Protocol for bevacizumab purification using Ac-PHQGQHIGVSK-agarose

Autores
Barredo, Gabriela Romina; Giudicessi, Silvana Laura; Martínez Ceron, María Camila; Saavedra, Soledad Lorena; Rodriguez, Santiago; Filgueira Risso, Lucas; Erra Balsells, Rosa; Mahler, Gustavo; Albericio, Fernando; Cascone, Osvaldo; Camperi, Silvia Andrea
Año de publicación
2019
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Bevacizumab is a monoclonal antibody, produced in CHO cells, used for the treatment of many human cancers. It is an anti-vascular endothelial growth factor (anti-VEGF) that blocks the growth of tumor blood vessels. Nowadays its purification is achieved by affinity chromatography (AC) using protein A which is a very expensive ligand. On the other hand, the peptide Ac-PHQGQHIGVSK contained in the VEGF fragment binds bevacizumab with high affinity. This short peptide ligand has higher stability and lower cost than protein A and it can be prepared very easily by solid phase peptide synthesis. The present protocol describes the synthesis of Ac-PHQGQHIGVSK-agarose and its use for affinity chromatography purification of bevacizumab from a clarified CHO cell culture.?Ac-PHQGQHIGVSK-agarose capacity and selectivity are equivalent to those of protein A matrices.?The peptide ligand shows a greater stability and lower cost. The lack of Trp, Met or Cys in the peptide ligand prevents its oxidation and extends the useful life of the chromatographic matrix.?Mild conditions used during chromatography preserved the integrity of bevacizumab.
Fil: Barredo, Gabriela Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Giudicessi, Silvana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Martínez Ceron, María Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Saavedra, Soledad Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Rodriguez, Santiago. No especifíca;
Fil: Filgueira Risso, Lucas. No especifíca;
Fil: Erra Balsells, Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; Argentina
Fil: Mahler, Gustavo. No especifíca;
Fil: Albericio, Fernando. Universidad de Barcelona; España
Fil: Cascone, Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Fil: Camperi, Silvia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina
Materia
Afinidad
mAb
Péptidos
Ligandos
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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