Actividad de fosfatasa alcalina en intestino anterior del lenguado Paralichthys Orbignyanus: caracterización parcial

Autores
Méndez, Eugenia; Radonic, Mariela; Lopez, Andrea; Lopez Mañanes, Alejandra Antonia
Año de publicación
2019
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
A pesar de la importancia ecológica y gran potencial para la acuicultura de Paralichthys orbignyanus faltan estudios sobre fisiología bioquímica digestiva y metabólica, en particular sobre existencia y características de enzimas claves en tracto digestivo tales como fosfatasa alcalina (AP). Determinamos la existencia de actividad de AP y realizamos una caracterización parcial en intestino anterior de adultos de P. orbignyanus. Los individuos fueron mantenidos en condiciones controladas de salinidad, fotoperiodo, temperatura y alimentación (41,8% hidratos de carbono; 2,8% lípidos; 46% proteínas). Para los ensayos, fueron privados de alimento 24 hs, Se trabajó con homogenatos de intestino anterior (buffer Tris/HCl 50 mM pH 7,4, 0°C; 4 ml g-1 de tejido). La actividad de AP se determinó por hidrólisis de p-nitrofenilfosfato en Tris 100 mM/HCl/SO4Mg 4 mM (curva de pH: 7,4-8,4). La actividad de total de AP (APT) fue similar a pHs 7,4- 8,4, un 54 % mayor a pH 9,0 (1671±113 nmoles pNP x min-1 x mg prot-1) que a pH 8,4. APT a pH 9,0 exhibió cinética michaeliana (Km=0,71 mM) (sustrato:0,5-11mM). El levamisol (inhibidor de AP no específica de tejidos; pero no de AP intestinal) inhibió parcialmente APT a pH 9.0 pero no a pH 7,7. Se caracterizó entonces la actividad de AP a pH 7.7. Esta actividad presentó comportamiento alostérico (sustrato:0,5-15mM). fue similar a 4ºC y 25ºC y aumentó 101% a 37ºC (428±82 nmoles pNP x min-1 x mg prot-1). La inhibición diferencial por levamisol y las diferentes características bioquímicas sugieren la existencia de actividad de AP no específicas y específicas de tejido en intestino anterior de P. orbignyanus. La insensibilidad a levamisol de AP a pH 7,7 sugiere que esta actividad correspondería a AP intestinal. Estos resultados constituyen la primera evidencia de la existencia de actividad de AP en intestino anterior de peces planos del género Paralichthys.
Fil: Méndez, Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras; Argentina
Fil: Radonic, Mariela. Instituto Nacional de Investigaciones y Desarrollo Pesquero; Argentina
Fil: Lopez, Andrea. Instituto Nacional de Investigaciones y Desarrollo Pesquero; Argentina
Fil: Lopez Mañanes, Alejandra Antonia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras; Argentina
XIII Encuentro Biólog@s en Red
Mar del Plata
Argentina
Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Materia
PARALICHTHYS ORBIGNIANUS
FOSFATASA ALCALINA
INTESTINO
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
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spelling Actividad de fosfatasa alcalina en intestino anterior del lenguado Paralichthys Orbignyanus: caracterización parcialMéndez, EugeniaRadonic, MarielaLopez, AndreaLopez Mañanes, Alejandra AntoniaPARALICHTHYS ORBIGNIANUSFOSFATASA ALCALINAINTESTINOhttps://purl.org/becyt/ford/1.6https://purl.org/becyt/ford/1A pesar de la importancia ecológica y gran potencial para la acuicultura de Paralichthys orbignyanus faltan estudios sobre fisiología bioquímica digestiva y metabólica, en particular sobre existencia y características de enzimas claves en tracto digestivo tales como fosfatasa alcalina (AP). Determinamos la existencia de actividad de AP y realizamos una caracterización parcial en intestino anterior de adultos de P. orbignyanus. Los individuos fueron mantenidos en condiciones controladas de salinidad, fotoperiodo, temperatura y alimentación (41,8% hidratos de carbono; 2,8% lípidos; 46% proteínas). Para los ensayos, fueron privados de alimento 24 hs, Se trabajó con homogenatos de intestino anterior (buffer Tris/HCl 50 mM pH 7,4, 0°C; 4 ml g-1 de tejido). La actividad de AP se determinó por hidrólisis de p-nitrofenilfosfato en Tris 100 mM/HCl/SO4Mg 4 mM (curva de pH: 7,4-8,4). La actividad de total de AP (APT) fue similar a pHs 7,4- 8,4, un 54 % mayor a pH 9,0 (1671±113 nmoles pNP x min-1 x mg prot-1) que a pH 8,4. APT a pH 9,0 exhibió cinética michaeliana (Km=0,71 mM) (sustrato:0,5-11mM). El levamisol (inhibidor de AP no específica de tejidos; pero no de AP intestinal) inhibió parcialmente APT a pH 9.0 pero no a pH 7,7. Se caracterizó entonces la actividad de AP a pH 7.7. Esta actividad presentó comportamiento alostérico (sustrato:0,5-15mM). fue similar a 4ºC y 25ºC y aumentó 101% a 37ºC (428±82 nmoles pNP x min-1 x mg prot-1). La inhibición diferencial por levamisol y las diferentes características bioquímicas sugieren la existencia de actividad de AP no específicas y específicas de tejido en intestino anterior de P. orbignyanus. La insensibilidad a levamisol de AP a pH 7,7 sugiere que esta actividad correspondería a AP intestinal. Estos resultados constituyen la primera evidencia de la existencia de actividad de AP en intestino anterior de peces planos del género Paralichthys.Fil: Méndez, Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras; ArgentinaFil: Radonic, Mariela. Instituto Nacional de Investigaciones y Desarrollo Pesquero; ArgentinaFil: Lopez, Andrea. Instituto Nacional de Investigaciones y Desarrollo Pesquero; ArgentinaFil: Lopez Mañanes, Alejandra Antonia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras; ArgentinaXIII Encuentro Biólog@s en RedMar del PlataArgentinaUniversidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y NaturalesAsociación de Jóvenes Investigadores en Formación2019info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/conferenceObjectEncuentroJournalhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/265314Actividad de fosfatasa alcalina en intestino anterior del lenguado Paralichthys Orbignyanus: caracterización parcial; XIII Encuentro Biólog@s en Red; Mar del Plata; Argentina; 2018; 128-1281853-3426CONICET DigitalCONICETspainfo:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://biologosenred.ar/ber-2018Nacionalinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/reponame:CONICET Digital (CONICET)instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas2025-09-03T10:05:34Zoai:ri.conicet.gov.ar:11336/265314instacron:CONICETInstitucionalhttp://ri.conicet.gov.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://ri.conicet.gov.ar/oai/requestdasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:34982025-09-03 10:05:34.898CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicasfalse
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