Optimización de la remoción de Cr(VI) de Candida glabrata SLF-2 por el método superficie de respuesta (RSM)

Autores
Castro, María Fernanda; Escudero, Luis Ariel; Villegas, Liliana Beatriz
Año de publicación
2023
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
En estudios anteriores se demostró la capacidad de Candida glabrata SLF-2 para tolerar y resistir concentraciones de 25-100 mgL-1 de Cr(VI). El objetivo de este trabajo fue optimizar el medio de cultivo líquido para la remoción y crecimiento de la cepa en presencia de 100 mgL-1 Cr(VI) utilizando metodología de superficie de respuesta. Para identificar los factores de incidencia significativa, en primer lugar, se utilizó un diseño Plackett-Burman (PB) definido con 7 factores. Los factores y sus niveles (-1,0,+1) fueron: Fuente de carbono (FC) [A]: Glucosa/Glicerol (10 gL-1); [B]: (NH4)2SO4 (gL-1):0,3-0,6-0,9; [C]: pH : 4-5,5-7; [D]: CaCl2 (gL-1):0,05-0,1-0,15; [E]: MgSO4 (gL-1): 0,1-0,4-0,7; [F]: K2HPO4 (gL-1) 0,5-1-1,5; [G]: extracto de levadura (gL-1 ): 0,5-1-1,5. Las respuestas estudiadas fueron Cr(VI) removido o R1 (mgL-1) y biomasa o R2 (gL-1). R1 se determinó con la técnica Difenilcarbazida (DFC) y R2 con la técnica de peso seco. En condiciones estériles, se prepararon 40 mL de cada medio, ajustando el pH con soluciones buffers adecuadas. Se ajustó a una concentración final de 1x106 UFC mL-1 y se incubaron a 30°C y 180 rpm durante 48h. El resultado del diseño PB indicó que los factores con influencia significativa para R1 y R2, fueron: [A], [B] y [C]. El cambio de Glucosa a Glicerol tuvo un efecto negativo, mientras que [B] y [C] mostraron un efecto positivo para ambas respuestas. La optimización de las variables significativas se realizó aplicando el método de superficie de respuesta, con un diseño central compuesto (DCC). Para optimizarambas respuestas en forma conjunta se usó la función Deseabilidad (D), buscandomaximizar R1 y R2. La configuración de los factores para el DCC se realizó de la siguientemanera: [A] Glucosa: 10 -20 gL-1 ; [B] (NH4)2SO4: 0,9 - 1,5 gL-1 ; [C]: pH: 5-7. Los resultados de R1 mostraron valores de Cr(VI) removido superiores a 50 mgL-1 en los medios de cultivo definidos con 1,7 gL-1 de sulfato de amonio y valores de glucosa y pH correspondientes a los puntos centrales del diseño. En estas condiciones también se observaron los valores máximos de R2. La optimización con la función D, permitió encontrar cinco regiones experimentales con un valor de D entre 0,958 y 0,985, adecuada para encontrar la zona óptima para ambas respuestas. La composición del medio resultante para optimizar ambas respuestas fue (en g/L): Glucosa, 16,52; extracto de levadura, 1; (NH4)2SO4, 1,5; K2HPO4, 0,125; KH2PO4, 0,125; MgSO4.7H2O, 0,1 y pH 6,82. Estos resultados fueron verificados experimentalmente mediante ensayos independientes. El diseño experimental utilizado fue adecuado para optimizar la remoción y crecimiento de C. glabrata SLF-2 obteniéndose un incremento del 20% en la remoción del metal respecto al medio de cultivo sin optimizar.
Fil: Castro, María Fernanda. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Escudero, Luis Ariel. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
Fil: Villegas, Liliana Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentina
XIV Simposio Redbio Argentina
Ciudad Autónoma de Buenos Aires
Argentina
Comisión Directiva de REDBIO Argentina Asociación Civil
Materia
REMOCION
CROMO
LEVADURA
OPTIMIZACION
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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CONICET Digital (CONICET)
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Los factores y sus niveles (-1,0,+1) fueron: Fuente de carbono (FC) [A]: Glucosa/Glicerol (10 gL-1); [B]: (NH4)2SO4 (gL-1):0,3-0,6-0,9; [C]: pH : 4-5,5-7; [D]: CaCl2 (gL-1):0,05-0,1-0,15; [E]: MgSO4 (gL-1): 0,1-0,4-0,7; [F]: K2HPO4 (gL-1) 0,5-1-1,5; [G]: extracto de levadura (gL-1 ): 0,5-1-1,5. Las respuestas estudiadas fueron Cr(VI) removido o R1 (mgL-1) y biomasa o R2 (gL-1). R1 se determinó con la técnica Difenilcarbazida (DFC) y R2 con la técnica de peso seco. En condiciones estériles, se prepararon 40 mL de cada medio, ajustando el pH con soluciones buffers adecuadas. Se ajustó a una concentración final de 1x106 UFC mL-1 y se incubaron a 30°C y 180 rpm durante 48h. El resultado del diseño PB indicó que los factores con influencia significativa para R1 y R2, fueron: [A], [B] y [C]. El cambio de Glucosa a Glicerol tuvo un efecto negativo, mientras que [B] y [C] mostraron un efecto positivo para ambas respuestas. 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Fil: Castro, María Fernanda. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentina
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