Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma
- Autores
- De Biasio, María Bárbara; Esquivel, Graciela Patricia; Vega, Lucas; Jastrzebski, Fernando Alberto; Almirón, Enrique Celso
- Año de publicación
- 2021
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- Fil: De Biasio, María Bárbara. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Esquivel, Graciela Patricia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Vega, Lucas. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Jastrzebski, Fernando Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Fil: Almirón, Enrique Celso. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.
Las leishmaniasis cutánea y mucosa son enfermedades infecciosas causadas por diferentes especies de protozoos del género Leishmania, transmitidas a humanos y animales por vectores de la familia Psychodidae. En América, una de las especies involucradas corresponde al subgénero Viannia especie braziliensis. En el Servicio Veterinario de Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Veterinarias (UNNE) se optimizaron las condiciones químicas y térmicas para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con la cual se amplificaron dos fragmentos diferentes del genoma de Leishmania braziliensis. Las reacciones fueron PCR sencillas llevadas a cabo con un volumen final de 25ul que contuvieron: 1X de Buffer de PCR, 0,2 pM de cada oligonucleótido cebador (b1/b2 o B1/B2); 0,2mM de una mezcla equimolecular de dNTPs, 1U de Taq ADN polimerasa y 1,5mM MgCU. En todos los casos se incorporaron controles positivos consistentes en ADN de L. braziliensis cedidos gentilmente por el Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben” y controles negativos consistentes en agua destilada. Las condiciones térmicas para la amplificación fueron: desnaturalización inicial: 95°C por 5min, luego 35 ciclos de desnaturalización a 95°C por 30seg; pegado de primer: 61°C por 60seg; extensión: 72°C por 60seg; extensión final: 72°C por 10min; incubación: 4°C hasta su utilización. Los productos de amplificación de ambas reacciones fueron fragmentos de 103pb y 750pb respectivamente. Éstos fueron separados y visualizados por electroforesis en gel de agarosa 2%, teñidos con bromuro de etidio y observados por transiluminación UV. Dada la elevada sensibilidad y especificidad de los métodos moleculares, cuando fueron aplicados a muestras de control positivos ambas dieron bandas de amplificación detectables del tamaño esperado no observándose bandas en muestras de ADN de L. chagasi. - Materia
-
PCR
Zoonosis
ADN - Nivel de accesibilidad
- acceso abierto
- Condiciones de uso
- http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
- Repositorio
- Institución
- Universidad Nacional del Nordeste
- OAI Identificador
- oai:repositorio.unne.edu.ar:123456789/55076
Ver los metadatos del registro completo
id |
RIUNNE_9143e9566e21a41ca4f924839fecbf14 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repositorio.unne.edu.ar:123456789/55076 |
network_acronym_str |
RIUNNE |
repository_id_str |
4871 |
network_name_str |
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) |
spelling |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genomaDe Biasio, María BárbaraEsquivel, Graciela PatriciaVega, LucasJastrzebski, Fernando AlbertoAlmirón, Enrique CelsoPCRZoonosisADNFil: De Biasio, María Bárbara. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Esquivel, Graciela Patricia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Vega, Lucas. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Jastrzebski, Fernando Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Almirón, Enrique Celso. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Las leishmaniasis cutánea y mucosa son enfermedades infecciosas causadas por diferentes especies de protozoos del género Leishmania, transmitidas a humanos y animales por vectores de la familia Psychodidae. En América, una de las especies involucradas corresponde al subgénero Viannia especie braziliensis. En el Servicio Veterinario de Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Veterinarias (UNNE) se optimizaron las condiciones químicas y térmicas para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con la cual se amplificaron dos fragmentos diferentes del genoma de Leishmania braziliensis. Las reacciones fueron PCR sencillas llevadas a cabo con un volumen final de 25ul que contuvieron: 1X de Buffer de PCR, 0,2 pM de cada oligonucleótido cebador (b1/b2 o B1/B2); 0,2mM de una mezcla equimolecular de dNTPs, 1U de Taq ADN polimerasa y 1,5mM MgCU. En todos los casos se incorporaron controles positivos consistentes en ADN de L. braziliensis cedidos gentilmente por el Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben” y controles negativos consistentes en agua destilada. Las condiciones térmicas para la amplificación fueron: desnaturalización inicial: 95°C por 5min, luego 35 ciclos de desnaturalización a 95°C por 30seg; pegado de primer: 61°C por 60seg; extensión: 72°C por 60seg; extensión final: 72°C por 10min; incubación: 4°C hasta su utilización. Los productos de amplificación de ambas reacciones fueron fragmentos de 103pb y 750pb respectivamente. Éstos fueron separados y visualizados por electroforesis en gel de agarosa 2%, teñidos con bromuro de etidio y observados por transiluminación UV. Dada la elevada sensibilidad y especificidad de los métodos moleculares, cuando fueron aplicados a muestras de control positivos ambas dieron bandas de amplificación detectables del tamaño esperado no observándose bandas en muestras de ADN de L. chagasi.Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias2021-11-25info:eu-repo/semantics/conferenceObjectinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfp. 11-11application/pdfDe Biasio, María Bárbara et al., 2021. Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma. En: XLI Sesión de Comunicaciones Científicas. Corrientes: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias, p. 11-11.2451-6732http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/55076spainfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentinareponame:Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)instname:Universidad Nacional del Nordeste2025-09-29T14:29:20Zoai:repositorio.unne.edu.ar:123456789/55076instacron:UNNEInstitucionalhttp://repositorio.unne.edu.ar/Universidad públicaNo correspondehttp://repositorio.unne.edu.ar/oaiososa@bib.unne.edu.ar;sergio.alegria@unne.edu.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:48712025-09-29 14:29:20.993Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) - Universidad Nacional del Nordestefalse |
dc.title.none.fl_str_mv |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma |
title |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma |
spellingShingle |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma De Biasio, María Bárbara PCR Zoonosis ADN |
title_short |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma |
title_full |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma |
title_fullStr |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma |
title_full_unstemmed |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma |
title_sort |
Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma |
dc.creator.none.fl_str_mv |
De Biasio, María Bárbara Esquivel, Graciela Patricia Vega, Lucas Jastrzebski, Fernando Alberto Almirón, Enrique Celso |
author |
De Biasio, María Bárbara |
author_facet |
De Biasio, María Bárbara Esquivel, Graciela Patricia Vega, Lucas Jastrzebski, Fernando Alberto Almirón, Enrique Celso |
author_role |
author |
author2 |
Esquivel, Graciela Patricia Vega, Lucas Jastrzebski, Fernando Alberto Almirón, Enrique Celso |
author2_role |
author author author author |
dc.subject.none.fl_str_mv |
PCR Zoonosis ADN |
topic |
PCR Zoonosis ADN |
dc.description.none.fl_txt_mv |
Fil: De Biasio, María Bárbara. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Esquivel, Graciela Patricia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Vega, Lucas. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Jastrzebski, Fernando Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Almirón, Enrique Celso. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Las leishmaniasis cutánea y mucosa son enfermedades infecciosas causadas por diferentes especies de protozoos del género Leishmania, transmitidas a humanos y animales por vectores de la familia Psychodidae. En América, una de las especies involucradas corresponde al subgénero Viannia especie braziliensis. En el Servicio Veterinario de Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Veterinarias (UNNE) se optimizaron las condiciones químicas y térmicas para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con la cual se amplificaron dos fragmentos diferentes del genoma de Leishmania braziliensis. Las reacciones fueron PCR sencillas llevadas a cabo con un volumen final de 25ul que contuvieron: 1X de Buffer de PCR, 0,2 pM de cada oligonucleótido cebador (b1/b2 o B1/B2); 0,2mM de una mezcla equimolecular de dNTPs, 1U de Taq ADN polimerasa y 1,5mM MgCU. En todos los casos se incorporaron controles positivos consistentes en ADN de L. braziliensis cedidos gentilmente por el Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben” y controles negativos consistentes en agua destilada. Las condiciones térmicas para la amplificación fueron: desnaturalización inicial: 95°C por 5min, luego 35 ciclos de desnaturalización a 95°C por 30seg; pegado de primer: 61°C por 60seg; extensión: 72°C por 60seg; extensión final: 72°C por 10min; incubación: 4°C hasta su utilización. Los productos de amplificación de ambas reacciones fueron fragmentos de 103pb y 750pb respectivamente. Éstos fueron separados y visualizados por electroforesis en gel de agarosa 2%, teñidos con bromuro de etidio y observados por transiluminación UV. Dada la elevada sensibilidad y especificidad de los métodos moleculares, cuando fueron aplicados a muestras de control positivos ambas dieron bandas de amplificación detectables del tamaño esperado no observándose bandas en muestras de ADN de L. chagasi. |
description |
Fil: De Biasio, María Bárbara. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. |
publishDate |
2021 |
dc.date.none.fl_str_mv |
2021-11-25 |
dc.type.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/conferenceObject info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://purl.org/coar/resource_type/c_5794 info:ar-repo/semantics/documentoDeConferencia |
format |
conferenceObject |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.none.fl_str_mv |
De Biasio, María Bárbara et al., 2021. Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma. En: XLI Sesión de Comunicaciones Científicas. Corrientes: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias, p. 11-11. 2451-6732 http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/55076 |
identifier_str_mv |
De Biasio, María Bárbara et al., 2021. Optimización de condiciones experimentales para la identificación de L. braziliensis analizando diferentes secuencias del genoma. En: XLI Sesión de Comunicaciones Científicas. Corrientes: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias, p. 11-11. 2451-6732 |
url |
http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/55076 |
dc.language.none.fl_str_mv |
spa |
language |
spa |
dc.rights.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentina |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
rights_invalid_str_mv |
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentina |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf p. 11-11 application/pdf |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) instname:Universidad Nacional del Nordeste |
reponame_str |
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) |
collection |
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) |
instname_str |
Universidad Nacional del Nordeste |
repository.name.fl_str_mv |
Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) - Universidad Nacional del Nordeste |
repository.mail.fl_str_mv |
ososa@bib.unne.edu.ar;sergio.alegria@unne.edu.ar |
_version_ |
1844621661476749312 |
score |
12.559606 |