Identificación de epitopes de Trypanosoma cruzi mediante análisis in vitro de la respuesta celular en pacientes con enfermedad de Chagas crónica

• Autores: Acevedo, Gonzalo R.
• Año de publicación: 2018
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Gómez, Karina A.; Malchiodi, Emilio; Fernández Villamil, Silvia; Postan, Miriam
• Materia: Inmunología; Bioinformática; Enfermedad de chagas; Linfocitos T; Epitopes; Trypanosomas cruzi; Ciencia de la vida
• Institución: Universidad de Buenos Aires

Cellular immunity, and T cell-mediated response in particular, plays a fundamental role in controlling Trypanosoma cruzi infection. In chronically infected patients, it has been shown to be involved in progression from the asymptomatic phase of the disease to chronic Chagas cardiopathy. However, the complexity of the parasite and its interaction with the host?s immune system hampers the study of T cell-mediated immune memory. In this piece of research, we undertook the analysis of this response by two different approaches. First, we developed and optimized a protocol for the generation of cell lines by ex vivo expansion of memory T cells from chronic Chagas disease patients, and T. cruzi-specific cultures detection. As a result, we were able to isolate and amplify clonal populations of parasite-specific CD4+ T cells. The second approach involved a bioinformatic prediction and in vitro validation of peptidic epitopes inducing IFN-? secretion on CD4+ and CD8+ T cells from chronic Chagas patients. We thereby found and characterized 7 immunogenic sequences, out of which 4 represent novel T. cruzi epitopes.
Fil: Acevedo, Gonzalo R. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina
La respuesta inmune celular, y en particular la mediada por linfocitos T, juega un rol fundamental en el control de la infección por Trypanosoma cruzi. En pacientes con infección crónica ha demostrado estar relacionada con la progresión desde el estadio asintomático a la cardiopatía chagásica. No obstante, la complejidad del parásito y de su interacción con el sistema inmune del hospedero dificultan el estudio de la memoria inmunológica mediada por linfocitos T. En este trabajo, abordamos el análisis de esta respuesta mediante dos aproximaciones. Mediante la primera, desarrollamos y optimizamos un protocolo para la generación de líneas celulares a partir de la expansión ex vivo de linfocitos T de memoria de pacientes con enfermedad de Chagas crónica, y la detección de cultivos específicos contra antígenos de T. cruzi. Como resultado, logramos aislar y amplificar poblaciones clonales de linfocitos T CD4+ específicos contra el parásito. Mediante la segunda, se utilizó una estrategia de predicción bioinformática y validación in vitro de epitopes peptídicos de T. cruzi, activadores de secreción de IFN-? en linfocitos T CD4+ y CD8+ de pacientes con enfermedad de Chagas crónica. Así, encontramos y caracterizamos 7 secuencias inmunogénicas, 4 de las cuales representan nuevos epitopes de T. cruzi.
Ciencias Biológicas
Doctor de la Universidad de Buenos Aires en Farmacia y Bioquímica