Non‐polar extracts of Nicotiana glauca (Solanaceae) induce apoptosis in human rhabdomyosarcoma cells

Autores
Musso, Florencia Antonella; Pronsato, Lucía; Milanesi, Lorena Magdalena; Vasconsuelo, Andrea Anahi; Faraoni, María Belén
Año de publicación
2020
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Rhabdomyosarcoma (RMS) is the most common soft-tissue tumour in children andadolescents. It originates in normal skeletal muscle from myogenic cells that have failed to fully differentiate, and it usually has a poor prognosis. Current RMS therapy has many adverse effects. Hence, new treatments are needed. Various pharmacological properties, such as analgesic, antineoplastic, antimicrobial, and antiparasitic properties, have been demonstrated in species of the Solanaceae family. We performed ethanolic extraction from leaves of Nicotiana glauca (Solanaceae), and the extract was successively partitioned with n-hexane, chloroform, and ethyl acetate. We evaluated the effects of extracts on RMS cells, and we found that the extracts trigger apoptosis. By bio-guided fractionation assays, we identified the apoptotic agents. Morphological assessment after apoptotic cell induction of cultured cells, mitochondrial and nuclear morphology by Mitotracker, and 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining, respectively, were analysed in fluorescent microscopy. The capacity of the cells to migrate or proliferate was analysed by the Petit assay, followed by methylene blue staining. NMR and GC-MS spectrometry were used to identify palmitic acid and scopoletin as the phytochemicals responsible for the observedeffects. These results indicate that these compounds are apoptotic inducers and they could be useful as chemotherapeutic agents against muscle tumours.
Rabdomiossarcoma (RMS) é o tumor de tecidos moles mais comum em crianças e adolescentes. Ele se origina no músculo esquelético normal a partir das células miogênicas que não conseguiram-se diferenciar completamente e pelo geral tem um prognóstico ruim. A terapia atual com RMS tem muitos efeitos adversos e portanto, novos tratamentos são necessários. Várias propriedades farmacológicas, como propriedades analgésica, antineoplásica, antimicrobiana e antiparasitária, foram demonstradas em espécies da família Solanaceae. Neste trabalho, foi realizada a extração etanólica das folhas de Nicotiana glauca (Solanaceae), e o extrato foi particionado sucessivamente com n-hexano, clorofórmio e acetato de etila. Avaliamos os efeitos dos extratos nas células RMS e descobrimos que os extratos desencadeiam apoptose. Pelos ensaios de fracionamento bio-guiado, identificamos os agentes apoptóticos. A avaliação morfológica após indução da apoptose das células cultivadas e a morfologia mitocondrial e nuclear por coloração com Mitotracker e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI), respectivamente, foram analisadas com microscopia fluorescente. A capacidade das células para migrar ou proliferar foi analisada pelo ensaio Petit, seguido pelacoloração com azul de metileno. A espectrometria de RMN e GC-MS foi utilizada para a identificação o ácido palmítico e a escopoletina como os fitoquímicos responsáveis pelos efeitos observados. Estes resultados indicam que estes compostos são indutores apoptóticos e poderiam ser úteis como agentes quimioterapêuticos contra tumores musculares.
Fil: Musso, Florencia Antonella. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; Argentina
Fil: Pronsato, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Milanesi, Lorena Magdalena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Vasconsuelo, Andrea Anahi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Faraoni, María Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; Argentina
Materia
APOPTOSIS
NICOTIANA GLAUCA
PALMITIC ACID
RHABDOMYOSARCOMA
SCOPOLETIN
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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We evaluated the effects of extracts on RMS cells, and we found that the extracts trigger apoptosis. By bio-guided fractionation assays, we identified the apoptotic agents. Morphological assessment after apoptotic cell induction of cultured cells, mitochondrial and nuclear morphology by Mitotracker, and 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining, respectively, were analysed in fluorescent microscopy. The capacity of the cells to migrate or proliferate was analysed by the Petit assay, followed by methylene blue staining. NMR and GC-MS spectrometry were used to identify palmitic acid and scopoletin as the phytochemicals responsible for the observedeffects. These results indicate that these compounds are apoptotic inducers and they could be useful as chemotherapeutic agents against muscle tumours.Rabdomiossarcoma (RMS) é o tumor de tecidos moles mais comum em crianças e adolescentes. 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A avaliação morfológica após indução da apoptose das células cultivadas e a morfologia mitocondrial e nuclear por coloração com Mitotracker e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI), respectivamente, foram analisadas com microscopia fluorescente. A capacidade das células para migrar ou proliferar foi analisada pelo ensaio Petit, seguido pelacoloração com azul de metileno. A espectrometria de RMN e GC-MS foi utilizada para a identificação o ácido palmítico e a escopoletina como os fitoquímicos responsáveis pelos efeitos observados. Estes resultados indicam que estes compostos são indutores apoptóticos e poderiam ser úteis como agentes quimioterapêuticos contra tumores musculares.Fil: Musso, Florencia Antonella. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; ArgentinaFil: Pronsato, Lucía. 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Rabdomiossarcoma (RMS) é o tumor de tecidos moles mais comum em crianças e adolescentes. Ele se origina no músculo esquelético normal a partir das células miogênicas que não conseguiram-se diferenciar completamente e pelo geral tem um prognóstico ruim. A terapia atual com RMS tem muitos efeitos adversos e portanto, novos tratamentos são necessários. Várias propriedades farmacológicas, como propriedades analgésica, antineoplásica, antimicrobiana e antiparasitária, foram demonstradas em espécies da família Solanaceae. Neste trabalho, foi realizada a extração etanólica das folhas de Nicotiana glauca (Solanaceae), e o extrato foi particionado sucessivamente com n-hexano, clorofórmio e acetato de etila. Avaliamos os efeitos dos extratos nas células RMS e descobrimos que os extratos desencadeiam apoptose. Pelos ensaios de fracionamento bio-guiado, identificamos os agentes apoptóticos. A avaliação morfológica após indução da apoptose das células cultivadas e a morfologia mitocondrial e nuclear por coloração com Mitotracker e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI), respectivamente, foram analisadas com microscopia fluorescente. A capacidade das células para migrar ou proliferar foi analisada pelo ensaio Petit, seguido pelacoloração com azul de metileno. A espectrometria de RMN e GC-MS foi utilizada para a identificação o ácido palmítico e a escopoletina como os fitoquímicos responsáveis pelos efeitos observados. Estes resultados indicam que estes compostos são indutores apoptóticos e poderiam ser úteis como agentes quimioterapêuticos contra tumores musculares.
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