Clonación y sobreexpresión de las prohibitinas 1 y 2 de Trypanosoma cruzi
- Autores
- Ibarrola Vannucci, Ana Karina; Vilchez Tornero, Susana; Curto, Maria de Los Angeles; Schijman, Alejandro Gabriel; Carrillo de Albornoz, Antonio Osuna
- Año de publicación
- 2016
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- Las prohibitinas (PHB) 1 y 2 son proteínas conservadas, pertenecientes a la superfamilia SPFH (Stomatins, Prohibitins, Flotillins, HflK/C), con un dominio común PHB. En eucariotas superiores ésta familia está involucrada en eventos como: la proliferación celular, envejecimiento, apoptosis y el mantenimiento de la integridad mitocondrial. La familia de las prohibitinas, también puede actuar como chaperonas mitocondriales o jugar un papel en la biogénesis mitocondrial. Dentro del grupo de los tripanosomátidos, se comprobó su presencia en diferentes especies de Leishmania y en Trypanosoma brucei. En Leishmania donovani, se determinó que las prohibitinas juegan un papel importante en la interacción húesped-parásito, favoreciendo la infección del mismo. En cambio, en Trypanosoma brucei, se las encontró en las mitocondrias formando un complejo de proteínas, que participaría en el correcto plegamiento de las enzimas de la cadena respiratoria, actuando como chaperona / holdasa. Hasta el momento no hay estudios realizados en Trypanosoma cruzi. La comparación de las secuencias aminoacídicas de estas proteínas con la de eucariotas superiores, revelan un nivel de identidad entre 53 y 39% para la PHB1; y entre el 50 y el 34% para la PHB2. En los tripanosomátidos, estas proteínas se encuentran más conservadas, compartiendo valores de identidad hasta el 93%, sugiriendo un papel importante. Partiendo de extractos de proteínas totales de epimastigotas y amastigotas/tripomastigotas sanguíneos, a través de un Western blot se comprobó la presencia de las proteínas de estudio en estos estadios. Además, se realizó un rastreo de la presencia de los genes PHB1 y PHB2 por PCR en 7 cepas diferentes de T. cruzi, pertenecientes a distintos DTUs. Solo en la cepa CL-Brener estos genes se encuentran asignados a cromosomas, la primera se encuentra en el cromosoma 25 y la segunda en el cromosoma 38. En el presente trabajo, también se describe la clonación de expresión de los genes de estudio, partiendo de cDNA de epimastigotes de la cepa PAN4 (DTU I) en el vector pTREX-TAPtag-GW, la transfección y sobreexpresión de los mismos en las cepas DM28 (DTU I) y CL Brener (DTU VI).
Fil: Ibarrola Vannucci, Ana Karina. Universidad de Granada; España
Fil: Vilchez Tornero, Susana. Universidad de Granada; España
Fil: Curto, Maria de Los Angeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina
Fil: Schijman, Alejandro Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina
Fil: Carrillo de Albornoz, Antonio Osuna. Universidad de Granada; España
XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; SIMPOSIO Internacional de Biología Celular y Molecular de la Enfermedad de Chagas
Santa Fe
Argentina
Sociedad Argentina de Protozoología - Materia
-
PROHIBITINAS
TRYPANOSOMA CRUZI
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- acceso abierto
- Condiciones de uso
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Clonación y sobreexpresión de las prohibitinas 1 y 2 de Trypanosoma cruziIbarrola Vannucci, Ana KarinaVilchez Tornero, SusanaCurto, Maria de Los AngelesSchijman, Alejandro GabrielCarrillo de Albornoz, Antonio OsunaPROHIBITINASTRYPANOSOMA CRUZIUNIDADES DISCRETAS DE TIPIFICACIÓNhttps://purl.org/becyt/ford/1.6https://purl.org/becyt/ford/1Las prohibitinas (PHB) 1 y 2 son proteínas conservadas, pertenecientes a la superfamilia SPFH (Stomatins, Prohibitins, Flotillins, HflK/C), con un dominio común PHB. En eucariotas superiores ésta familia está involucrada en eventos como: la proliferación celular, envejecimiento, apoptosis y el mantenimiento de la integridad mitocondrial. La familia de las prohibitinas, también puede actuar como chaperonas mitocondriales o jugar un papel en la biogénesis mitocondrial. Dentro del grupo de los tripanosomátidos, se comprobó su presencia en diferentes especies de Leishmania y en Trypanosoma brucei. En Leishmania donovani, se determinó que las prohibitinas juegan un papel importante en la interacción húesped-parásito, favoreciendo la infección del mismo. En cambio, en Trypanosoma brucei, se las encontró en las mitocondrias formando un complejo de proteínas, que participaría en el correcto plegamiento de las enzimas de la cadena respiratoria, actuando como chaperona / holdasa. Hasta el momento no hay estudios realizados en Trypanosoma cruzi. La comparación de las secuencias aminoacídicas de estas proteínas con la de eucariotas superiores, revelan un nivel de identidad entre 53 y 39% para la PHB1; y entre el 50 y el 34% para la PHB2. En los tripanosomátidos, estas proteínas se encuentran más conservadas, compartiendo valores de identidad hasta el 93%, sugiriendo un papel importante. Partiendo de extractos de proteínas totales de epimastigotas y amastigotas/tripomastigotas sanguíneos, a través de un Western blot se comprobó la presencia de las proteínas de estudio en estos estadios. Además, se realizó un rastreo de la presencia de los genes PHB1 y PHB2 por PCR en 7 cepas diferentes de T. cruzi, pertenecientes a distintos DTUs. Solo en la cepa CL-Brener estos genes se encuentran asignados a cromosomas, la primera se encuentra en el cromosoma 25 y la segunda en el cromosoma 38. En el presente trabajo, también se describe la clonación de expresión de los genes de estudio, partiendo de cDNA de epimastigotes de la cepa PAN4 (DTU I) en el vector pTREX-TAPtag-GW, la transfección y sobreexpresión de los mismos en las cepas DM28 (DTU I) y CL Brener (DTU VI).Fil: Ibarrola Vannucci, Ana Karina. Universidad de Granada; EspañaFil: Vilchez Tornero, Susana. Universidad de Granada; EspañaFil: Curto, Maria de Los Angeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Schijman, Alejandro Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Carrillo de Albornoz, Antonio Osuna. Universidad de Granada; EspañaXXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; SIMPOSIO Internacional de Biología Celular y Molecular de la Enfermedad de ChagasSanta FeArgentinaSociedad Argentina de ProtozoologíaSociedad Argentina de Protozoología2016info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/conferenceObjectReuniónBookhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/236377Clonación y sobreexpresión de las prohibitinas 1 y 2 de Trypanosoma cruzi; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; SIMPOSIO Internacional de Biología Celular y Molecular de la Enfermedad de Chagas; Santa Fe; Argentina; 2016; 57-58CONICET DigitalCONICETspainfo:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://protozoologia.org.ar/wp-content/uploads/Libro-de-resumenes-SAP2016.pdfNacionalinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/reponame:CONICET Digital (CONICET)instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas2025-10-15T14:22:51Zoai:ri.conicet.gov.ar:11336/236377instacron:CONICETInstitucionalhttp://ri.conicet.gov.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://ri.conicet.gov.ar/oai/requestdasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:34982025-10-15 14:22:52.29CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicasfalse |
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