Relación entre la disfunción mitocondrial y el sistema endo-lisosomal en la fisiopatología de la enfermedad CNL7

• Autores: Venier, Ana Clara
• Año de publicación: 2025
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: De Paul, Ana Clara; Pesaola, Flavio; https://orcid.org/0000-0002-4241-141X
• Materia: Lipofuscinosis Ceroidea Neuronal; Enfermedades Mitocondriales; Isoformas de Proteínas; Membranas Asociadas a Mitocondrias; Variantes de splicing; Disfunción lisosomal; Sitios de contacto lisosoma; Sitios de contacto mitocondria
• Institución: Universidad Nacional de Córdoba

123 p.
Tesis - Doctorado en Ciencias de la Salud - Universidad nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Secretaría de Graduados en Ciencias de la Salud, 2025.
Fil: Venier, Ana Clara. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina.
Fil: Venier, Ana Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.
Las Lipofuscinosis Ceroideas Neuronales (LCN) son enfermedades neurodegenerativas, hereditarias, de inicio pediátrico y de almacenamiento lisosomal, debido a la acumulación de material no degradado. La variante CLN7, causada por mutaciones en el gen CLN7/MFSD8, presenta una gran heterogeneidad clínica y escasa caracterización en Sudamérica. Esta Tesis planteó como objetivo general investigar la relación entre la disfunción mitocondrial y el sistema endosoma-lisosomal en la fisiopatología de CLN7. Para ello, se caracterizaron fenotípica y genotípicamente cinco pacientes de la cohorte Córdoba; se validaron experimentalmente variantes no codificantes del gen CLN7/MFSD8, así como también se evaluó la interacción lisosoma- mitocondria en modelos celulares. Se identificaron dos variantes (c.863+1G>A y c.863+4A>G) que inducen splicing aberrante y producen proteínas truncadas lo que permitió su reclasificación como patogénicas. Por otro lado, se generó un modelo celular deficiente en CLN7 mediante silenciamiento génico en células HeLa donde se evidenciaron alteraciones en la morfología, número y distribución de lisosomas y mitocondrias, así como en la dinámica mitocondrial. Además, se observó un aumento en los sitios de contacto lisosoma-mitocondria en ausencia de CLN7, sugiriendo su rol en la regulación de estas interacciones. En conjunto, los resultados obtenidos permitieron validar nuevas variantes patogénicas del gen CLN7/MFSD8, reforzando el papel de CLN7 en la homeostasis de las organelas y aportar nuevas perspectivas sobre su implicancia en mecanismos celulares comunes a otras enfermedades lisosomales. Estos hallazgos sientan las bases para proponer mejoras en el diagnóstico y explorar futuras estrategias terapéuticas.
Neuronal ceroid lipofuscinoses (NCL) are inherited neurodegenerative lysosomal storage disorders, due to the accumulation of undegraded material. The CLN7 variant, caused by mutations in the CLN7/MFSD8 gene, displays broad clinical heterogeneity and remains poorly characterized in South America. This Doctoral Thesis aimed to investigate the relationship between mitochondrial dysfunction and the endolysosomal system in CLN7 pathophysiology. To this end, five patients from the Córdoba cohort were phenotypically and genotypically characterized; unvalidated non-coding CLN7/MFSD8 variants were functionally assessed, and the physical interaction between lysosomes and mitochondria was also evaluated in cellular models. Two non-coding variants (c.863+1G>A and c.863+4A>G) were shown to induce aberrant splicing, resulting in exon 8 skipping and truncated proteins, supporting their reclassification as pathogenic. A CLN7-deficient cell model was generated via gene silencing in HeLa cells, revealing significant alterations in lysosomal and mitochondrial morphology, number, and subcellular distribution as well as impaired mitochondrial dynamics. Additionally, increased lysosome–mitochondria contact sites were observed under CLN7-deficient conditions, suggesting a structural role for CLN7 in regulating these interactions. Together, these findings validate the novel pathogenic CLN7/MFSD8 variants, reinforce CLN7’s role in organellar homeostasis, and offer new insights into shared mechanisms with other lysosomal disorders. This work provides the basis for improved diagnostics and the future development of therapeutic strategies targeting organelle communication and mitochondrial function.
2027-07-28
Fil: Venier, Ana Clara. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina.
Fil: Venier, Ana Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.