Estudio de los mecanismos y componentes de Brucella abortus involucrados en la disminución de MHC-I y la respuesta T CD8+ citotóxica

• Autores: Milillo, María Ayelén
• Año de publicación: 2018
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Baldi, Pablo; Barrionuevo, Paula; González Maglio, Daniel; Trevani, Analía; Comerci, Diego
• Materia: Brucella abortus; ARN; Monocitos; MHC-1; Estrategias de evasión inmune; Ciencia de la vida
• Institución: Universidad de Buenos Aires

Brucella abortus can persist inside the host despite the potent T cell responses. B. abortus infection of human monocytes down-modulates the IFN-?-induced MHC-I cell surface expression by retaining these molecules in the Golgi apparatus (GA). However, several aspects of this phenomenon remained unknown. Here we demonstrated that MHC-I down-modulation is dependent on bacteria viability but not mediated by well-known Brucella virulence factors. Instead, B. abortus RNA, a viability-associated PAMP (vita-PAMP) is the component involved in this phenomenon. Surprisingly, completely degraded RNA was also able to diminish MHC-I expression. Accordingly, B. abortus RNA and its degradation products caused MHC-I retention within the GA. We further demonstrated that human TLR8 is the receptor involved. Regarding the signalling pathway, the phenomenon was triggered early on during infection. Moreover, targeting epidermal growth factor receptor (EGFR) pathway resulted in partial recovery of MHC-I surface expression. Regarding the mechanisms of MHC-I retention, we observed that an improper acidification of GA caused by monensin prevents MHC-I transport to the cell surface. Finally, we showed that B. abortus RNA-treated macrophages display diminished capacity of antigen presentation to CD8+ T cells. Overall, our results indicate that B. abortus RNA constitutes a novel virulence factor whereby this bacterium, by a TLR8-dependent mechanism and through the EGFR pathway, inhibits MHC-I surface expression. Thus, bacteria can hide within monocytes/macrophages and avoid the immunological surveillance, establishing a chronic infection.
Fil: Milillo, María Ayelén. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina
B. abortus puede persistir en su hospedador a pesar del desarrollo de una potente respuesta T. La infección de monocitos/macrófagos humanos con B. abortus disminuye la expresión inducida por IFN-? de las MHC-I en superficie por retener dichas moléculas dentro del aparato de Golgi (AG). Sin embargo, aún desconocíamos varios aspectos relevantes de dicho fenómeno. En este trabajo, demostramos que la disminución de MHC-I depende de que B. abortus esté metabólicamente activa pero no de sus factores de virulencia más relevantes. Un factor involucrado es un PAMP asociado a viabilidad (vita-PAMP), el ARN de B. abortus. Sorprendentemente, los productos de la digestión del ARN fueron también capaces de disminuir MHC-I. Asimismo, el ARN y sus productos de degradación provocaron la retención de MHC-I en el AG y demostramos que el receptor involucrado es el TLR8 humano. Respecto a la vía de señalización, demostramos que el fenómeno es disparado de manera temprana. El bloqueo de los receptores de la vía del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) resultó en una reversión parcial de la disminución de la expresión de MHC-I. Respecto al mecanismo de retención de MHC-I, una acidificación alterada del AG causada por monensina previene el transporte de MHC-I a la superficie celular. Por último, los macrófagos tratados con el ARN de B. abortus muestran una disminuida capacidad de presentación antigénica a los LT CD8+. En conjunto, nuestros resultados establecen que B. abortus a través del vita-PAMP ARN disminuye la expresión de MHC-I, mecanismo por el cual podría evadir el reconocimiento inmune, persistiendo en el hospedador y estableciendo una infección crónica.
Ciencias de la salud
Doctora de la Universidad de Buenos Aires en Farmacia y Bioquímica