Hydatid fluid from Echinococcus granulosus induces phagophore and autophagosome formation in dendritic cells through an upregulation of Beclin-1

Autores
Chop, Maia; Nicolao, María Celeste; Loos, Julia Alexandra; Ledo, Camila; Cumino, Andrea Carina; Rodríguez Rodrígues, Christian Fernando Ariel
Año de publicación
2021
Idioma
inglés
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Background: The cestode Echinococcus granulosus (Eg) is the etiological agent of cystic echinococcosis. This parasite develops cysts filled with hydatid fluid (HF) in the viscera of the intermediate host. Autophagy is a cellular catabolic process that plays a key role in the presentation of endogenous and exogenous proteins, promoting the activation of T cells. The aim of this work is to analyze if HF, constituted by a wide range of parasite proteins, could trigger autophagy in dendritic cells. Methods: HF was punctured from the hydatid cysts collected of infected cattle slaughtered. Murine BMDCs were cultured in RPMI 1640 medium, supplemented with FLT3-L. First, lysosome activity was evaluated using Acridine Orange, a fluorophore that can be trapped in acidic vesicular organelles. Then, autophagy induction was evaluated by FACS, qPCR, Confocal and Transmission Electron Microscopy. Rapamycin (20 nM) and chloroquine (100μM) were used to modulate autophagic flux. LC3-attachment to the autophagic membrane, were analyzed by stained DCs with anti LC3-β antibody (clone H50). Results: HF significantly increased acridine orange cytoplasmic accumulation compared to control cells (***p <0.001) and enhanced the effect of rapamycin (****p<0.0001). The ultrastructural analysis of TEM showed that in the presence of HF, DCs stimulate the formation of phagophores, double lipid membrane autophagosome, MVBs and autolysosomes. Also, HF-stimulated BMDCs significantly enhanced the mean fluorescence intensity of LC3-positive structures in comparison with unstimulated cells (*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001 HF-stimulated cells vs controls). Finally, we have observed that HF induces a significant increase in the transcriptional expression of LC3 and Beclin-1 (n=3, **p <0.01 vs control) and enhances the expression induced by rapamycin. Conclusions: These results suggest that HF of Echinococcus granulosus regulates gene expression to increase autophagy- related structures in DCs.
Fil: Chop, Maia. Universidad Nacional de Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente; Argentina
Fil: Nicolao, María Celeste. Universidad Nacional de Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente; Argentina
Fil: Loos, Julia Alexandra. Universidad Nacional de Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente; Argentina
Fil: Ledo, Camila. Universidad Nacional de Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente; Argentina
Fil: Cumino, Andrea Carina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente; Argentina
Fil: Rodríguez Rodrígues, Christian Fernando Ariel. Universidad Nacional de Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente; Argentina
LXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; LIII Reunión Anual de la Asociación de Farmacología Experimental y XI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas
Argentina
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Sociedad Argentina de Inmunología
Asociación de Farmacología Experimental
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Materia
ECHINOCOCCUS
AUTOPHAGY
DENDRITIC CELLS
BECLIN-1
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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Murine BMDCs were cultured in RPMI 1640 medium, supplemented with FLT3-L. First, lysosome activity was evaluated using Acridine Orange, a fluorophore that can be trapped in acidic vesicular organelles. Then, autophagy induction was evaluated by FACS, qPCR, Confocal and Transmission Electron Microscopy. Rapamycin (20 nM) and chloroquine (100μM) were used to modulate autophagic flux. LC3-attachment to the autophagic membrane, were analyzed by stained DCs with anti LC3-β antibody (clone H50). Results: HF significantly increased acridine orange cytoplasmic accumulation compared to control cells (***p <0.001) and enhanced the effect of rapamycin (****p<0.0001). The ultrastructural analysis of TEM showed that in the presence of HF, DCs stimulate the formation of phagophores, double lipid membrane autophagosome, MVBs and autolysosomes. 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Instituto de Investigaciones en Producción, Sanidad y Ambiente; ArgentinaLXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; LIII Reunión Anual de la Asociación de Farmacología Experimental y XI Reunión Anual de la Asociación Argentina de NanomedicinasArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaSociedad Argentina de InmunologíaAsociación de Farmacología ExperimentalAsociación Argentina de NanomedicinasFundación Revista Medicina2021info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/conferenceObjectReuniónJournalhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/177700Hydatid fluid from Echinococcus granulosus induces phagophore and autophagosome formation in dendritic cells through an upregulation of Beclin-1; LXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; LIII Reunión Anual de la Asociación de Farmacología Experimental y XI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas; Argentina; 2021; 112-1131669-9106CONICET DigitalCONICETenginfo:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.reunionbiociencias.com.ar/wp-content/uploads/2021/11/Revista-Medicina-2021.pdfNacionalinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/reponame:CONICET Digital (CONICET)instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas2025-09-29T10:44:14Zoai:ri.conicet.gov.ar:11336/177700instacron:CONICETInstitucionalhttp://ri.conicet.gov.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://ri.conicet.gov.ar/oai/requestdasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:34982025-09-29 10:44:14.548CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicasfalse
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LXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; LIII Reunión Anual de la Asociación de Farmacología Experimental y XI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas
Argentina
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