Absence of leukocyte specific protein 1 (lsp1) alter activation and proliferation of cd4+ and cd8+ t lymphocytes

Autores
Lopez Menichetti, Guadalupe; Pascual, Maria Mercedes; Ruiz Moreno, Federico Nahuel; Crespo, Maria Ines; Maletto, Belkys Angélica; Moron, Víctor Gabriel; Dho, Daniel Nicolas
Año de publicación
2022
Idioma
inglés
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Ciencias Quimicas; Argentina.
Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Pascual, María Mercedes. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Pascual, María Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Crespo, Maria Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Maletto, Belkys Angelica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Maletto, Belkys Angelica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Morón, Víctor Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Morón, Víctor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Dho, Nicolás Daniel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.
Fil: Dho, Nicolás Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
La proteína 1 específica de leucocitos (LSP1) es una fosfoproteína citoplasmática de 52 kDa que se une a la actina F y se expresa en todos los leucocitos y células endoteliales humanas y murinas. Para estudiar el papel de LSP1 en la funcionalidad de las células T, evaluamos la capacidad de los linfocitos T CD4+ y CD8+ Lsp1-/- para activarse y proliferar in vitro. Las células T se purificaron a partir de esplenocitos de ratones Lsp1-/- y WT mediante un clasificador celular después de marcar los esplenocitos con anticuerpos anti-CD8α (para purificar las células T CD8+), anti-CD11b y anti-CD4 para purificar los linfocitos T CD4+. Las células T clasificadas se tiñeron con el colorante de proliferación eF670 y finalmente se cocultivaron con Ab anti-CD28 en una placa de pocillos sensibilizada con anti-CD3. Tres días después, se observó un porcentaje significativamente menor de células activadas que expresaban CD69 (p<0,001) o CD44 (p<0,0001) en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- y dentro de la puerta de células activadas, los porcentajes de proliferación fueron también menores en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- (p<0,01 y p<0,0001 respectivamente). Algo similar se observó en los linfocitos T CD8+ Lsp1-/-, con un porcentaje significativamente menor de células proliferantes (p<0,01) y expresión de CD44 (p<0,001) que sus células homólogas WT. Para evaluar la actividad de los linfocitos en el ensayo anterior, medimos IL-2, IL-17, TNF e IFN&7527; en el sobrenadante mediante ELISA sándwich. Encontramos que en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- se produjo menos IL-2 e IFN&7527; (p<0,05 y no cuantificable para WT respectivamente) y significativamente más IL-17 (p<0,05) que las células T CD4+ WT. Los linfocitos T CD8+ Lsp1-/- produjeron significativamente menos TNF (p<0,001) y, a diferencia de las células T CD8+ WT, no detectaron IL-2. Estos resultados sugieren que la deficiencia de LSP1 también afecta la activación y proliferación de las células T, lo que podría perjudicar la inducción de respuestas efectoras en ratones.
Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Ciencias Quimicas; Argentina.
Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Pascual, María Mercedes. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Pascual, María Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Crespo, Maria Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Maletto, Belkys Angelica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Maletto, Belkys Angelica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Morón, Víctor Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Morón, Víctor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Dho, Nicolás Daniel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.
Fil: Dho, Nicolás Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Otras Ciencias Médicas
Materia
Leucocitos
Células Endoteliales
Linfocitos
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
Repositorio
Repositorio Digital Universitario (UNC)
Institución
Universidad Nacional de Córdoba
OAI Identificador
oai:rdu.unc.edu.ar:11086/561147

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Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.Fil: Crespo, Maria Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.Fil: Maletto, Belkys Angelica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Maletto, Belkys Angelica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Morón, Víctor Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Morón, Víctor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Dho, Nicolás Daniel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Dho, Nicolás Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.La proteína 1 específica de leucocitos (LSP1) es una fosfoproteína citoplasmática de 52 kDa que se une a la actina F y se expresa en todos los leucocitos y células endoteliales humanas y murinas. Para estudiar el papel de LSP1 en la funcionalidad de las células T, evaluamos la capacidad de los linfocitos T CD4+ y CD8+ Lsp1-/- para activarse y proliferar in vitro. Las células T se purificaron a partir de esplenocitos de ratones Lsp1-/- y WT mediante un clasificador celular después de marcar los esplenocitos con anticuerpos anti-CD8α (para purificar las células T CD8+), anti-CD11b y anti-CD4 para purificar los linfocitos T CD4+. Las células T clasificadas se tiñeron con el colorante de proliferación eF670 y finalmente se cocultivaron con Ab anti-CD28 en una placa de pocillos sensibilizada con anti-CD3. Tres días después, se observó un porcentaje significativamente menor de células activadas que expresaban CD69 (p<0,001) o CD44 (p<0,0001) en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- y dentro de la puerta de células activadas, los porcentajes de proliferación fueron también menores en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- (p<0,01 y p<0,0001 respectivamente). Algo similar se observó en los linfocitos T CD8+ Lsp1-/-, con un porcentaje significativamente menor de células proliferantes (p<0,01) y expresión de CD44 (p<0,001) que sus células homólogas WT. Para evaluar la actividad de los linfocitos en el ensayo anterior, medimos IL-2, IL-17, TNF e IFN&7527; en el sobrenadante mediante ELISA sándwich. Encontramos que en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- se produjo menos IL-2 e IFN&7527; (p<0,05 y no cuantificable para WT respectivamente) y significativamente más IL-17 (p<0,05) que las células T CD4+ WT. Los linfocitos T CD8+ Lsp1-/- produjeron significativamente menos TNF (p<0,001) y, a diferencia de las células T CD8+ WT, no detectaron IL-2. Estos resultados sugieren que la deficiencia de LSP1 también afecta la activación y proliferación de las células T, lo que podría perjudicar la inducción de respuestas efectoras en ratones.Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Ciencias Quimicas; Argentina.Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.Fil: Pascual, María Mercedes. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Pascual, María Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.Fil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.Fil: Crespo, Maria Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.Fil: Maletto, Belkys Angelica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Maletto, Belkys Angelica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Morón, Víctor Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Morón, Víctor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Dho, Nicolás Daniel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Dho, Nicolás Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Otras Ciencias Médicashttps://orcid.org/0009-0009-4780-7059https://orcid.org/0009-0004-6636-2140https://orcid.org/0000-0002-8211-4364https://orcid.org/0000-0003-2122-6730https://orcid.org/0000-0003-3518-32682022info:eu-repo/semantics/conferenceObjectinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11086/561147enginfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositorio Digital Universitario (UNC)instname:Universidad Nacional de Córdobainstacron:UNC2026-05-07T11:50:11Zoai:rdu.unc.edu.ar:11086/561147Institucionalhttps://rdu.unc.edu.ar/Universidad públicaNo correspondehttp://rdu.unc.edu.ar/oai/snrdoca.unc@gmail.comArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:25722026-05-07 11:50:12.706Repositorio Digital Universitario (UNC) - Universidad Nacional de Córdobafalse
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Fil: Dho, Nicolás Daniel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.
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La proteína 1 específica de leucocitos (LSP1) es una fosfoproteína citoplasmática de 52 kDa que se une a la actina F y se expresa en todos los leucocitos y células endoteliales humanas y murinas. Para estudiar el papel de LSP1 en la funcionalidad de las células T, evaluamos la capacidad de los linfocitos T CD4+ y CD8+ Lsp1-/- para activarse y proliferar in vitro. Las células T se purificaron a partir de esplenocitos de ratones Lsp1-/- y WT mediante un clasificador celular después de marcar los esplenocitos con anticuerpos anti-CD8α (para purificar las células T CD8+), anti-CD11b y anti-CD4 para purificar los linfocitos T CD4+. Las células T clasificadas se tiñeron con el colorante de proliferación eF670 y finalmente se cocultivaron con Ab anti-CD28 en una placa de pocillos sensibilizada con anti-CD3. Tres días después, se observó un porcentaje significativamente menor de células activadas que expresaban CD69 (p<0,001) o CD44 (p<0,0001) en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- y dentro de la puerta de células activadas, los porcentajes de proliferación fueron también menores en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- (p<0,01 y p<0,0001 respectivamente). Algo similar se observó en los linfocitos T CD8+ Lsp1-/-, con un porcentaje significativamente menor de células proliferantes (p<0,01) y expresión de CD44 (p<0,001) que sus células homólogas WT. Para evaluar la actividad de los linfocitos en el ensayo anterior, medimos IL-2, IL-17, TNF e IFN&7527; en el sobrenadante mediante ELISA sándwich. Encontramos que en los linfocitos T CD4+ Lsp1-/- se produjo menos IL-2 e IFN&7527; (p<0,05 y no cuantificable para WT respectivamente) y significativamente más IL-17 (p<0,05) que las células T CD4+ WT. Los linfocitos T CD8+ Lsp1-/- produjeron significativamente menos TNF (p<0,001) y, a diferencia de las células T CD8+ WT, no detectaron IL-2. Estos resultados sugieren que la deficiencia de LSP1 también afecta la activación y proliferación de las células T, lo que podría perjudicar la inducción de respuestas efectoras en ratones.
Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Ciencias Quimicas; Argentina.
Fil: Lopez Menichetti, Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Pascual, María Mercedes. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Pascual, María Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Ruiz Moreno, Federico Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Crespo, Maria Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina
Fil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquimica Clinica e Inmunología; Argentina.
Fil: Maletto, Belkys Angelica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Maletto, Belkys Angelica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Fil: Morón, Víctor Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.
Fil: Morón, Víctor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
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