Participación del sistema endocannabinoide en el sitio de implantación y de las células infiltrantes en la reabsorción embrionaria inducida por LPS

• Autores: Wolfson, Manuel Luis
• Año de publicación: 2014
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Franchi, Ana María; Vercelli, Claudia Alejandra
• Materia: REABSORCION EMBRIONARIA; LIPOPOLISACARIDO; SISTEMA ENDOCANNABINOIDE; CELULAS MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFERICA; PROGESTERONA; ANANDAMIDA; OXIDO NITRICO; EMBRYONIC RESORPTION; LIPOPOLYSACCHARIDE; ENDOCANNABINOID SYSTEM; PERIPHERAL BLOOD MONONUCLEAR CELLS; PROGESTERONE; ANANDAMIDE; NITRIC OXIDE
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Se ha demostrado una estrecha asociación entre el aborto y cambios en el sistemaendocannabinoide (SEC) en linfocitos periféricos de mujeres. En un modelo murino dereabsorción embrionaria (RE) inducida por LPS estudiamos la participación del SEC tantodel sitio de implantación como de las células inmunes infiltrantes y su posible regulaciónpor progesterona (P). En este modelo observamos niveles plasmáticos elevados del principal endocannabinoide,anandamida (AEA). Por otro lado encontramos que la RE inducida por LPS era muchomenor en ratones transgénicos deficientes en el receptor de cannabinoides tipo 1, como asítambién la disminución de los niveles séricos de P. Demostramos la presencia del SEC enlas células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de ratón y que la actividad de laenzima metabolizante de la AEA (hidrolasa de amidas de ácidos grasos, FAAH) de las PBMC de ratones preñados es mayor que la de los ratones no preñados. Asimismoobservamos un efecto protector de la P sobre la actividad de la FAAH y que el mismoestaba mediado por los receptores clásicos de esta hormona (PR). Encontramos que el 70% de las PBMC estudiadas son linfocitos T, demostramos la presencia de los PR enestas células. Por otro lado el LPS incrementó tanto los niveles de óxido nítrico (NO), como de laenzima que lo sintetiza (NOSi). La P abolió el incremento inducido por el LPS, actuando através de los receptores de glucocorticoides. Durante la RE, la decidua es infiltrada por células del sistema inmune, sufre importantesdaños y finalmente es expulsada. Investigamos el efecto de la infiltración leucocitariasobre la actividad de FAAH en las deciduas mediante un sistema de cocultivo. Cuando lasdeciduas de animales controles se cultivaron en presencia de PBMC provenientes deanimales preñados tratados con LPS, la actividad de la FAAH decidual disminuyó, efectoque fue revertido por la coadministración de P o la de un inhibidor selectivo de la NOSi,aminoguanidina. Asimismo observamos un aumento en la nitración de las proteínasdeciduales y específicamente de la FAAH cuando las decidua se co-cultivaban junto a las PBMC de animales tratados con LPS y que este efecto fue revertido por la P. Este trabajo demuestra que el SEC participa en la RE inducida por LPS y que los cambiosde este sistema en la decidua están influenciados tanto por las células inmunes infiltrantescomo por alteraciones en el sistema endócrino. Palabras claves: Reabsorción embrionaria - Lipopolisacárido - Sistema endocannabinoide - Célulasmononucleares de sangre periférica - Progesterona - Anandamida - Óxido nítrico
A close association between abortion and changes of the endocannabinoid system (eCS) inperipheral lymphocytes of women has been demonstrated. In a murine model of LPSinducedembryonic resorption (EmR), we studied the involvement of eCS in the site ofimplantation and in the infiltrating immune cells and its possible regulation byprogesterone (P). We observed an elevated anandamide (AEA) plasma levels, a major endocannabinoid, inthis model. On the other hand, we found that the LPS-induced less EmR in cannabinoidreceptor 1 (CB1) knock-out mice, together with a lower drop of P plasma levels. Weshowed the presence of eCS in murine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) andthat the PBMC’s fatty acid amide hydrolase activity (FAAH, the main catalytic enzyme for AEA) from pregnant mice was higher than from non pregnant mice. Moreover, weobserved that P, via its classical receptors for this hormone (PR), has a protective effect on FAAH activity. Given that the 70% of PBMC are lymphocytes, we demonstrated thepresence of PR in this subpopulation. Furthermore, LPS produced an increased levels of both nitric oxide (NO) and inducible NO synthase (iNOS). Interestingly, P abolished these LPS effects acting throughglucocorticoid receptors. During EmR, decidua is infiltrated with immune system cells, suffers important damageand is finally expelled. Using a co-culture system, we investigated the effects ofleukocytary infiltration on decidual FAAH activity. When deciduas from control micewere cultured in presence of PBMC from LPS-treated animals, decidual FAAH activitywas abolished. This effect was reverted by the co-administration of P or aminoguanidine (aselective inhibitor of iNOS). When deciduas were co-cultured with PBMC from LPStreated mice, we observed an increase in decidual protein nitration and particularly in FAAH enzyme; an effect that was reverted by P. This work shows that the eCS is involved in the LPS-induced EmR and that changes in thedecidua are influenced both by infiltrating immune cells as well as by alterations in theendocrine system. Keywords: Embryonic resorption - Lipopolysaccharide - Endocannabinoid system - Peripheral bloodmononuclear cells - Progesterone - Anandamide - Nitric oxide
Fil: Wolfson, Manuel Luis. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.