Genotipos del MHC mediante análisis de un VNTR en líneas sintéticas parentales de pollos Campero-INTA

• Autores: Remolins, Santiago José; Beker, María Pía; Canet, Zulma E.; Cantaro, Horacio; Librera, José; Iglesias, Gabriela Marisa
• Año de publicación: 2020
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: documento de conferencia
• Materia: Ciencias Veterinarias; LEI0258; Pollos; MHC; Ciencias Veterinarias
• Institución: Universidad Nacional de Río Negro

Fil: Remolins, Santiago. Universidad Nacional de Río Negro. Sede Alto Valle y Valle Medio. Carrera de Veterinaria; Argentina.
Fil: Canet, Zulma E. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Pergamino. Sección Avicultura; Argentina
Fil: Cantaro, Horacio. Universidad Nacional de Río Negro. Sede Alto Valle y Valle Medio. Carrera de Veterinaria; Argentina.
Fil: Beker, María Pía. Universidad Nacional de Río Negro. Sede Alto Valle y Valle Medio. Carrera de Veterinaria; Argentina.
Fil: Librera, José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Pergamino. Sección Avicultura; Argentina
Fil: Iglesias, Gabriela Marisa. Universidad Nacional de Río Negro. Sede Alto Valle y Valle Medio. Carrera de Veterinaria; Argentina.
Introducción El Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC) es un grupo de genes ligados en el microcromosoma 16 de Gallus gallus. Su genotipificación es compleja ya que implica el análisis de al menos 45 genes (Shiina et al., 2006). El marcador LEI0258 es un (VNTR) atípico. Es altamente polimórfico, con 35 tamaños de alelos reportados previamente (Fulton et al., 2016) y muchos más en poblaciones únicas africanas, chincas iraníes, coreanas, etc. Su uso está ampliamente documentado en la bibliografía como una forma simple y económica de determinar los genotipos del MHC de manera indirecta (Wang et al., 2014) (Haunshi et al., 2020) entre otros. La determinación de los genotipos es importante para utilizarlos en un plan de mejora ya que algunos están asociados a la resistencia genética a enfermedades (Miller y Taylor, 2016). El pollo Campero Es es un híbrido experimental de tres vías producto del cruzamiento de machos de la población sintética paterna (AS y AH) por hembras de una línea híbridas C (línea ES x A). Es un pollo de crecimiento lento, carne más firme y buenas características organolépticas. Es de relevante importancia para los pequeños productores y los programas de seguridad alimentaria, como Prohuerta (INTA-MDS), destinado al autoconsumo (Figura 1). El objetivo de este trabajo fue determinar, de manera descriptiva, la variabilidad genética del marcador LEI0258 de 7678, 86 78 y 42 39 animales de las líneas AS, A y ES, respectivamente, mediante el cálculo de las frecuencias génicas y genotípicas. Materiales y métodos Se realizó extracción y purificación de ADN a partir de sangre de la vena axilar en 76 muestras de la línea AS, 86 de la línea A y 42 de la línea ES. Posteriormente se amplificó por PCR el VNTR LEI0258 con primers específicos (Fulton, J. 2006), y el producto de amplificación se sometió a electroforesis por 90 min a 70 V en gel de agarosa al 2 %. Se cotejó el tamaño de banda por comparación con marcadores de PM de 50 y 100 pb. El análisis de frecuencias alélicas, genotípicas y de heterocigosidad observada y esperada fueron realizados con el programa Genepop 4.7.5 (Raymond M. & Rousset F, 1995 y 2008) Resultados y Discusión En la línea paterna AS se detectaron 4 alelos de LEI0258 (de 193, 205, 307 y 381 bp), 4 alelos en la línea materna ES (de 205, 307, 309 y 357 pb) y 5 en la materna A (de 193, 205, 307, 309 y 381 pb). Las frecuencias alélicas se detallan en la tabla 1. Del análisis de los genotipos, se desprende que los genotipos 381 homocigotas y 307/381 bp representan casi el 75 % de los genotipos evaluados en la línea paterna AS. En cambio, los genotipos 381 homocigotas y 205/381 bp representan un poco más del 50 % de los genotipos en la línea A. En la línea ES el 50 % de los individuos presenta, ya sea genotipo 205/307 o 205/309. Respecto a las frecuencias genotípicas, se encontró que las líneas AS y ES se encuentran en equilibrio de Hardy-Weinberg, mientras que la línea A (p=0,0309) y la población como un todo no se encuentra en equilibrio (p=0,026). En la línea A hay déficit en la cantidad de heterocigotas (P=0,0003), mientras que en ninguna línea se aprecia exceso de heterocigotas. Los valores de heterocigosidad observada (Ho) versus heterocigosidad esperada promedio (He) obtenidos en las líneas AS, A y ES fueron de 0,368/0,427; 0,363/0,667 y de 0,690/0,705, respectivamente. Conclusiones Un total de 6 alelos del VNTR LEI0258 (193-381 bp) y 15 genotipos se identificaron en 195 pollos pertenecientes a líneas que dan origen al pollo Campero INTA. El alelo de 381 pb presentó la mayor frecuencia (48 % en línea A y 72 % en línea AS), mientras que el de 205 pb fue el más frecuente en (49 %) en la línea ES. El alelo de LEI0258 de 205 pb que recibe la nomenclatura B13 según serología, confiere mediana resistencia a Gumboro y a Marek, mientras que el B13.1 o c2v (381 pb) es susceptible a Sarcoma ROUX y ha sido asociado a mayor tasa de crecimiento (Ewald et al., 2007).