Vacunas multipropósito desarrolladas a partir de una plataforma generadora de VLPS quiméricas

Autores
Garay, Ernesto S.; Fontana, Diego; Kratje, Ricardo; Prieto, Claudio
Año de publicación
2021
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Garay, Ernesto S. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Centro Biotecnológico del Litoral. Laboratorio de Cultivos Celulares; Argentina.
Fil: Garay, Ernesto S. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Biotecnológico del Litoral. Laboratorio de Cultivos Celulares; Argentina.
Fil: Fontana, Diego. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Centro Biotecnológico del Litoral. Laboratorio de Cultivos Celulares; Argentina.
Fil: Fontana, Diego. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Biotecnológico del Litoral. Laboratorio de Cultivos Celulares; Argentina.
Fil: Kratje, Ricardo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Centro Biotecnológico del Litoral. Laboratorio de Cultivos Celulares; Argentina.
Fil: Prieto, Claudio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Biotecnológico del Litoral. Laboratorio de Cultivos Celulares; Argentina.
Las partículas pseudovirales ( son estructuras autoensamblables altamente inmunogénicas constituidas por proteínas virales que pueden ser modificadas para generar respuestas inmunes hacia epitopes heterólogos, denominándose éstas últimas VLPs quiméricas En nuestro laboratorio contamos con una plataforma de generación de VLPs del virus de la Rabia (RV VLPs mediante expresión de la glicoproteína G de la misma ( en células HEK 293 (Fig 1 Posteriormente, se expresaron dichas proteínas en células HEK 293 y se comprobó su correcta localización en la membrana plasmática por inmunomarcación con anticuerpos anti RVG, mediante microscopía láser confocal (Fig 4 y citometría de flujo (Fig 5 A su vez, se comprobó que el epitope heterólogo se encuentra expuesto y con una conformación antigénica correcta al ser reconocido por anticuerpos específicos anti FMDV. Finalmente, se verificó por ELISA sándwich específico hacia RVG y FMDV, la formación de VLPs en el sobrenadante de cultivo de las variantes diseñadas (Fig 6 verificando a su vez que el epitope heterólogo se encuentra expuesto en la superficie de las partículas METODOLOGÍA Y RESULTADOS CONCLUSIONES. Los sitios de inserción identificados permitieron exponer el epitope heterólogo en la superficie de VLPs en una conformación antigénica correcta, al ser identificado en cada una de las variantes por anticuerpos específicos hacia el mismo Éstos resultados sientan la base para la generación de una nueva plataforma de presentación antigénica con fines vacunales basadas en VLPs del virus de la rabia. Las ventajas que posee ésta plataforma como vacuna de nueva generación podrían ser aprovechadas para generar respuestas inmunes hacia otros virus como el de la fiebre aftosa ( mediante fusión de epitopes a la RVG y su expresión en el contexto de la RV VLP.
Materia
SAPROBIO 2021
Vacunas
VLPS Quiméricas
Rabia
Virus
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional
Repositorio
Repositorio Institucional Digital de la Universidad Nacional de Misiones (UNaM)
Institución
Universidad Nacional de Misiones
OAI Identificador
oai:rid.unam.edu.ar:20.500.12219/2908
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Las partículas pseudovirales ( son estructuras autoensamblables altamente inmunogénicas constituidas por proteínas virales que pueden ser modificadas para generar respuestas inmunes hacia epitopes heterólogos, denominándose éstas últimas VLPs quiméricas En nuestro laboratorio contamos con una plataforma de generación de VLPs del virus de la Rabia (RV VLPs mediante expresión de la glicoproteína G de la misma ( en células HEK 293 (Fig 1 Posteriormente, se expresaron dichas proteínas en células HEK 293 y se comprobó su correcta localización en la membrana plasmática por inmunomarcación con anticuerpos anti RVG, mediante microscopía láser confocal (Fig 4 y citometría de flujo (Fig 5 A su vez, se comprobó que el epitope heterólogo se encuentra expuesto y con una conformación antigénica correcta al ser reconocido por anticuerpos específicos anti FMDV. Finalmente, se verificó por ELISA sándwich específico hacia RVG y FMDV, la formación de VLPs en el sobrenadante de cultivo de las variantes diseñadas (Fig 6 verificando a su vez que el epitope heterólogo se encuentra expuesto en la superficie de las partículas METODOLOGÍA Y RESULTADOS CONCLUSIONES. Los sitios de inserción identificados permitieron exponer el epitope heterólogo en la superficie de VLPs en una conformación antigénica correcta, al ser identificado en cada una de las variantes por anticuerpos específicos hacia el mismo Éstos resultados sientan la base para la generación de una nueva plataforma de presentación antigénica con fines vacunales basadas en VLPs del virus de la rabia. Las ventajas que posee ésta plataforma como vacuna de nueva generación podrían ser aprovechadas para generar respuestas inmunes hacia otros virus como el de la fiebre aftosa ( mediante fusión de epitopes a la RVG y su expresión en el contexto de la RV VLP.
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