El sistema fibrinolítico en pacientes sépticos

• Autores: Duboscq, Cristina
• Año de publicación: 1997
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Kordich, Lucía Clelia
• Materia: SEPSIS; FIBRINOLISIS; PLASMINOGENO; ELASTASA; MINIPLASMINOGENO; SEPSIS; FIBRINOLYSIS; PLASMINOGEN; ELASTASE; MINIPLASMINOGEN
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Sepsis es la respuesta inflamatoria sistémica a la infección, que cursa con una lesión endotelial,producto de la activación de diversos sistemas plasmáticos y celulares, los que conducen, entre otrasalteraciones, a un desbalance hemostático. Estudios previos de la Dra. Kordich, en un gupo pequeño de pacientes sépticos, han demostradoque los niveles plasmáticos del plasminógeno (Plg) estaban disminuidos, mientras que los de α2-antiplasmina (APL) se mantenían normales. Los objetivos de este trabajo fueron: a) Estudiar en forma seriada los componentes del sistema hemostático (especialmente si el Plgestaba disminuido) y cuáles de ellos estaban relacionados con la probabilidad de sobrevida en 45pacientes sépticos consecutivos. b) Investigar si la acción de las proteasas leucocitarias ( que degradan in vitro al Plg generando,entre otros fragmentos, miniplasminógeno) podrían ser la causa del descenso de los nivelesplasmáticos del plasminógeno. c) Estudiar in vitro si el miniPlg presenta actividad fibrinolítica. La actividad plasmática de Plg fue significativamente menor (p<0,000l) en el plasma de lospacientes sépticos [62 (15-106)%, mediana y rango] que en los grupos controles. La probabilidad desobrevida puede expresarse en función de los niveles de Plg o de la relación Plg/APL (p<0,003). Lacurva ROC permitió establecer un punto de corte para el Plg de 65%, la sensibilidad fue 90% y laespecificidad, 66,7%; para un punto de corte Plg/APL=0,65, la sensibilidad fue 95,2% y laespecificidad fue 70,8%. La concentración del complejo elastasa - α1-inhibidor de proteinasa fue mayor en los sépticosque en los grupos controles. El Plg humano purificado es degradado in vitro por elastasa leucocitaria, por extracto de enzimasleucocitarias y por polimorfonucleares degranulados. El proceso proteolítico origina fragmentosentre 45 y 30 kD analizados por Western blot. El fragmento de alrededor de 38 kD reacciona con unanticuerpo monoclonal anti-miniPlg. El 33 % de los plasmas de los pacientes sépticos mostraro por Western blot una banda de 38 kDcorrespondiente a miniPlg, no presente en el plasma normal, sugiriendo la acción in vivo de lasproteasas leucocitarias. El miniPlg presentó menor capacidad fibrinolítica en todos los rangos de concentracionesestudiados (0,1-1,3 μM) cuando es activado por el activador tisular del Plg (t-PA). El tiempo de lisisde un coágulo de fibrina fresco fue (2,3 ± 0,06) min. para el Plg y (9,8 ± 0,1)min para el miniPlg. Elsistema miniPlg/rt-PA fue incapaz de lisar completamente un coágulo formado por acción detrombina sobre plasma humano depletado de Plg. En resumen los pacientes sépticos presentan un estado hipofibrinolíico, por descenso de losniveles plasmáticos de Plg y porque el miniPlg, generado por acción de las enzimas leucocitarias, esactivado sólo parcialmente por el t-PA.
Sepsis is a systemic inflammatory response to infection, with endothelin damage and alteationsin the coagulation and fibrinolysis systems. Dr. Kordich previous studies of, in few septic patients,showed low plasminogen levels and normal α2-antiplasmina (APL) levels. The aims of these thesis were: a) To study hemostatic system (specially Plg in the 45 septic consecutive patients during a week)and to investigated propectively which hemostatic parameters has a prognostic value for survivalfrom sepsis. b) To investigate if leukocyte protease action in vitro, (which degrades Plg, producing severalfragments one of them called miniplasminogen) causes the decrease of Plg plasmatic levels. c) To study if miniPlg is able to produce clot lysis when it is activated by rt-PA, urokinase andstreptokinase. Plasminogen levels were significantly lower (p<0,001) in plasma of septic patients [62(15-106)%,median and range] than control group. Plasminogen alone on the ratio ogf Plg/antiplasmin were good markets for survival fromsepticemia (p<0,03), studing by logistic regression. The ROC curve allows to stablish a cut off value of 65% for the plasminogen with a sensitivityof 95,2% and specificity of 70,8%. Purified human Plg was degraded in vitro by elastase, leucocyte extract and degranulatedpolymorphonuclear producing several fragments between 45-30 kD studing by Western blot. Theband of 38 kD reacts with miniplasminogen selective monoclonal antibody. MiniPlg is less efficient than Plg to produce clot lysis in all the studied concentrations (0,1-2μM). Clot lysis time was (2,3 ± 0,06) min. for Plg and (9,8 ± O,1) min for miniPlg. In Plg depleted humanplasma miniPlg is unable to produce the complete clot lysis in presence of rt-PA. Septic patients show a hipofibrinolytic state due to decreasing of plasmatic Plg levels andbecause of miniPlg, producing by leukocyte protease Plg digestion, has a poor fibrinolytc activitywhen it is activated by rtPA.
Fil: Duboscq, Cristina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.