Nuevo método para investigar la presencia de tuyona - de ajenjo u otros aceites esenciales - en bebidas alcohólicas, basado en la cromatografía de su 2-4-Dinitrofenilhidrazona

• Autores: Cortina, Beatriz Raquel
• Año de publicación: 1954
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Montes, Adolfo Leandro
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

A- ANTECEDENTES BIBLIOGRAFICOS I) El problema higiénico-social del ajenjo y sucedáneos en el exterior y enel país. II) Aceites esenciales que contienen tuyona y otros componentes carbonílicos,de uso vinculado al ajenjo. III) Características físico-químicas y farmacológicas de las tuyonas, pinocanfona,fencona, carvona, anetol y anisaldehido. IV) La cromatografía en sus aplicaciones generales y analíticas en especial. Antecedentes sobre su aplicación en el estudio de los aceites esenciales. B- TRABAJO EXPERIMENTAL I) Aplicación de la Reacción de Legal. II) Preparación de 2-4-dinitrofenilhidrazonas de las tuyonas y otros componentescarbonílicos de aceites esenciales y su cromatógrafïa. Preparación de series "tipo" para determinaciones cuantitativas. III) Aislación de los aceites esenciales de las bebidas alcohólicas para investigartuyona y técnica aplicada para obtener los derivados y efectuar la cromatografía. IV) Cromatografía de los derivados obtenidos del ajenjo, salvia officinalis,tanaceto, hisopo, hinojo, anís, anetol y sus mezclas. V) Sensibilidad del método propuesto. Incompatibilidades y alcance. VI) Conclusiones. I) El ajenjo (Artemisia Absinthium) es considerado la más perniciosa de todaslas bebidas, no sólo por sus efectos fisiológicos (provoca epilepsia y tuberculosis)sino también por la seducción irresistible que produce en el bebedor. Diferentes autores están de acuerdo en asignar esa acción tóxica del ajenjoa un compuesto integrante del aceite esencial: la tuyona. Existen otros aceites esenciales, agrupados bajo el nombre de "bebidas epileptógenas",tales como hisopo, romero, hinojo y salvia, que provocan transtornossemejantes a los de tuyona. El vermouth posee diversas sustancias vegetales que integran su composiciónaromática, entre ellas se encuentra principalmente el ajenjo. Teniendo en cuenta la peligrosa acción del ajenjo, los gobernantes de muchasnaciones y especialmente de Francia, se preocuparon en tratar de prohibir su consumo. Aparecieron así numerosas leyes y decretos, y una de las más importantes esla Ley francesa del 17 de julio de 1922. Laprohibición se extendía también a los licores similares, entendiéndose portales, a todas las bebidas cuyo sabor y olor dominantes son semejantes al anís yque dan por adición de siete volúmenes de agua destilada, una turbidez. En nuestro país se dió a conocer en 1935 la Ley Nn 12.148 que en su artículo 46 establece: "queda prohibida la fabricacion, venta o posesión del ajenjo o bebidassimilares que lo contengan". En los últimos años, en Alemania, se ha llamado también la atención sobre latoxicidad de esas esencias afin de clasificarlas correctamente en la farmacopea. Considerando la importancia de evitar el uso de esos tóxicos, hemos tratadode estudiar, en esta Tesis, una nueva técnica que por su sensibilidad, permita hallarlosaún en pequeñísimas cantidades. II) La tuyona se encuentra extensamente distribuída en forma de dos isómeros:alfa-tuyona, en aceite de tuya y en salvia officinalis; beta-tuyona, en aceite detanaceto y en ajenjo. El hisopo: posee principalmente l-pinocanfona (50%). El hinojo: sus constituyentes fundamentales son anetol y estragol en una proporcióndel 70 a 90%. El anís: el 80 al 90% de su composición está formada por anetol. La salvia: componentes predominantes: tuyona y alcanfor. El tanaceto: posee principalmente beta-tuyona, alcanfor y borneol. III) Tuyona: naturalmente presenta dos diastereoisómeros en equilibrio dinámico. Le corresponde un P.E.=75°. Para aislarla existen diferentes métodos: formaciónde semicarbazona y descomposición con anhídrido ftálico; preparación del compuestobisulfítico y luego regenerarla con álcali; formación de derivados bromados yobtención de hidrazonas. Por oxidación dan ácido tuyacetónico. Pinocanfona: obtenida por destilación fraccionada del aceite de hisopo. Posee un P.E.=2l2°. Fencona: cetona relatiVamente estable e inerte, poco atacada por hidrácidos;el ácido nítrico puede producir su degradación parcial. Carvona: es rápidamente atacada por agentes oxidantes; da derivados halogenados;por acción de la luz produce un compuesto llamada alcanfor-carvona. Anetol: muy insoluble en agua; por acción de la luz y el aire forma una masaviscosa, amarilla. Anisaldehido: se obtiene por oxidación del anetol, se caracteriza por su bajo IV) Las primeras experiencias en el análisis cromatográfico, se debieron a Tswett (1906), actualmente se cree que existieron antes otros investigadores. Sucede un período de latencia hasta 1931 y desde allí comienza su aplicacióna numerosos trabajos, usando diversas técnicas, con resultados excelentes. Su adaptación a los aceites esenciales es relativamente reciente y se tratade un asunto bastante complicado, pues se encuentran componentes diferentes. El Dr.A.L.Montes, en diversos trabajos llegó siempre a muy buenos resultados. El empleo del "chromatostrip" y "chromatobar" han resuelto varios problemas. La cromatografía sobre papel, fundamento de este trabajo, es un método muy cómodo, sencillo y que como se verá pemite llegar a buenas conclusiones. I) Legal, sobre un destilado especial usa como ractivo una solución de nitroprusiatode soda al 10%, que si bien da un resultado positivo con la tuyona no evitalas interferencias del hisopo e hinojo. II) El extracto etéreo de esencia se trata con una determinada cantidad de soluciónalcohólica-sulfúrica de 2-4-dinitrofenilhidrazina. El precipitado de 2-4-dinitrofenilhidrazonase separa al día siguiente y se disuelve en dos ml. de mezclabenceno-ligroína. Para los cromatogramas se usan tiras de papel Whatman 120, de 15/220mm. y sedejan ascender las soluciones por capilaridad hasta 8cm.; una vez secas las tirasse colocan en tubos conteniendo 2ml. de ligroína y el desarrollo llega hasta los 18cm. en atmósfera saturada de disolvente. Las series de tiras "tipo" se obtienen procediendo de la misma manera que antes,pero trabajando con diferentes concentraciones. III) Se probaron varios métodos para la aislación de las esencias pero sólo seobtuvo buenos resultados, cuando se trata el licor con éter de petróleo liviano y solución de ClNa (saturada); se agita y se separa el extracto etéreo. IV) El mismo proceso de aislación y cromatografía de tuyona, se aplica a lasdemás esencias. Se obtienen cromatogramas semejantes a los de tuyona con ajenjo, tanaceto,salvia officinalis e hisopo. Se prepararon diez mezclas con las diferentesesencias. V) El método propuesto da una apreciación correcta de variacones menores de 0,005g%ml. en el contenido de tuyona. Como por esta técnica no puede diferenciarse la tuyona de la pinocanfona (hisopo) se efectuó una cromatografía en columnas de ácido silícico y bentonita. Se determinóel Rf y como resultados finales se obtuvo: Rf tuyona: 0,47; Rf hisopo: 0,3l. VI) La cromatografía de las 2-4-dinitrofenilhidrazonas es un método sencillo,de gran sensibilidad. La única interferencia obviando las de fencona, carvona y anisaldehido es la de pinocanfona que se pone de manifiesto por determinaciones del Rf.
Fil: Cortina, Beatriz Raquel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.