Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transient Transformation of Arabidopsis thaliana Leaves

Autores
Mangano, Silvina; Gonzalez, Cintia Daniela; Petruccelli, Silvana
Año de publicación
2014
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Transient assays provide a convenient alternative to stable transformation. Compared to the generation of stably transformed plants, agroinfi ltration is more rapid, and samples can be analyzed a few days after inocu-lation. Nevertheless, at difference of tobacco and other plant species, Arabidopsis thaliana remains recalci-trant to routine transient assays. In this chapter, we describe a transient expression assay using simple infi ltration of intact Arabidopsis leaves with Agrobacterium tumefaciens carrying a plasmid expressing a reporter fl uorescent protein. In this protocol, Agrobacterium aggressiveness was increased by a prolonged treatment in an induction medium defi cient in nutrients and containing acetosyringone. Besides, Arabidopsisplants were cultivated in intermediate photoperiod (12 h light–12 h dark) to promote leaf growth.
Fil: Mangano, Silvina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina
Fil: Gonzalez, Cintia Daniela. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina
Fil: Petruccelli, Silvana. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina
Materia
Transient Gene Expression
Arabidopsis Thaliana
Agrobacterium Tumefaciens
Leaf Agroinfi Ltration
Fluorescent Proteins
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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Fil: Mangano, Silvina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina
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description Transient assays provide a convenient alternative to stable transformation. Compared to the generation of stably transformed plants, agroinfi ltration is more rapid, and samples can be analyzed a few days after inocu-lation. Nevertheless, at difference of tobacco and other plant species, Arabidopsis thaliana remains recalci-trant to routine transient assays. In this chapter, we describe a transient expression assay using simple infi ltration of intact Arabidopsis leaves with Agrobacterium tumefaciens carrying a plasmid expressing a reporter fl uorescent protein. In this protocol, Agrobacterium aggressiveness was increased by a prolonged treatment in an induction medium defi cient in nutrients and containing acetosyringone. Besides, Arabidopsisplants were cultivated in intermediate photoperiod (12 h light–12 h dark) to promote leaf growth.
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