Implicancia del grado de sialilación y complejidad de los oligosacáridos de FSH en la regulación de la función ovárica : estudios clínicos y experimentales

• Autores: Loreti, Rosana Nazareth
• Año de publicación: 2012
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Campo, Stella
• Materia: FSH; VARIANTES GLICOSILADAS; GRANULOSA; ESTEROIDOGENESIS; INHIBINAS; EXPRESION GENICA; FSH; GLYCOSYLATION VARIANTS; GRANULOSA; STEROIDOGENESIS; INHIBINS; GENE EXPRESSION
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

La FSH se sintetiza y secreta como una familia de variantes glicosiladas, las cualesdifieren en el grado de sialilación y complejidad de sus oligosacáridos y en la inducciónde respuestas biológicas en células blanco, in vivo e in vitro. El objetivo general de esta Tesis Doctoral fue establecer la relación existente entre las características de loscarbohidratos presentes en la molécula de FSH y la inducción de respuestas biológicasen las células de la granulosa. La acción de variantes glicosiladas, aisladas de FSHrecombinante humana (FSHrh), fue evaluada in vitro utilizando dos modelosexperimentales. Se estudió la producción de inhibinas diméricas en células de lagranulosa de rata; de esteroides e inhibinas en la línea celular de granulosa humana, KGN, como así también el patrón de expresión génica global y la expresión de enzimasesteroidogénicas y subunidades de inhibinas. Estudios in vitro demostraron que elgrado de sialilación y la complejidad de los oligosacáridos presentes en la FSHrh regulóen forma diferencial la producción de esteroides y péptidos. Asimismo, el análisis deontología génica reveló la capacidad que poseen las variantes glicosiladas de FSHrh demodular en forma diferencial la expresión de genes involucrados en funciones oprocesos esenciales para el mantenimiento de la función celular. Las características de las variantes glicosiladas de la FSH circulante fuerondeterminadas en condiciones fisiológicas y en pacientes infértiles con ciclos regulares. Se observaron alteraciones en el grado de sialilación de la FSH circulante en laspacientes con trastornos reproductivos y en mujeres jóvenes ovodonantes. Los resultados obtenidos demuestran que los oligosacáridos de la molécula de FSH regulan distintas funciones de la célula de la granulosa. Alteraciones precoces en elgrado de sialilación de la gonadotrofina podrían comprometer la capacidadreproductiva en la mujer.
FSH is produced and secreted as a family of glycosylation variants which differfrom each other in the oligosaccharide sialylation and complexity and in the inductionof different biological responses in vitro and in vivo. The aim of this Doctoral Thesis wasto establish the relationship between the FSH carbohydrate characteristics and theinduction of biological responses in granulosa cells. The effect of recombinant human FSH glycosylation variants were evaluated in two experimental models in vitro. Dimericinhibin production was assessed in rat granulosa cells, steroids and inhibin productionin human granulosa cell line KGN, as well as global gene expression profile and theexpression of steroidogenic enzymes and inhibin subunits. In vitro studiesdemonstrated that sialylation and complexity of rhFSH oligosaccharides induced adifferential regulation of steroid and inhibin production. Gene ontology analysisrevealed the ability of rhFSH glycosylation variants to differentially modulate theexpression of genes involved in essential cell biological processes and molecular functions. Circulating FSH oligosaccharides characteristics were determined underphysiological conditions and in infertile patients. Alterations in FSH sialylation wereobserved in infertile patients and in ovodonors. The results obtained in this study show that FSH oligosaccharides regulatedifferent functions in granulosa cells. Early alterations in FSH sialylation may jeopardizethe reproductive capacity in women.
Fil: Loreti, Rosana Nazareth. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.