Rol de receptores de tipo Toll en la infección con el virus del tumor mamario Murino

• Autores: Burzyn, Dalia
• Año de publicación: 2006
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Piazzon, Isabel; Nepomnaschy, Irene
• Materia: RECEPTORES DE TIPO TOLL; VIRUS DEL TUMOR MAMARIO MURINO; CELULAS DENDRITICAS; CELULAS T REGULATORIAS; INFECCION RETROVIRAL; TOLL-LIKE RECEPTORS; MOUSE MAMMARY TUMOR VIRUS; DENDRITIC CELLS; REGULATORY T CELLS; RETROVIRAL INFECTION
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

El Virus del Tumor Mamario Murino (MMTV) es un retrovirus transmitido durante la lactancia que utiliza al sistema inmune del huésped para establecer la infección. La acción del superantígeno viral sobre las células T cumple un papel importante en la relación establecida entre el virus y el sistema inmune adaptativo. En este trabajo hemos investigado si el MMTV también puede influenciar la respuesta inmune interactuando con receptores de tipo Toll (TLRs). Utilizando un modelo de infección por MMTV en ratones adultos tolerizados con ligandos de TLR4 o TLR2 determinamos que una de estas moléculas o ambas participan en importantes eventos de las primeras etapas de infección por MMTV: activación temprana de células B, reclutamiento de células B vírgenes e integración viral. Demostramos además que el MMTV induce la activación de células dendríticas (DCs) in vitro, en forma dependiente de TLR4 y TLR2. La infección con MMTV in vivo, a través del amamantamiento, induce aumentos en el porcentaje de DCs en las placas de Peyer (PPs), el sitio de entrada del virus al organismo, y una mayor expresión del receptor de entrada del MMTV en estas DCs, siendo ambos eventos dependientes de TLR4. Determinamos que la infección por amamantamiento también produce en las PPs un incremento en el porcentaje y número absoluto de células CD4+CD25+, una parte importante de las cuales posee especificidad superantigénica. Demostramos que esta población CD4+CD25+ está compuesta por células que presentan un fenotipo de activación (CD4+CD25+Foxp3-) o un fenotipo de célula regulatoria (CD4+CD25+Foxp3+) con capacidad inmunosupresora y que la proporción de estas dos subpoblaciones varía con el tiempo de infección. En ausencia de un TLR4 funcional los aumentos de ambas subpoblaciones son menores. Finalmente, estudiamos los niveles de integración viral en ratones deficientes para TLR4 y determinamos que el nivel de infección alcanzado por el MMTV en estos animales es menor que en los ratones salvajes. En conjunto, estos resultados indican que el TLR4 juega un rol crítico durante la infección del MMTV.
Mouse Mammary Tumor Virus (MMTV) is a retrovirus transmitted during the lactation period. MMTV utilizes the host immune system to establish the infection. The effects of the viral superantigen (Sag) on T cells play an important role in the relationship established between MMTV and the adaptive immune system. In this work we investigated whether MMTV is also able to alter the immune response by interacting with Toll-like receptors (TLRs). We first established an experimental model in which adult mice were tolerized with ligands of TLR4 or TLR2 and subsequently challenged with MMTV. We determined that TLR4, TLR2 or both molecules are involved in important events occured during early stages of infection: B cell activation, naïve B cell homing and viral integration. We then showed that MMTV induces dendritic cell (DC) activation in vitro, by TLR4- and TLR2-dependent mechanisms. In vivo MMTV infection (by breastfeeding) produces an increase in the percentage of DCs in the first site of infection -the Peyer´s patches (PPs)- and an up-regulation of the MMTV cell entry receptor in these cells. Both events are dependent on the presence of a functional TLR4. We determined that in vivo MMTV infection also increases the percentage and absolute number of CD4+CD25+ cells in the PPs. A high percentage of these cells specifically recognizes the viral Sag. We showed that the CD4+CD25+ population is composed by cells with an activation phenotype (CD4+CD25+Foxp3-) and cells with a regulatory T cell phenotype (CD4+CD25+Foxp3+) with immunosuppresive properties. The proportion of both subpopulations varies along time during infection. TLR4-deficient mice showed a diminished increase in both Sag-specific activated and regulatory T cells. Finally, we studied the viral integration during in vivo infection in TLR4-deficient mice, showing that the level of infection is significantly higher in the presence of a functional TLR4. Our results show that TLR4 has a critical role during the infection with MMTV.
Fil: Burzyn, Dalia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.