Caracterización de un sistema de enzimas lipolíticas del medio de cultivo de Tetrahymena

• Autores: Florin-Christensen, Jorge
• Año de publicación: 1988
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Rasmussen, Leif
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

En esta Tesis se describe el hallazgo de actividad hemolítica, así comotambién de tres actividades lipolíticas en el medio extracelular delprotozoo ciliado Ietrahymena thermophila. Las enzimas halladas son unafosfolipasa C (EC.3.1.4.3), una fosfolipasa A, (EC.3.1.1.32) y una triacilglicerollipasa (EC.3.1.1.3). Estas enzimas fueron purificadasmediante precipitación fraccionada con sulfato de amonio y cromatografíade intercambio iónico, de filtración en geles y de interacción hidrofóbicaen decil Sepharose 4B. Se encontró así que la fosfolipasa Ccopurífica con actividad hemolítica, no así la triacilglicerol lipasa nila fosfolipasa A, aunque esta última es capaz de acelerar la acciónhemolítica de la fosfolipasa C. Se halló además un segundo factorhemolítico no asociado a fosfolipasas, cuya acción es inhibida porcolesterol y que, junto con la fosfolipasa C, puede dar cuenta de laacción hemolítica causada por el medio extracelular de Tetrahymena. Estesegundo factor podría actuar en forma semejante a ciertas citolisinasbacterianas que causan hemólisis por interacción con el colesterol delas membranas. Las tres enzimas lipolíticas fueron caracterizadas y suspropiedades indican que provienen del sistema lisosomal. El hallazgo delas actividades aquí descriptas proporciona una explicación para elenigmático rol de los fosfonolípidos, un tipo especial de fosfolípidosque predominan en la membrana plasmática de Tetrahymen. Estos compuestospresentan un enlace directo carbono-fósforo que los hace particularmenteresistentes a la hidrólisis enzimática por fosfolipasa C. Poseen,además, un enlace éter en la posición sn-1, que les confiere resistenciaa la acción de fosfolipasa A. Es decir, Tetrahymena, una célula carentede pared celular u otras estructuras protectoras, sería capaz de tolerarsus propias secreciones líticas gracias a este tipo peculiar de fosfolípidos. Otras observaciones presentadas aquí pueden estar relacionadascon particularidades de las membranasde este ciliado. Así debe destacarsela baja proporción de triacilglicerol en la membrana plasmática,contrastando con lo observado para membranas internas de Tetrahymena. Este hecho puede estar vinculado con la secreción de la triacilglicerollipasa. Otro aspecto notable es que esta célula carece totalmente decolesterol, el que es reemplazado por tetrahymanol. Esto puede explicarque el segundo factor hemolitico hallado no actúe sobre la membrana de Tetrahymena y sí sobre la de los eritrocitos. En esta Tesis se proponeque la secreción de enzimas y las particularidades de la membranarepresentan una coadaptación que puede conferir a estos ciliados unaventaja evolutiva, al ser capaces de lisar otras células siendo ellosmismos resistentes. Otros experimentos presentados aquí sugieren, porúltimo, que las actividades lipolíticas secretadas pueden desempeñar unrol destacado en la digestión extracelular e incorporación de fosfolípidosexógenos en este ciliado.
Fil: Florin-Christensen, Jorge. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.