Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells

Autores
Targovnik, Alexandra Marisa; Ferrari, Alejandro; Mc Callum, Gregorio Juan; Arregui, Mariana Bernadett; Smith, Ignacio; Bracco, Lautaro Fidel; Alfonso, Victoria; López, María Gabriela; Martínez Solís, María; Herrero, Salvador; Miranda, María Victoria
Año de publicación
2019
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
In the present study, we developed a complete process to produce in insect cells a high amount of the ectodomain of rabies virus glycoprotein G (GE) as suitable antigen for detecting anti-rabies antibodies. Using the baculovirus expression vector system in Sf9 insect cells combined with a novel chimeric promoter (polh-pSeL), the expression level reached a yield of 4.1± 0.3 mg/L culture, which was signifcantly higher than that achieved with the standard polh promoter alone. The protein was recovered from the cell lysates and easily purifed in only one step by metal ion afnity chromatography, with a yield of 95% and a purity of 87%. Finally, GE was successfully used in an assay to detect specifc antibodies in serum samplesderived from rabies-vaccinated animals. The efcient strategy developed in this work is an interesting method to produce high amounts of this glycoprotein.
Fil: Targovnik, Alexandra Marisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Ferrari, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina
Fil: Mc Callum, Gregorio Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Arregui, Mariana Bernadett. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Smith, Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Bracco, Lautaro Fidel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Alfonso, Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: López, María Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Martínez Solís, María. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; España
Fil: Herrero, Salvador. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; España
Fil: Miranda, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Materia
BACULOVIRUS
RABIES VIRUS GLYCOPROTEIN
POLH PSEL PROMOTER
SF9 CELLS
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
OAI Identificador
oai:ri.conicet.gov.ar:11336/121583
Acceder
id CONICETDig_5a7d9d0f655d94acf8d30638ecf18d7f
oai_identifier_str oai:ri.conicet.gov.ar:11336/121583
network_acronym_str CONICETDig
repository_id_str 3498
network_name_str CONICET Digital (CONICET)
spelling Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cellsTargovnik, Alexandra MarisaFerrari, AlejandroMc Callum, Gregorio JuanArregui, Mariana BernadettSmith, IgnacioBracco, Lautaro FidelAlfonso, VictoriaLópez, María GabrielaMartínez Solís, MaríaHerrero, SalvadorMiranda, María VictoriaBACULOVIRUSRABIES VIRUS GLYCOPROTEINPOLH PSEL PROMOTERSF9 CELLShttps://purl.org/becyt/ford/1.6https://purl.org/becyt/ford/1In the present study, we developed a complete process to produce in insect cells a high amount of the ectodomain of rabies virus glycoprotein G (GE) as suitable antigen for detecting anti-rabies antibodies. Using the baculovirus expression vector system in Sf9 insect cells combined with a novel chimeric promoter (polh-pSeL), the expression level reached a yield of 4.1± 0.3 mg/L culture, which was signifcantly higher than that achieved with the standard polh promoter alone. The protein was recovered from the cell lysates and easily purifed in only one step by metal ion afnity chromatography, with a yield of 95% and a purity of 87%. Finally, GE was successfully used in an assay to detect specifc antibodies in serum samplesderived from rabies-vaccinated animals. The efcient strategy developed in this work is an interesting method to produce high amounts of this glycoprotein.Fil: Targovnik, Alexandra Marisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Ferrari, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Mc Callum, Gregorio Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Arregui, Mariana Bernadett. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Smith, Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Bracco, Lautaro Fidel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Alfonso, Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: López, María Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martínez Solís, María. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; EspañaFil: Herrero, Salvador. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; EspañaFil: Miranda, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaSpringer2019-10info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_6501info:ar-repo/semantics/articuloapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/121583Targovnik, Alexandra Marisa; Ferrari, Alejandro; Mc Callum, Gregorio Juan; Arregui, Mariana Bernadett; Smith, Ignacio; et al.; Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells; Springer; 3 Biotech; 9; 11; 10-2019; 1-112190-572X2190-5738CONICET DigitalCONICETenginfo:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/http://link.springer.com/10.1007/s13205-019-1920-4info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/10.1007/s13205-019-1920-4info:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/reponame:CONICET Digital (CONICET)instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas2025-09-03T10:01:44Zoai:ri.conicet.gov.ar:11336/121583instacron:CONICETInstitucionalhttp://ri.conicet.gov.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://ri.conicet.gov.ar/oai/requestdasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:34982025-09-03 10:01:44.699CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicasfalse
dc.title.none.fl_str_mv Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
title Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
spellingShingle Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
Targovnik, Alexandra Marisa
BACULOVIRUS
RABIES VIRUS GLYCOPROTEIN
POLH PSEL PROMOTER
SF9 CELLS
title_short Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
title_full Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
title_fullStr Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
title_full_unstemmed Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
title_sort Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
dc.creator.none.fl_str_mv Targovnik, Alexandra Marisa
Ferrari, Alejandro
Mc Callum, Gregorio Juan
Arregui, Mariana Bernadett
Smith, Ignacio
Bracco, Lautaro Fidel
Alfonso, Victoria
López, María Gabriela
Martínez Solís, María
Herrero, Salvador
Miranda, María Victoria
author Targovnik, Alexandra Marisa
author_facet Targovnik, Alexandra Marisa
Ferrari, Alejandro
Mc Callum, Gregorio Juan
Arregui, Mariana Bernadett
Smith, Ignacio
Bracco, Lautaro Fidel
Alfonso, Victoria
López, María Gabriela
Martínez Solís, María
Herrero, Salvador
Miranda, María Victoria
author_role author
author2 Ferrari, Alejandro
Mc Callum, Gregorio Juan
Arregui, Mariana Bernadett
Smith, Ignacio
Bracco, Lautaro Fidel
Alfonso, Victoria
López, María Gabriela
Martínez Solís, María
Herrero, Salvador
Miranda, María Victoria
author2_role author
author
author
author
author
author
author
author
author
author
dc.subject.none.fl_str_mv BACULOVIRUS
RABIES VIRUS GLYCOPROTEIN
POLH PSEL PROMOTER
SF9 CELLS
topic BACULOVIRUS
RABIES VIRUS GLYCOPROTEIN
POLH PSEL PROMOTER
SF9 CELLS
purl_subject.fl_str_mv https://purl.org/becyt/ford/1.6
https://purl.org/becyt/ford/1
dc.description.none.fl_txt_mv In the present study, we developed a complete process to produce in insect cells a high amount of the ectodomain of rabies virus glycoprotein G (GE) as suitable antigen for detecting anti-rabies antibodies. Using the baculovirus expression vector system in Sf9 insect cells combined with a novel chimeric promoter (polh-pSeL), the expression level reached a yield of 4.1± 0.3 mg/L culture, which was signifcantly higher than that achieved with the standard polh promoter alone. The protein was recovered from the cell lysates and easily purifed in only one step by metal ion afnity chromatography, with a yield of 95% and a purity of 87%. Finally, GE was successfully used in an assay to detect specifc antibodies in serum samplesderived from rabies-vaccinated animals. The efcient strategy developed in this work is an interesting method to produce high amounts of this glycoprotein.
Fil: Targovnik, Alexandra Marisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Ferrari, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina
Fil: Mc Callum, Gregorio Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Arregui, Mariana Bernadett. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Smith, Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Bracco, Lautaro Fidel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Alfonso, Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: López, María Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Martínez Solís, María. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; España
Fil: Herrero, Salvador. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; España
Fil: Miranda, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
description In the present study, we developed a complete process to produce in insect cells a high amount of the ectodomain of rabies virus glycoprotein G (GE) as suitable antigen for detecting anti-rabies antibodies. Using the baculovirus expression vector system in Sf9 insect cells combined with a novel chimeric promoter (polh-pSeL), the expression level reached a yield of 4.1± 0.3 mg/L culture, which was signifcantly higher than that achieved with the standard polh promoter alone. The protein was recovered from the cell lysates and easily purifed in only one step by metal ion afnity chromatography, with a yield of 95% and a purity of 87%. Finally, GE was successfully used in an assay to detect specifc antibodies in serum samplesderived from rabies-vaccinated animals. The efcient strategy developed in this work is an interesting method to produce high amounts of this glycoprotein.
publishDate 2019
dc.date.none.fl_str_mv 2019-10
dc.type.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
http://purl.org/coar/resource_type/c_6501
info:ar-repo/semantics/articulo
format article
status_str publishedVersion
dc.identifier.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/11336/121583
Targovnik, Alexandra Marisa; Ferrari, Alejandro; Mc Callum, Gregorio Juan; Arregui, Mariana Bernadett; Smith, Ignacio; et al.; Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells; Springer; 3 Biotech; 9; 11; 10-2019; 1-11
2190-572X
2190-5738
CONICET Digital
CONICET
url http://hdl.handle.net/11336/121583
identifier_str_mv Targovnik, Alexandra Marisa; Ferrari, Alejandro; Mc Callum, Gregorio Juan; Arregui, Mariana Bernadett; Smith, Ignacio; et al.; Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells; Springer; 3 Biotech; 9; 11; 10-2019; 1-11
2190-572X
2190-5738
CONICET Digital
CONICET
dc.language.none.fl_str_mv eng
language eng
dc.relation.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/http://link.springer.com/10.1007/s13205-019-1920-4
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/10.1007/s13205-019-1920-4
dc.rights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
eu_rights_str_mv openAccess
rights_invalid_str_mv https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
application/pdf
application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Springer
publisher.none.fl_str_mv Springer
dc.source.none.fl_str_mv reponame:CONICET Digital (CONICET)
instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
reponame_str CONICET Digital (CONICET)
collection CONICET Digital (CONICET)
instname_str Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
repository.name.fl_str_mv CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
repository.mail.fl_str_mv dasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.ar
_version_ 1842269714751946752
score 13.13397

Publicaciones similares