Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells

Autores
Targovnik, Alexandra Marisa; Ferrari, Alejandro; Mc Callum, Gregorio Juan; Arregui, Mariana Bernadett; Smith, Ignacio; Bracco, Lautaro Fidel; Alfonso, Victoria; Lopez, Maria Gabriela; Martínez‑Solís, María; Herrero, Salvador; Miranda, Maria Victoria
Año de publicación
2019
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
In the present study, we developed a complete process to produce in insect cells a high amount of the ectodomain of rabies virus glycoprotein G (GE) as suitable antigen for detecting anti-rabies antibodies. Using the baculovirus expression vector system in Sf9 insect cells combined with a novel chimeric promoter (polh-pSeL), the expression level reached a yield of 4.1 ± 0.3 mg/L culture, which was significantly higher than that achieved with the standard polh promoter alone. The protein was recovered from the cell lysates and easily purified in only one step by metal ion affinity chromatography, with a yield of 95% and a purity of 87%. Finally, GE was successfully used in an assay to detect specific antibodies in serum samples derived from rabies-vaccinated animals. The efficient strategy developed in this work is an interesting method to produce high amounts of this glycoprotein.
Instituto de Biotecnología
Fil: Targovnik, Alexandra Marisa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Ferrari, Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas “Prof. Alejandro C. Paladini”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Mc Callum, Gregorio Juan. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Arregui, Mariana Bernadett. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Smith, Ignacio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Bracco, Lautaro Fidel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Alfonso, Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Lopez, Maria Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Martínez‑Solís, María. Universitat de València. Department of Genetics and Estructura de Recerca Interdisciplinar en Biotecnologia i Biomedicina; España
Fil: Herrero, Salvador. Universitat de València. Department of Genetics and Estructura de Recerca Interdisciplinar en Biotecnologia i Biomedicina; España
Fil: Miranda, Maria Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fuente
3 Biotech 9 : 385. (Noviembre 2019)
Materia
Baculovirus
Virus de la Rabia
Glicoproteínas
Anticuerpos
Rabies Virus
Glycoproteins
Antibodies
Nivel de accesibilidad
acceso restringido
Condiciones de uso
Repositorio
INTA Digital (INTA)
Institución
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The protein was recovered from the cell lysates and easily purified in only one step by metal ion affinity chromatography, with a yield of 95% and a purity of 87%. Finally, GE was successfully used in an assay to detect specific antibodies in serum samples derived from rabies-vaccinated animals. The efficient strategy developed in this work is an interesting method to produce high amounts of this glycoprotein.Instituto de BiotecnologíaFil: Targovnik, Alexandra Marisa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ferrari, Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas “Prof. Alejandro C. Paladini”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mc Callum, Gregorio Juan. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Arregui, Mariana Bernadett. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Smith, Ignacio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bracco, Lautaro Fidel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Alfonso, Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lopez, Maria Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martínez‑Solís, María. Universitat de València. Department of Genetics and Estructura de Recerca Interdisciplinar en Biotecnologia i Biomedicina; EspañaFil: Herrero, Salvador. Universitat de València. Department of Genetics and Estructura de Recerca Interdisciplinar en Biotecnologia i Biomedicina; EspañaFil: Miranda, Maria Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. 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