Estudio de la acetilación de proteínas sinápticas durante la consolidación de la memoria de largo término en ratón

• Autores: Rivas, Ricardo Sebastián
• Año de publicación: 2024
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Freudenthal, Ramiro
• Materia: MEMORIA DE LARGO TERMINO; CONSOLIDACION; ACETILACION; HIPOCAMPO; SINAPSIS; LONG-TERM MEMORY; CONSOLIDATION; ACETYLATION; HIPPOCAMPUS; SYNAPSIS
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

La formación de una memoria de largo término implica que dicha memoria atraviese un proceso de consolidación, el cual implica cambios moleculares como ser las modificaciones postraduccionales de proteínas, tales como fosforilación y acetilación, entre otras. En este marco, se advierte que el uso de inhibidores de deacetilasas afecta la consolidación de memorias y que los cambios en los niveles de acetilación de proteínas sinápticas influyen en los procesos de plasticidad, como ser la potenciación de largo término (LTP). En la presente tesis nos propusimos investigar la modulación de los niveles de acetilación durante la consolidación de la memoria de evitación inhibitoria en ratones, como así también su posible regulación sobre la composición sináptica. Asimismo, analizamos los cambios en los niveles de acetilación asociados a la plasticidad tras inducir una LTP químico (LTPq) en cultivos primarios de neuronas de hipocampo de ratón. Encontramos que la administración intrahipocampal de Tubastatina A (inhibidor especifico de lo deacetilasa citoplasmática KDAC6) facilita la consolidación de la memoria de evitación inhibitoria; este efecto se observa cuando la droga es administrada inmediatamente después de la adquisición, pero no 3 horas más tarde. Esto indica que la inhibición hipocampal de KDAC6 es suficiente para facilitar la memoria estudiada. Observamos también un aumento en los niveles globales de acetilación de tubulina, pero no de la lisina 40 de la misma proteína en extractos hipocampales obtenidos 45 minutos después del entrenamiento. Esto sugiere una regulación diferencial de la acetilación de los residuos de lisina de tubulina durante la consolidación. Finalmente, registramos cambios en los niveles de acetilación dendrítica y sináptica y de la densidad de la proteína de la densidad posináptica PSD95, tras inducir una LTPq en células cultivadas de hipocampo de ratón, siendo posible una regulación entre los cambios mencionados. Concluimos que la acetilación de tubulina es modulada durante la consolidación de la memoria de evitación inhibitoria en ratones.
The formation of a long-term memory implies a process known as consolidation, which involves molecular changes such as post-translational modifications of proteins, such as phosphorylation and acetylation, among others. In this framework, it is noted that the use of deacetylase inhibitors affects the consolidation of memories and that changes in the acetylation levels of synaptic proteins influence plasticity processes, such as long-term potentiation (LTP). In the present thesis we set out to investigate the modulation of acetylation levels during the consolidation of inhibitory avoidance memory in mice, as well as its possible regulation on synaptic composition. Likewise, we analyzed the changes in acetylation levels associated with plasticity after inducing chemical LTP (cLTP) in primary cultures of mouse hippocampal neurons. We found that intrahippocampal administration of Tubastatin A (specific inhibitor of the cytoplasmic deacetylase KDAC6) facilitates the consolidation of inhibitory avoidance memory; This effect is observed when the drug is administered immediately after acquisition, but not 3 hours later. This indicates that hippocampal inhibition of KDAC6 is sufficient to facilitate the memory studied. We also observed an increase in global levels of tubulin acetylation, but not of lysine 40 of the same protein in hippocampal extracts obtained 45 minutes after training. This suggests differential regulation of acetylation of tubulin lysine residues during consolidation. Finally, we recorded changes in the levels of dendritic and synaptic acetylation, and PSD95 density after inducing cLTP in cultured mouse hippocampal cells, a regulation between the aforementioned changes being possible. We conclude that tubulin acetylation is modulated during the consolidation of inhibitory avoidance memory in mice.
Fil: Rivas, Ricardo Sebastián. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.