Estudio de la utilidad de las proteínas P22, P30 y P35 de Toxoplasma gondii para el diagnóstico de fase aguda de la toxoplasmosis

• Autores: Costa, Juan Gabriel
• Año de publicación: 2014
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Marcipar, Iván Sergio; Martín, Valentina; Amadio, Ariel Fernando; Guerrero, Sergio Adrián; Lagier, Claudia Marina
• Materia: Toxoplasmosis; Acute; Bioinformatic; P22; P30; P35; Toxoplasmosis; Aguda; Bioinformática; P22; P30; P35
• Institución: Universidad Nacional del Litoral

Fil: Costa, Juan Gabriel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina.
La toxoplasmosis congénita, es la segunda infección transplacentaria más frecuente. Y cuando sucede, existen altas probabilidades de afección de la salud del futuro niño. Pero la toxoplasmosis congénita sólo es posible cuando la madre se encuentra en la fase aguda de la toxoplasmosis. En tales casos, hay tratamientos para evitar que el parásito alcance al gestante, pero estos son peligrosos. Por ello, no deben indicarse a menos que se tenga total seguridad de que la mujer se encuentra en la fase aguda de la infección. En el presente trabajo se evaluaron diferentes regiones de las proteínas P22, P30 y P35 (específicas de la fase aguda) del parásito Toxoplasma gondii, como antígenos recombinantes en ensayos de diagnóstico clínico para diferenciar las fases de la infección. Las diferentes regiones se ensayaron por separado en ELISAs indirectos detectando individualmente anticuerpos específicos IgG, IgA e IgM; en ensayo de avidez; en dot blot y en dot blot semicuantitativo. Además, se realizó un estudio de las proteínas a través de bioinformática. Mediante el cual se consiguió explicar los diferentes resultados de los ensayos experimentales, principalmente logrando ubicar las regiones antigénicas de las proteínas. Respecto a la detección de la fase aguda de toxoplasmosis, se obtuvieron resultados significativos empleando las secuencias antigénicas denominadas P22c y P35B; con la detección de IgG mediante ELISA y con el ensayo de avidez. Inclusive se alcanzó una sensibilidad y especificidad del 100 % al medir avidez de los anticuerpos contra P35B
Congenital toxoplasmosis is the second most common transplacental infection. Moreover, when it happens, there are high chances of health damage in the future child. But congenital toxoplasmosis is possible only when the mother has acute phase of toxoplasmosis. Although there are treatments to prevent the parasite reaches the unborn, they are dangerous. Therefore, they should not be used unless full assurance that the woman is in the acute phase of infection. In this work, different regions of the P22, P30 and P35 proteins (specific acute phase) of the parasite Toxoplasma gondii were evaluated, as recombinant antigens in clinical diagnostic assays to differentiate stages of infection. Different regions separately were tested in indirect ELISAs detecting specific antibodies IgG, IgA and IgM; in avidity assay; in dot blot and semiquantitative dot blot. Furthermore, a study of the proteins was performed using bioinformatics. By which it was possible to explain the different results of experimental trials, mainly placing antigenic regions of proteins. Regarding the detection of toxoplasmosis acute phase, significant results were obtained using antigenic sequences called P22c and P35B; with detection of IgG by ELISA and avidity assay. Even it was reached a sensitivity and specificity of 100% measuring antibody avidity against P35B.
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas