Caracterización de la línea celular VERO como sustrato para la producción de vacunas virales

• Autores: Gorostiaga, María A.
• Año de publicación: 1999
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Mudry, Marta Dolores; Díaz, Ana M.
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Las líneas celulares establecidas a partir de células de riñón del mono verdeafricano, se han usado durante años en Virología. La investigación y el desarrolloque involucra el uso de líneas celulares requiere el conocimiento preciso de lasespecies de origen y su pureza. Esto se lleva a cabo mediante un monitoreoperiódico de los cultivos celulares que comprende varios marcadores genéticos,incluyendo isoenzimas y cromosomas. La estabilidad del cariotipo de la líneacelular VERO se estudió con métodos de coloración diferencial de los cromosomas,en cultivos continuos estáticos (10 pasajes). Bajo estas condiciones el númeromodal (de 58 a 54) y la estructura del cariotipo variaron, tanto en el número decopias de cromosomas normales como en el de marcadores. Los cambioscuantitativos (el aumento del porcentaje de las células diploides, así como lavariación en la fracción de células que tienen el número modal, ocurren a pesar dela estabilidad de la composición cromosómica, que limita el uso de las células Verocomo sustrato para la preparación de vacunas. Para estandarizar las vacunaspatrón en el proceso de producción, se estudió la influencia potencial que losdiferentes pasajes podrían tener en la capacidad inmunogénica del virus, con elobjetivo de establecer el número máximo y minimo de pasajes que cada tipo de virusadmite, sin alterar las características biológicase inmunológicas de las vacunasvirales que se usan en la actualidad. El método desarrollado y evaluado en diezpasajes es apto para la producción de vacunas antirrábicas de referencia en células VERO.
Non-tumorigenic cell lines established from African green monkey kidney cells havebeen used over years in virology. Research and development involving the use ofcell lines requires precise knowledge of the species of origin and purity of the celllines involved. This can only be assured by periodical monitoring of cultured celllines that involves testing for a combination of genetic markers, includingisoenzymes and chromosomes. The Vero cell line karyotypic stability was carriedout by methods of differential chromosome staining in continuous static cultures (10 passages). Under these conditions, both the modal number of chromosomes (from 58 to 54) and the karyotype structure, namer the copy number of normalchromosomes and the market composition were shown to change. The quantitative changes (the rising percentage of diploid cells, as well as thechange of cell fraction involving the modal number of chromosomes) were shown tooccurr in spite of the chromosome composition stability, which limits the time ofusing Vero cells as a substrate for preparation of vaccines. To the standardizationof pattern vaccines in the production process we studied the potential influence ofdifferent passages on the virus inmunogenic capability, to establish the minimumand maximum number of passages that each type of virus admit, without change inthe biological and inmunological characteristics of viral vaccines that are currentlybeing used. The method developed and evaluated is appropiate for the production ofreferencial antirrabic vaccines on Vero cells.
Fil: Gorostiaga, María A.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.