A Multispecies Competitive Nanobody-Based ELISA for the Detection of Antibodies Against Hepatitis E Virus

Autores
Arce, Lorena Paola; Pavan, Maria Florencia; Bok, Marina; Gutiérrez, Silvina Elena; Tammone Santos, Agostina; Condorí, Walter Ezequiel; Uhart, Marcela María; Estein, Silvia Marcela; Parreño, Gladys Viviana; Vizoso Pinto, María Guadalupe; Ibañez, Lorena Itatí
Año de publicación
2023
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
The hepatitis E virus (HEV) is an emergent zoonotic virus causing viral hepatitis worldwide. Clinically, hepatitis E is not easily distinguished from other types of acute viral hepatitis. There is a need for HEV diagnostic assays to detect and prevent interspecies transmission among susceptible populations. Nanobodies (Nbs) are expressed recombinantly in different systems, produced with high yields, and have superior physicochemical properties compared with conventional antibodies (Ab). Several Nbs against ORF2, the capsid protein and main antigen, were selected and produced in E. coli. Nb39 and Nb74 specifically recognized HEV ORF2 (genotypes 3 and 4). A competitive ELISA (cELISA) was developed and validated using a reference panel of human (n = 86) and swine sera (n = 116) tested in comparison with a commercial kit. The optimal cutoff values determined by ROC analysis were 69.16% (human) and 58.76% (swine); the sensitivity and specificity were high: 97.4% (IC95%; 86.5–99.5%) and 95.8% (IC95%; 86.0-98.8%) for human vs. 100% (IC95%: 93.5–100%) and 98.3% (IC95%: 91.0-99.7%) for swine. Further, the cELISA detected total anti-HEV antibodies in wild boar, deer, and mice. To our knowledge, this is the first report of production of Nbs against HEV-3 ORF2 for diagnostic purposes.
Fil: Arce, Lorena Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina
Fil: Pavan, Maria Florencia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía; Argentina
Fil: Bok, Marina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Gutiérrez, Silvina Elena. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Tammone Santos, Agostina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Condorí, Walter Ezequiel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina
Fil: Uhart, Marcela María. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina
Fil: Estein, Silvia Marcela. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina
Fil: Ibañez, Lorena Itatí. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Materia
VIRUS DE LA HEPATITIS E
NANOANTICUERPOS
ELISA COMPETITIVO
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Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
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Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Ibañez, Lorena Itatí. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. 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