Organización genómica y transcripcional del operon glucógeno en Agrobacterium tumefaciens

• Autores: Ugalde, Juan Esteban
• Año de publicación: 1998
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis de grado
• Colaborador/a o director/a de tesis: Parodi, Armando José; Lepek, Viviana C.
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Hasta la realización de la presente tesis se habían clonado y secuenciado tres de los genes que participan en la biosíntesis del glucógeno en A. tumefaciens: glgC, glgA ypgm que codifican para la ADP-glucosa pirofosforilasa, glucógeno sintetasa y fosfoglucomutasa respectivamente. El presente trabajo demuestra la existencia, río arriba de este grupo, de otros dos genes más que participan del metabolismo de glucógeno, glgP y glgB que codifican para la glucógeno fosforilasa y enzima ramificante respectivamente quedando el orden de los genes de 5’ a 3’ glgP/glgB/glgC/glgA/pgm. Los dos genes fueron completamente secuenciados. Por otro lado se ha encontrado, mediante la construcción de cepas mutantes y determinación de actividades enzimáticas, reacciones de tanscriptasa reversa-PCR y reacciones de primer extension que este grupo de genes se transcribe como una única unidad transcripcional y que el gen de la pgm, además de leerse como parte de este mensajero policistrónico, posee un mensajero independiente que produciría una proteína 71 aminoácidos más corta que la producida a partir del mensajero mayor. También se ha podido mapear el inicio de ambos transcriptos encontrándose río arriba del inicio del mensajero independiente de la pgm una zona promotora que posee una alta homología con zonas promotoras de genes TraR autoinducibles presentes en los plásmidos Ti de tipo octopinas de A. tumefaciens. Con el fin de corroborar la presencia de un promotor río arriba de la pgm se ha construído una fusión traduccional pgm-lacZ, esta fusión se expresa en A. tumefaciens pero no en E. coli, esto indicaría que este promotor es específico para Agrobacterium.
Fil: Ugalde, Juan Esteban. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.