Determinación del biomarcador tumoral epitelial EpCAM en muestras de pacientes oncológicos mediante un inmunosensor electroquímico con nanopartículas magnéticas como plataforma de...

Autores
Regiart, Daniel Matias Gaston; Ortega, Francisco; Fernández Baldo, Martín Alejandro; Sanz, María Isabel; Bertolino, Franco Adrián; Serrano, María Carla; Alvarez Lorente, Janet; Raba, Julio
Año de publicación
2013
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
EpCAM es una proteína de superficie celular que se sobreexpresa en algunos cánceres de origen epitelial como lo son el de pulmón, colorrectal, mama, próstata y el de origen hepático [1]. En los últimos años, anticuerpos contra EpCAM han sido ampliamente utilizados para capturar y cuantificar células tumorales circulantes en pacientes con cáncer de origen epitelial [2]. Por lo tanto, el desarrollo de metodologías analíticas sensibles para la determinación del antígeno EpCAM sería de gran relevancia tanto para el diagnóstico como para monitorear el tratamiento de estos tipos de cánceres. En el presente trabajo se desarrolló un inmunosensor electroquímico para determinar EpCAM en muestras de pacientes con cáncer de mama. La detección de EpCAM se realizó mediante un inmunoensayo competitivo indirecto, donde antígenos de EpCAM fueron inmovilizados sobre nanopartículas magnéticas modificadas con grupos 3-aminopropilos [3] y manipuladas por imanes. Los antígenos EpCAM presentes en la muestra compiten inmunológicamente, por un anticuerpo monoclonal anti EpCAM IgG de ratón, con los antígenos inmovilizados, el cual es detectado mediante un segundo anticuerpo anti-IgG de ratón marcado con la enzima peroxidasa, la que, en presencia de peróxido de hidrógeno, cataliza la oxidación de 4-ter-butil-catecol a 4-terbutil-ortoquinona. Esta última es reducida electroquímicamente en la superficie de un electrodo de láminas impresas de grafito a -0,15 V. La corriente medida es inversamente proporcional a la concentración de antígeno EpCAM presente en la muestra del paciente. El inmunosensor desarrollado mostró elevada sensibilidad, un bajo límite de detección y un tiempo total de análisis menor a 30 min, lo cual podría proporcionar un nuevo enfoque a la detección en el diagnóstico clínico.
Fil: Regiart, Daniel Matias Gaston. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Ortega, Francisco. Genyo. Centre For Genomics And Oncological Research; España
Fil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Departamento de Química. Área de Química Analítica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Sanz, María Isabel. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Bertolino, Franco Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Serrano, María Carla. Genyo. Centre For Genomics And Oncological Research; España
Fil: Alvarez Lorente, Janet. Genyo. Centre For Genomics And Oncological Research; España
Fil: Raba, Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
VII Congreso Argentino de Química Analítica: “Sustentabilidad e Integración Multidisciplinaria: nuevos desafíos de la Química Analítica”
Mendoza
Argentina
Asociacion Argentina de Química Analítica
Materia
BIOMARCADOR TUMORAL
EPCAM
INMUNOSENSOR ELECTROQUIÍMICO
NANOPARTÍCULAS MAGNÉTICAS
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
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Institución
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Por lo tanto, el desarrollo de metodologías analíticas sensibles para la determinación del antígeno EpCAM sería de gran relevancia tanto para el diagnóstico como para monitorear el tratamiento de estos tipos de cánceres. En el presente trabajo se desarrolló un inmunosensor electroquímico para determinar EpCAM en muestras de pacientes con cáncer de mama. La detección de EpCAM se realizó mediante un inmunoensayo competitivo indirecto, donde antígenos de EpCAM fueron inmovilizados sobre nanopartículas magnéticas modificadas con grupos 3-aminopropilos [3] y manipuladas por imanes. Los antígenos EpCAM presentes en la muestra compiten inmunológicamente, por un anticuerpo monoclonal anti EpCAM IgG de ratón, con los antígenos inmovilizados, el cual es detectado mediante un segundo anticuerpo anti-IgG de ratón marcado con la enzima peroxidasa, la que, en presencia de peróxido de hidrógeno, cataliza la oxidación de 4-ter-butil-catecol a 4-terbutil-ortoquinona. Esta última es reducida electroquímicamente en la superficie de un electrodo de láminas impresas de grafito a -0,15 V. La corriente medida es inversamente proporcional a la concentración de antígeno EpCAM presente en la muestra del paciente. El inmunosensor desarrollado mostró elevada sensibilidad, un bajo límite de detección y un tiempo total de análisis menor a 30 min, lo cual podría proporcionar un nuevo enfoque a la detección en el diagnóstico clínico.Fil: Regiart, Daniel Matias Gaston. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Ortega, Francisco. Genyo. Centre For Genomics And Oncological Research; EspañaFil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Departamento de Química. 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