Análisis toxicológico, bioquímico y molecular de la resistencia a insecticidas en estados embrionarios y post-embrionarios de Triatoma Infestans, vector de la enfermedad de Chagas...

Autores
Roca Acevedo, Gonzalo
Año de publicación
2015
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
tesis doctoral
Estado
versión aceptada
Colaborador/a o director/a de tesis
Picollo, María Inés
Broussalis, Adriana
Santo Orihuela, Pablo
Villaamil Lepori, Edda
Juárez, Patricia
Ridolfi, Adriana
Descripción
Fil: Roca Acevedo, Gonzalo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina
La enfermedad de Chagas es una zoonosis transmitida al hombre\npor Triatoma infestans, un insecto hematófago que se encuentra en\nAmérica Central y América del Sur. El control de este insecto depende\nprincipalmente del uso de insecticidas. Sin embargo en lo últimos\naños aumentó en Argentina y Bolivia los informes del fracaso de los\nrociados con insecticidas asociados a resistencia a insecticidas\npiretroides. Si bien existen algunos trabajos sobre expresión y\nmecanismos de resistencia en ninfas de T. infestans, existen muy\npocos estudios sobre la expresión de la resistencia en huevos de\npoblaciones resistentes, y no existe estudios sobre la expresión de la\nresistencia a lo largo del desarrollo embrionario y sus posibles\ncausas.\nEl objetivo de este trabajo de tesis fue analizar la expresión de\nresistencia a deltametrina en el huevo en desarrollo de dos\npoblaciones de campo provenientes de Campo Largo-Argentina, y\nEntre Ríos-Bolivia. Además analizar los mecanismos enzimáticos y\nmoleculares potencialmente asociados con la resistencia a\ndeltametrina durante el desarrollo embrionario.\nLas ninfas de ambas poblaciones de campo mostraron niveles altos\nde resistencia a deltametrina comparadas con la población\nsusceptible de referencia (Entre Ríos: 173x y Campo Largo: 1.108X)\nLos grados de resistencia a deltametrina estimados para ambas\npoblaciones resistentes en huevos de 4, 7 y 12 días de desarrollo,\nindicaron que la resistencia se expresa desde el desarrollo temprano\nen huevos de T. infestans, y que a lo largo de todo el desarrollo\nembrionario los niveles de resistencia fueron mayores en Campo\nLargo que en Entre Ríos (1.144x, 1.193x y 822x para Campo Largo y\n21x, 15x y 39x para Entre Ríos).\nTanto para la población de referencia como para las poblaciones de\ncampo, la efectividad de la deltametrina fue menor en huevos de 12\ndías respecto a huevos de 4, y 7 días de desarrollo.\nLa actividad de las enzimas monooxigenasas P-450 no mostró\nincremento significativo en las poblaciones resistentes. Este resultado\nsugiere que no es un mecanismo contributivo a la resistencia a\ndeltametrina. O bien que la metodología empleada no permitió\ndetectar un incremento de alguna fracción de ese complejo\nenzimático. La actividad de piretroide-esterasas mostró un\nincremento durante el desarrollo embrionario de todas las\npoblaciones estudiadas, siendo los valores más altos de actividad los\ncorrespondientes a huevos de 12 días. La actividad promedio se\nincrementó de 13,60 a 16,27, y a 22,21 picomoles de 7-\nhidroxicumarina/minuto (7-OHC) en huevos de 4-, 7-, y 12 días de la\npoblación de referencia. Los valores medios para las poblaciones\nresistentes fueron de 16,17, 21,44 y 26,14 picomoles de 7-\nOHC/minuto en el caso de Entre Ríos, y de 16,04, 17,98 y 28,87\npicomoles de 7-OHC/minuto para la población Campo Largo en\nhuevos de 4-, 7- y 12 días respectivamente.\nLos estudios moleculares detectaron la presencia de la mutación\nkdr (knockdown resistance) L1014F en las dos poblaciones de campo,\nindicando que el sitio de acción alterado es un mecanismo de\nresistencia a deltametrina en las poblaciones de campo estudiadas.\nLa mutación kdr L925I descripta en otros hemípteros no fue\ndetectada en ninguna de las poblaciones estudiadas.\nLos resultados de este trabajo de tesis, demuestran que la\nresistencia a deltametrina expresada en huevos en desarrollo, se\ndeben en parte a la mayor actividad de las piretroide-esterasas y a\nla modificación del sitio de acción. El avance del conocimiento sobre\nlos mecanismos de resistencia a insecticidas involucrados, permitirán\noptimizar las campañas de control de T. infestans, vector de la\nenfermedad de Chagas.
Doctor de Universidad de Buenos Aires en Toxicología
Materia
Chagas
Triatoma Infestans
Entomotoxicología
Insecticidas
Triatoma Infestans
Insecticide
Toxicological profile
Chagas disease vector
Ciencia de la vida
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
Repositorio Digital Institucional de la Universidad de Buenos Aires
Institución
Universidad de Buenos Aires
OAI Identificador
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Si bien existen algunos trabajos sobre expresión y\nmecanismos de resistencia en ninfas de T. infestans, existen muy\npocos estudios sobre la expresión de la resistencia en huevos de\npoblaciones resistentes, y no existe estudios sobre la expresión de la\nresistencia a lo largo del desarrollo embrionario y sus posibles\ncausas.\nEl objetivo de este trabajo de tesis fue analizar la expresión de\nresistencia a deltametrina en el huevo en desarrollo de dos\npoblaciones de campo provenientes de Campo Largo-Argentina, y\nEntre Ríos-Bolivia. Además analizar los mecanismos enzimáticos y\nmoleculares potencialmente asociados con la resistencia a\ndeltametrina durante el desarrollo embrionario.\nLas ninfas de ambas poblaciones de campo mostraron niveles altos\nde resistencia a deltametrina comparadas con la población\nsusceptible de referencia (Entre Ríos: 173x y Campo Largo: 1.108X)\nLos grados de resistencia a deltametrina estimados para ambas\npoblaciones resistentes en huevos de 4, 7 y 12 días de desarrollo,\nindicaron que la resistencia se expresa desde el desarrollo temprano\nen huevos de T. infestans, y que a lo largo de todo el desarrollo\nembrionario los niveles de resistencia fueron mayores en Campo\nLargo que en Entre Ríos (1.144x, 1.193x y 822x para Campo Largo y\n21x, 15x y 39x para Entre Ríos).\nTanto para la población de referencia como para las poblaciones de\ncampo, la efectividad de la deltametrina fue menor en huevos de 12\ndías respecto a huevos de 4, y 7 días de desarrollo.\nLa actividad de las enzimas monooxigenasas P-450 no mostró\nincremento significativo en las poblaciones resistentes. Este resultado\nsugiere que no es un mecanismo contributivo a la resistencia a\ndeltametrina. O bien que la metodología empleada no permitió\ndetectar un incremento de alguna fracción de ese complejo\nenzimático. La actividad de piretroide-esterasas mostró un\nincremento durante el desarrollo embrionario de todas las\npoblaciones estudiadas, siendo los valores más altos de actividad los\ncorrespondientes a huevos de 12 días. La actividad promedio se\nincrementó de 13,60 a 16,27, y a 22,21 picomoles de 7-\nhidroxicumarina/minuto (7-OHC) en huevos de 4-, 7-, y 12 días de la\npoblación de referencia. Los valores medios para las poblaciones\nresistentes fueron de 16,17, 21,44 y 26,14 picomoles de 7-\nOHC/minuto en el caso de Entre Ríos, y de 16,04, 17,98 y 28,87\npicomoles de 7-OHC/minuto para la población Campo Largo en\nhuevos de 4-, 7- y 12 días respectivamente.\nLos estudios moleculares detectaron la presencia de la mutación\nkdr (knockdown resistance) L1014F en las dos poblaciones de campo,\nindicando que el sitio de acción alterado es un mecanismo de\nresistencia a deltametrina en las poblaciones de campo estudiadas.\nLa mutación kdr L925I descripta en otros hemípteros no fue\ndetectada en ninguna de las poblaciones estudiadas.\nLos resultados de este trabajo de tesis, demuestran que la\nresistencia a deltametrina expresada en huevos en desarrollo, se\ndeben en parte a la mayor actividad de las piretroide-esterasas y a\nla modificación del sitio de acción. 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La enfermedad de Chagas es una zoonosis transmitida al hombre\npor Triatoma infestans, un insecto hematófago que se encuentra en\nAmérica Central y América del Sur. El control de este insecto depende\nprincipalmente del uso de insecticidas. Sin embargo en lo últimos\naños aumentó en Argentina y Bolivia los informes del fracaso de los\nrociados con insecticidas asociados a resistencia a insecticidas\npiretroides. Si bien existen algunos trabajos sobre expresión y\nmecanismos de resistencia en ninfas de T. infestans, existen muy\npocos estudios sobre la expresión de la resistencia en huevos de\npoblaciones resistentes, y no existe estudios sobre la expresión de la\nresistencia a lo largo del desarrollo embrionario y sus posibles\ncausas.\nEl objetivo de este trabajo de tesis fue analizar la expresión de\nresistencia a deltametrina en el huevo en desarrollo de dos\npoblaciones de campo provenientes de Campo Largo-Argentina, y\nEntre Ríos-Bolivia. Además analizar los mecanismos enzimáticos y\nmoleculares potencialmente asociados con la resistencia a\ndeltametrina durante el desarrollo embrionario.\nLas ninfas de ambas poblaciones de campo mostraron niveles altos\nde resistencia a deltametrina comparadas con la población\nsusceptible de referencia (Entre Ríos: 173x y Campo Largo: 1.108X)\nLos grados de resistencia a deltametrina estimados para ambas\npoblaciones resistentes en huevos de 4, 7 y 12 días de desarrollo,\nindicaron que la resistencia se expresa desde el desarrollo temprano\nen huevos de T. infestans, y que a lo largo de todo el desarrollo\nembrionario los niveles de resistencia fueron mayores en Campo\nLargo que en Entre Ríos (1.144x, 1.193x y 822x para Campo Largo y\n21x, 15x y 39x para Entre Ríos).\nTanto para la población de referencia como para las poblaciones de\ncampo, la efectividad de la deltametrina fue menor en huevos de 12\ndías respecto a huevos de 4, y 7 días de desarrollo.\nLa actividad de las enzimas monooxigenasas P-450 no mostró\nincremento significativo en las poblaciones resistentes. Este resultado\nsugiere que no es un mecanismo contributivo a la resistencia a\ndeltametrina. O bien que la metodología empleada no permitió\ndetectar un incremento de alguna fracción de ese complejo\nenzimático. La actividad de piretroide-esterasas mostró un\nincremento durante el desarrollo embrionario de todas las\npoblaciones estudiadas, siendo los valores más altos de actividad los\ncorrespondientes a huevos de 12 días. La actividad promedio se\nincrementó de 13,60 a 16,27, y a 22,21 picomoles de 7-\nhidroxicumarina/minuto (7-OHC) en huevos de 4-, 7-, y 12 días de la\npoblación de referencia. Los valores medios para las poblaciones\nresistentes fueron de 16,17, 21,44 y 26,14 picomoles de 7-\nOHC/minuto en el caso de Entre Ríos, y de 16,04, 17,98 y 28,87\npicomoles de 7-OHC/minuto para la población Campo Largo en\nhuevos de 4-, 7- y 12 días respectivamente.\nLos estudios moleculares detectaron la presencia de la mutación\nkdr (knockdown resistance) L1014F en las dos poblaciones de campo,\nindicando que el sitio de acción alterado es un mecanismo de\nresistencia a deltametrina en las poblaciones de campo estudiadas.\nLa mutación kdr L925I descripta en otros hemípteros no fue\ndetectada en ninguna de las poblaciones estudiadas.\nLos resultados de este trabajo de tesis, demuestran que la\nresistencia a deltametrina expresada en huevos en desarrollo, se\ndeben en parte a la mayor actividad de las piretroide-esterasas y a\nla modificación del sitio de acción. El avance del conocimiento sobre\nlos mecanismos de resistencia a insecticidas involucrados, permitirán\noptimizar las campañas de control de T. infestans, vector de la\nenfermedad de Chagas.
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