Autoanticuerpos anti-beta2 glicoproteína I y anti-protrombina humana. Su rol en la fisiopatología del síndrome antifosfolípido

• Autores: Forastiero, Ricardo Raúl
• Año de publicación: 1997
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Kordich, Lucía Clelia
• Materia: ANTICUERPOS ANTIFOSFOLIPIDOS; ANTICUERPOS ANTI-SS2 GLICOPROTEINA I; ANTICUERPOS ANTIPROTROMBINA; COFACTORES PROTEICOS; SINDROME ANTIFOSFOLIPIDO; ANTIPHOSPHOLIPID ANTIBODIES; ANTI-SS2 GLYCOPROTEIN I ANTIBODIES; ANTI-PROTHROMBIN ANTIBODIES; PROTEIN COFACTORS; ANTIPHOSPHOLIPID SYNDROME
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

El síndrome antifosfolípido (SAF) se caracteriza por la asociación de trombosis venosa o arterial,pérdidas fetales recurrentes y/o trombocitopenia con la presencia de anticuerpos antifosfolípidos (aFL). La especificidad de estos anticuerpos por los fosfolípidos (FL) ha sido cuestionada en losúltimos años y algunos datos experimentales indican la necesidad de ciertos cofactores protéicos paraque ocurra la interacción entre los FL y los anticuerpos. La β2 glicoproteína I (β2GPI) y laprotrombina (II) humana son las principales proteínas reconocidas como cofactores. Principales objetivos - desarrollar enzimoinmunoensayos (ELISA) para evaluar la presencia de anticuerpos anti-β2-GPI yanti-II en pacientes con aFL - estudiar si las inmunoglobulinas G (IgG) purificadas de pacientes con SAF poseen distintaespecificidad antigénica que aquellas obtenidas de pacientes con sífilis. - evaluar la especificidad antigénica de los aFL en relación a las complicaciones clínicas del SAF - analizar la interferencia de los aFL sobre el sistema de la proteina C (PrC) y la biosíntesis deeicosanoidcs de origen plaquetario, como probables mecanismos fisiopatogénicos del SAF Resultados Se optimizaron las condiciones para la detección por ELISA de anticuerpos dirigidos contra β2GPI y II en ausencia de FL. La principal variable de los ensayos fue el tipo de superficie utilizada que juntocon los datos de los experimentos de inhibición indicaron que los anticuerpos sólo reconocen a lasproteínas cuando se presentan en una determinada conformación estmctural. Los anti-β2GPI y anti-IIse detectaron con una frecuencia mucho mayor en los pacientes con enfermedades autoinmunesasociadas a los aFL (SAF y lupus eritematoso sistémico) que en pacientes con aFL sincomplicaciones clínicas del SAF. Los estudios con IgG purificadas demostraron que los aFLasociados con sífilis reconocen epitopes en los FL y la mayoría de las IgGs obtenidas de pacientescon SAF reaccionan específicamente con la β2GPI y/o II. En el estudio retrospectivo de 233pacientes con aFL se encontró que los anti-β2GPI-IgG y los anti-β2GPI-IgM a títulos moderados ofuertes eran factores de riesgo independientes para trombosis venosa y complicaciones obstétricas,respectivamente. Además, los anti-β2GPI se asociaron con el fenómeno adquirido de resistencia a la PrC activada y con la alteración en la biosíntesis de tromboxano plaquetario, reflejada en una mayorexcreción urinaria del metabolito 11-dehidro-tromboxano B2. En conclusión la utilización de ensayos que nos permitan conocer la especificidad antigénica de losaFL podría ser de gran utilidad diagnóstica y permitir una mejor evaluación de los mecanismospatogénicos del SAF.
The antiphospholipid syndrome (APS) is characterized by the association of venous or arterialthrombosis, recurrent fetal loss and/or thrombocytopenia with the presence of antiphospholipidantibodies (aPL). In the last few years it has been questioned the specificity of these antibodiestowards phospholipids (PL). Several studies have emphasized the involvement of some proteincofactors in the interaction between PL and aPL. β2 glycoprotein I (β2GPI) and human prothrombin (II) are the best characterized protein cofactors. Main objectives - to standardize enzyme-linked immunoassays (ELISA) in order to evaluate the presence of anti-β2GPI andanti-II in patients with aPL - to study if the purified immunoglobulins G (IgG) from APS patients differ in the antigenicspecificity of those obtained from syphilis patients - to evaluate the relationship between the antigenic specificity and the clinical complications of the APS - to analize the interference of the aPL on the protein C system and the platelet biosynthesis ofeicosanoids Results We have standardized the ELISA for the detection of anti-β2GPI and anti-II antibodies in theabsence of PL. The experimental evidences on the requirement of a special surface in solid-phaseassays and the results of the inhibition studies indicated that these antibodies do not recognizeproteins unless they have underwent a conformational change. Patients with aPL from theautoimmune group (APS and systemic lupus erythematosus) had a higher prevalence of anti-β2GPIand anti-II antibodies than those from the group without APS-related clinical complications or withinfectious diseases. Using purified IgG fractions, we found that aPL from syphilis react with epitopesexposed on PL but those from APS patients bind mainly to β2GPI and II. In the retrospective analysisperformed in 233 patients with aPL, we found that only anti-β2GPI of IgG and anti-β2GPI of IgMisotype are independent risk factors for venous thrombosis and obstetric complications, respectively. It was found specially when taking into account antibodies at moderate or high titres. Anti-β2GPIantibodies were closely related to the acquired phenomenom of activated protein C resistance and tothe interference on the platelet biosynthesis of eicosanoids, mainly reflected by a significant increasein the urinary excretion of 11-dehydro-thromboxane B2. In conclusion, the introduction of new assays in order to clarify the the antigens of the aPL could bean important tool in the diagnosis and the evaluation of the pathogenic mechanisms of the APS.
Fil: Forastiero, Ricardo Raúl. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.