Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Molineri, Ana Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Dus Santos, Maria J. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); Argentina
Fil: Dus Santos, Maria J. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Calvinho, Luis. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Calvinho, Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IDICAL); Argentina
Fil: Calvinho, Luis. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina
Fil: Pecora, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); Argentina
Fil: Pecora, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
description Bovine pestiviruses are the causative agents of bovine viral diarrhea, a disease thatcauses severe economic losses in cattle. The aim of this study was to improve their diagnosisby developing a RT-qPCR to detect bovine pestiviruses A, B and H; and to set up a protocolfor collecting, shipping and preserving bovine pestiviral RNA on filter papers. The developedRT-qPCR showed high sensitivity in detecting these viruses in different matrices: viral stocks,semen and serum samples. With regard to the possibility of using the technique to test serumpools, it was possible to identify a positive serum sample within a pool containing 30 sera.In addition to evaluating the qPCR from fresh samples, the use of filter papers to sow bovinesamples was analyzed. The sampling method on two different filter papers using bovine blooddrops was a useful alternative for diagnostic purposes and allowed to preserve pestiviral RNAfor up to 12 months under refrigeration.
publishDate 2023
dc.date.none.fl_str_mv 2023-04-26T16:29:46Z
2023-04-26T16:29:46Z
2023-01
dc.type.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
http://purl.org/coar/resource_type/c_6501
info:ar-repo/semantics/articulo
format article
status_str acceptedVersion
dc.identifier.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/20.500.12123/14582
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0325754122001043
P.M. Favaro, A. Molineri, M.J. Dus Santos et al., Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers, Revista Argentina de Microbiología, https://doi.org/10.1016/j.ram.2022.10.002
0325-7541
https://doi.org/10.1016/j.ram.2022.10.002
url http://hdl.handle.net/20.500.12123/14582
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0325754122001043
https://doi.org/10.1016/j.ram.2022.10.002
identifier_str_mv P.M. Favaro, A. Molineri, M.J. Dus Santos et al., Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers, Revista Argentina de Microbiología, https://doi.org/10.1016/j.ram.2022.10.002
0325-7541
dc.language.none.fl_str_mv eng
language eng
dc.rights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0)
eu_rights_str_mv openAccess
rights_invalid_str_mv http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0)
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Elsevier
publisher.none.fl_str_mv Elsevier
dc.source.none.fl_str_mv Revista Argentina de Microbiología : 1-9 (Available online 17 January 2023)
reponame:INTA Digital (INTA)
instname:Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria
reponame_str INTA Digital (INTA)
collection INTA Digital (INTA)
instname_str Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria
repository.name.fl_str_mv INTA Digital (INTA) - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria
repository.mail.fl_str_mv tripaldi.nicolas@inta.gob.ar
_version_ 1842341410689253376
score 12.623145

Publicaciones similares