Polimorfismos genéticos como factores de riesgo en pacientes con desórdenes potencialmente malignos y cáncer bucal

• Autores: Carrica, Victoriano Andrés
• Año de publicación: 2020
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Zárate, Ana María; Piemonte, Eduardo David; Morelatto, Rosanna; Fonseca, Ismael
• Materia: Polimorfismo; TP53; CYP1A1; GSTM1; Cáncer bucal; Desórdenes potencialmente malignos; Tabaco; Alcohol; Polymorphism; Oral cancer; Tobacco; Alcohol; Potentially malignant disorders; TP53; CYP1A1; CYP1A1; GSTM1
• Institución: Universidad Nacional de Córdoba

Fil: Carrica, Victoriano Andrés. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Servicio de Diagnóstico y Prevención del Cáncer Bucal; Argentina.
Introducción: El cáncer bucal forma parte de un importante grupo de patologías denominadas Enfermedades Crónicas no Trasmisibles y se caracteriza por que su prevalencia e incidencia cambia de acuerdo al área geográfica, ambas asociadas a factores genéticos, a hábitos y costumbres propios de cada región o cultura. En países en vías de desarrollo como la Argentina, se enfrentan grandes desafíos por responder al aumento en la tasa de mortalidad y morbilidad de los últimos años y en el tratamiento y cuidados posteriores de pacientes con cáncer en estadios avanzados, considerándose una de las principales causas de muerte. Sin embargo, no existen datos sobre la composición genética y las investigaciones sobre este tema podrían aportar conocimientos que mejoren las estrategias de prevención y reduzcan los costes de su tratamiento. El presente estudio investiga si los polimorfismos relacionados al metabolismo de los carcinógenos y a la proliferación celular, actúan como factores de riesgo para los desórdenes potencialmente malignos (DPM) y el cáncer bucal (CB). Objetivo: Investigar si los polimorfismos en el gen CYP1A1 y GSTM1 asociados al metabolismo de los xenobióticos y el gen TP53, asociado a la proliferación celular, actúan como factores de riesgo favoreciendo el desarrollo de DPM y CB; y a la vez determinar si el hábito del tabaquismo y el consumo de alcohol en presencia de estos mismos polimorfismos aumentan la probabilidad de estas patologías. Material y métodos: Se estudiaron pacientes de ambos sexos, mayores de 18 años (n=140) con diagnóstico de CB, DPM y un grupo control constituido por pacientes que asistieron por demanda espontánea a la Cátedra de Estomatología “A” de la Facultad de Odontología de la UNC en el período 2016-2019. Se realizó aislamiento de ADN a partir citologías exfoliativas de mucosa clínicamente sana. Con una de las muestras se realizó un extendido citológico y se lo tiñó con coloración de PAP, para corroborar que la mucosa estuviera sana, la otra muestra se guardó en tubos Eppendorff estériles, en freezer a -20ºC hasta su utilización para extracción de ADN y posterior aplicación de técnica de PCR convencional para los polimorfismos de los genes TP53 y GSTM1 y por RFLP-PCR utilizando enzima de restricción Msl para los polimorfismos de CYP1A1, utilizando los primeros correspondientes. Análisis estadísticos: Los datos categóricos se describieron por frecuencias absolutas y relativas. Se realizó prueba de Fisher, Análisis de Correspondencia Múltiple y Regresión logística. Resultados: En el presente estudio se observó un porcentaje significativamente mayor de hombres (65.9%) en pacientes diagnosticados con CB (p = 0.026); las mujeres fueron mayoría no significativa en pacientes diagnosticados con DPM (62.3%). La lengua fue el área anatómica de más frecuente de aparición de CB y la mucosa yugal fue el lugar más frecuente de DPM. En la población de estudio, en relación al polimorfismo del gen TP53 encontramos altas frecuencias del alelo G, coincidiendo con estudios anteriores realizados en poblaciones caucásicas y con estudios de Argentina en Córdoba (propio) y en Buenos Aires y otras regiones del país. El alelo C (variante mutada) está relacionado con CB y DPM principalmente por el aumento del genotipo heterocigota. Para el polimorfismo CYP1A1 no se encontró asociación significativa con el CB pero sí con los DPM. Para GSTM1 null se encontró una asociación estadísticamente significativa para el grupo con CB, y en el grupo de los DPM no se encontró asociación pero si un aumento en su frecuencia en relación al grupo control, donde se observó mayor frecuencia para el genotipo no null. Se encontró un patrón de asociación entre el CB y el alelo T (wild type) de CYP1A1. Los DPM se relacionan con el alelo C de CYP1A1, con el alelo null del gen GSTM1 (variante mutada), con los hábitos de fumar y consumo de alcohol la presencia del alelo C (variante mutada) del TP53, mientras que el grupo control mostró un patrón de relación con el alelo G de TP53. La presencia de las variantes polimórficas de los polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) estudiados y el hábito de fumar fueron los dos factores asociados con el desarrollo de DPM. Conclusiones: Nuestros resultados coinciden con los estudios realizados en poblaciones caucásicas; se sabe que existe una relación de SNP con la distribución geográfica. Estos estudios tienen beneficios potenciales al permitir la identificación de biomarcadores predictivos y grupos con mayor riesgo de CB y DPM para la implementación de una variedad de estrategias de atención médica. Sin embargo aún es necesario realizar estudios adicionales que incluyan un mayor número de pacientes y en diferentes regiones de Argentina.
Introduction: Oral cancer (OC) is part of an important group of pathologies called NonCommunicable Chronic Diseases and is characterized by the fact that its prevalence and incidence change according to the geographical area, associated with genetic factors, habits and customs of each region or culture. In developing countries such as Argentina, great challenges are faced in responding to the increase in the mortality and morbidity rate of the latter; however, there is no data on the genetic composition of the population that suffers from this disease, thus research on this topic could provide knowledge to improve prevention strategies and reduce treatment costs. The present study investigates whether polymorphisms related to carcinogen metabolism and cell proliferation act as risk factors for potentially malignant disorders (PMD) and OC. Objective: To investigate whether the polymorphisms in the CYP1A1 and GSTM1 genes associated with xenobiotic metabolism and the TP53 gene, related to cell proliferation, fact as risk factors favoring the development of PMD and BC; and at the same time to determine if smoking and alcohol consumption in the presence of these same SNPs increase the probability of these pathologies. Material and methods: It was studied patients of both sexes , older than 18 years (n =140) with diagnosis of OC or PMD and a control group.Patients were attended by spontaneous request in the Chair of Stomatology "A" of the Faculty of Dentistry, universidad nacional de Córdoba, in the period 2016-2019. Two exfoliative cytologies of clinically healthy mucosa were performed. A cytological smear was made with one of the samples and it was stained with PAP staining, to confirm that the mucosa was healthy; the other sample was stored in sterile Eppendorff tubes, in a freezer at -20ºC until its use for DNA extraction and subsequent application of the conventional PCR technique for the polymorphisms of the TP53 and GSTM1 genes and the RFLP-PCR technique using restriction enzyme Msl for the CYP1A1 polymorphisms, using the corresponding primers. Statistical analysis: Categorical data were described by absolute and relative frequencies. Fisher's test, Multiple Correspondence Analysis and logistic regression were performed. Results: In the present study, a significantly higher percentage of men (65.9%) was observed in patients diagnosed with BC (p = 0.026); women were a non-significant majority in patients diagnosed with MPD (62.3%). The tongue was the anatomical area with the most frequent appearance of CB and the jugal mucosa was the most frequent site of PMD. In the study population, in relation to the polymorphism of the TP53 gene, we found high frequencies of the G allele, coinciding with previous studies carried out in Caucasian populations and with studies in Argentina in Córdoba and in Buenos Aires and other regions of the country. The C allele (mutated variant) is related to OC and PMD mainly due to the increase in the heterozygous genotype. For the CYP1A1 polymorphism, no significant association was found with OC but it was with PMD. For GSTM1 null, a statistically significant association was found for the group with OC, and in the group of PMD, no association was found, but an increase in its frequency in relation to the control group, where a higher frequency was observed for the non-null genotype. A pattern of association was found between OC and the T (wild type) allele of CYP1A1. The PMD are related to the C allele of CYP1A1, with the null allele of the GSTM1 gene (mutated variant), with smoking and alcohol consumption the presence of the C allele (mutated variant) of TP53, while the control group showed a pattern of relationship with the G allele of TP53. The presence of polymorphic variants of the single nucleotide polymorphisms (SNPs) studied and smoking were the two factors associated with the development of PMD.Conclusions: Our results coincide with the studies carried out in Caucasian populations; a SNP relationship with geographic distribution is known to exist. These studies have potential benefits in allowing the identification of predictive biomarkers and groups at increased risk of OC and PMD for the implementation of a variety of health care strategies. However, it is still necessary to carry out additional studies that include a greater number of patients and in different regions of Argentina.
2024-02-01
Fil: Carrica, Victoriano Andrés. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Servicio de Diagnóstico y Prevención del Cáncer Bucal; Argentina.