Optimising methods for human thyroid primary cell culture isolation

Autores
Arenal, Valentina; Madsen, Clara; Fernández Chávez, Lucía; Alonso, Exequiel Gonzalo; Pichel, Pamela; Recio, Sergio; Fermento, María Eugenia; Alonso, Eliana Noelia; Ferronato, María Julia; Facchinetti, Maria Marta; Curino, Alejandro Carlos; Colo, Georgina Pamela
Año de publicación
2024
Idioma
inglés
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
According to the GLOBOCAN 2020 database on cancer incidence and mortality, thyroid cancer (TC) has the ninth-highest cancer in- cidence worldwide. Basic research contributes to developing diag- nostic and treatment alternatives. Cell models play a crucial role in vitro study of the thyroid. Permanent thyroid cell lines widely used in laboratory research typically originate from tumors. However, there is a need to compare these tumor cells with cells originating from normal thyroid tissue. Primary cell lines are invaluable for exploring cancer biology and investigating novel treatments. This study aims is optimize an isolation protocol of human primary thyroid cells from histologically non-tumor, tumor, and metastasis tissues. Primary cul- tures are laborious to obtain and then difficult to maintain in culture. We tried five different methods for isolating primary cells that com- bine mechanical disaggregation and enzymatic digestion. These methods use distinct enzymatic compositions, incubation times, and mechanical approaches, including centrifugation. We have ar- rived at a simple, rapid, and effective method to culture cells from thyroid biopsies for subsequent studies. Our previous results have revealed that GEF-H1 plays a pro-tumor role in different tumoral cell lines. We investigate the expression of GEF-H1, which belongs to the RhoA-GTPase activator family, in primary cells. Using immu- nofluorescence staining, we observed significantly higher GEF-H1 protein expression in cytokeratin-19 positive thyroid carcinoma cells compared to normal thyroid cells (p<0.0001). Our results propose a cheap and easy isolation thyroid primary cells protocol and suggest that GEF-H1 could be used as a potential tumor biomarker in TC.
Fil: Arenal, Valentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Madsen, Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Fernández Chávez, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Alonso, Exequiel Gonzalo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Pichel, Pamela. Hospital Municipal Dr Leónidas Lucero; Argentina
Fil: Recio, Sergio. Hospital Municipal Dr Leónidas Lucero; Argentina
Fil: Fermento, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Alonso, Eliana Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Ferronato, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Facchinetti, Maria Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Curino, Alejandro Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Colo, Georgina Pamela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
LXIX Reunión Anual De La Sociedad Argentina de Investigación Clínica; XXVI Sociedad Argentina De Fisiología y Asociación Latinoamericana De Ciencias Fisiológicas
Ciudad Autónoma de Buenos Aires
Argentina
Sociedad Argentina De Investigación Clínica
Sociedad Argentina De Fisiología
Asociación Latinoamericana De Ciencias Fisiológicas
Materia
THYROID CANCER
GEF-H1
PRIMARY CELL CULTURE
METHODS
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
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Primary cell lines are invaluable for exploring cancer biology and investigating novel treatments. This study aims is optimize an isolation protocol of human primary thyroid cells from histologically non-tumor, tumor, and metastasis tissues. Primary cul- tures are laborious to obtain and then difficult to maintain in culture. We tried five different methods for isolating primary cells that com- bine mechanical disaggregation and enzymatic digestion. These methods use distinct enzymatic compositions, incubation times, and mechanical approaches, including centrifugation. We have ar- rived at a simple, rapid, and effective method to culture cells from thyroid biopsies for subsequent studies. Our previous results have revealed that GEF-H1 plays a pro-tumor role in different tumoral cell lines. We investigate the expression of GEF-H1, which belongs to the RhoA-GTPase activator family, in primary cells. Using immu- nofluorescence staining, we observed significantly higher GEF-H1 protein expression in cytokeratin-19 positive thyroid carcinoma cells compared to normal thyroid cells (p<0.0001). Our results propose a cheap and easy isolation thyroid primary cells protocol and suggest that GEF-H1 could be used as a potential tumor biomarker in TC.Fil: Arenal, Valentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Madsen, Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Fernández Chávez, Lucía. 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Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. 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Fil: Pichel, Pamela. Hospital Municipal Dr Leónidas Lucero; Argentina
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Fil: Fermento, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
Fil: Alonso, Eliana Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina
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LXIX Reunión Anual De La Sociedad Argentina de Investigación Clínica; XXVI Sociedad Argentina De Fisiología y Asociación Latinoamericana De Ciencias Fisiológicas
Ciudad Autónoma de Buenos Aires
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