Cultivo de células luteales porcinas como sustrato para la maduración in vitro de complejos cumulus ovocito porcinos: Establecimiento y caracterización

Autores
Teplitz, Gabriela Maia; Maruri, Alejandro; Cruzans, Paula Romina; Carou, María Clara; Lombardo, Daniel Marcelo
Año de publicación
2016
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
El objetivo de este trabajo fue establecer y caracterizar el cultivo de células luteales porcinas (CLP) para el posterior cocultivo de COC porcinos con el fin de promover la maduración ovocitaria. Para el establecimiento y caracterización del mismo se realizó la disección de cuerpos lúteos obtenidos a partir de ovarios de frigorífico. El tejido luteal se sometió a digestión mecánica y enzimática con colagenasa IV. La suspensión se filtró y centrifugó y las células se diluyeron en 15 mL de medio DMEM/F12 suplementado y se sembraron en 3 frascos de cultivo T25, incubándose en ambiente controlado y renovando el medio cada 48 h. Para el análisis y caracterización del mismo se realizó la evaluación del contenido de lípidos intracelulares por tinción con rojo Nilo, inmunocitoquímica (ICQ) para 3β-hidroxiesteroide Deshidrogenasa (3β-HSD) y determinación de progesterona (P4) por ELISA. Se observó la presencia de gotas lipídicas citoplasmáticas, una producción de P4 en forma creciente medida a las 48, 96 y 144 h de cultivo y casi la totalidad de las células positivas a 3β-HSD, demostrando la capacidad esteroidogénica de las células en cultivo.
Fil: Teplitz, Gabriela Maia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Maruri, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina
Fil: Cruzans, Paula Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina
Fil: Carou, María Clara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Biología Celular y Molecular; Argentina
Fil: Lombardo, Daniel Marcelo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Biología Celular y Molecular; Argentina
Materia
COCULTIVO
LUTEALES
MADURACION
PORCINOS
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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