Análisis molecular del gen de DUOX2 en pacientes con hipotiroidismo congenito por bloqueo de organificación de yodo
- Autores
- Belforte, Fiorella Sabrina; Osorio Larroche, Carolina; Olcese, María Cecilia; Citterio, Cintia Eliana; Targovnik, Hector Manuel; Rivolta, Carina Marcela
- Año de publicación
- 2012
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- El hipotiroidismo congénito, de alta prevalencia (1/2100), es un desorden primario con un modo de herencia autosómico recesivo. Los bloqueos de organificación de yodo representan el 10% de los casos, pudiendo ser causados por defectos en la tiroperoxidasa (TPO) o en proteínas vinculadas con la síntesis de H2O2 (Sistema DUOX). Se partió de una población de 36 pacientes con diagnóstico de hipotiroidismo congénito, bocio y test de descarga de perclorato positivo en los cuales no se habían identificado, en una primera etapa, mutaciones en el gen de TPO. Con el objetivo de identificar posibles alteraciones en el gen de dual oxidasa 2 (DUOX2) se amplificaron por PCR los 33 exones de DUOX2 y sus regiones intrónicas flanqueantes. Los productos fueron analizados por SSCP y aquellos con migración diferencial fueron secuenciados. Se realizó el análisis bioinformático predictivo de la estructura secundaria y terciaria de las proteínas mutadas y la exploración del grado de conservación evolutiva de las mismas. Se identificaron tres nuevas mutaciones en el gen de Duox2: c.1057_1058delTT (exón 9),p.F353fsX388; c. 3264_3267 delCAGC,p.A1088fsX1100 (exón 24) y g.IVS17-1G>C (Intrón 17). Se evidenció también la mutación c.1271T>G,p.Y425X (exón 11) descripta previamente. Se identificaron dos polimorfismos descriptos y uno nuevo respectivamente: c.413C>T,p.Pro138Leu (exón 4); c.908C>G,p.Pro303Arg (exón 7) y c.1043A>G;p.N348S (exón 11) junto con dos variantes raras de secuencia: gIVS27+9C>T (Intrón 27) y c.3042G>A,p.A1014A (exón 24).Teniendo en cuenta que esta patología es una de las causas más comunes de retraso mental prevenible con instauración temprana del tratamiento de reemplazo hormonal, el empleo de las citadas técnicas de biología molecular es de utilidad para la comprensión de la fisiopatología molecular del hipotiroidismo neonatal así como también mejorar su diagnóstico asegurando tanto el asesoramiento genético a las familias afectadas como un adecuado tratamiento.
Fil: Belforte, Fiorella Sabrina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina
Fil: Osorio Larroche, Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Genética y Biología Molecular; Argentina
Fil: Olcese, María Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Genética y Biología Molecular; Argentina
Fil: Citterio, Cintia Eliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Genética y Biología Molecular; Argentina
Fil: Targovnik, Hector Manuel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Genética y Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina
Fil: Rivolta, Carina Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Genética y Biología Molecular; Argentina
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Con el objetivo de identificar posibles alteraciones en el gen de dual oxidasa 2 (DUOX2) se amplificaron por PCR los 33 exones de DUOX2 y sus regiones intrónicas flanqueantes. Los productos fueron analizados por SSCP y aquellos con migración diferencial fueron secuenciados. Se realizó el análisis bioinformático predictivo de la estructura secundaria y terciaria de las proteínas mutadas y la exploración del grado de conservación evolutiva de las mismas. Se identificaron tres nuevas mutaciones en el gen de Duox2: c.1057_1058delTT (exón 9),p.F353fsX388; c. 3264_3267 delCAGC,p.A1088fsX1100 (exón 24) y g.IVS17-1G>C (Intrón 17). Se evidenció también la mutación c.1271T>G,p.Y425X (exón 11) descripta previamente. 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Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Osorio Larroche, Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Genética y Biología Molecular; ArgentinaFil: Olcese, María Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. 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El hipotiroidismo congénito, de alta prevalencia (1/2100), es un desorden primario con un modo de herencia autosómico recesivo. Los bloqueos de organificación de yodo representan el 10% de los casos, pudiendo ser causados por defectos en la tiroperoxidasa (TPO) o en proteínas vinculadas con la síntesis de H2O2 (Sistema DUOX). Se partió de una población de 36 pacientes con diagnóstico de hipotiroidismo congénito, bocio y test de descarga de perclorato positivo en los cuales no se habían identificado, en una primera etapa, mutaciones en el gen de TPO. Con el objetivo de identificar posibles alteraciones en el gen de dual oxidasa 2 (DUOX2) se amplificaron por PCR los 33 exones de DUOX2 y sus regiones intrónicas flanqueantes. Los productos fueron analizados por SSCP y aquellos con migración diferencial fueron secuenciados. Se realizó el análisis bioinformático predictivo de la estructura secundaria y terciaria de las proteínas mutadas y la exploración del grado de conservación evolutiva de las mismas. Se identificaron tres nuevas mutaciones en el gen de Duox2: c.1057_1058delTT (exón 9),p.F353fsX388; c. 3264_3267 delCAGC,p.A1088fsX1100 (exón 24) y g.IVS17-1G>C (Intrón 17). Se evidenció también la mutación c.1271T>G,p.Y425X (exón 11) descripta previamente. Se identificaron dos polimorfismos descriptos y uno nuevo respectivamente: c.413C>T,p.Pro138Leu (exón 4); c.908C>G,p.Pro303Arg (exón 7) y c.1043A>G;p.N348S (exón 11) junto con dos variantes raras de secuencia: gIVS27+9C>T (Intrón 27) y c.3042G>A,p.A1014A (exón 24).Teniendo en cuenta que esta patología es una de las causas más comunes de retraso mental prevenible con instauración temprana del tratamiento de reemplazo hormonal, el empleo de las citadas técnicas de biología molecular es de utilidad para la comprensión de la fisiopatología molecular del hipotiroidismo neonatal así como también mejorar su diagnóstico asegurando tanto el asesoramiento genético a las familias afectadas como un adecuado tratamiento. |
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