Estudio funcional y estructural de las quimerinas, una familia de receptores de DAG y esteres de Forbol con actividad de Rac-GAP

• Autores: Coluccio Leskow, Federico
• Año de publicación: 2005
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Kazanietz, Marcelo G.
• Materia: QUIMERINAS; RAC; ESTERES DE FORBOL; DAG; ZEBRAFISH; Z-CHIMAERIN; GASTRULACION; EPIBOLI; CHIMAERINS; RAC; PHORBOL ESTERS; DAG; ZEBRAFISH; GASTRULATION; EPIBOLY
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Las quimerinas son una familia de GAPs (GTPase Activating Proteins) especificas para la familia de proteínas de Rac, reguladas por el segundo mensajero diacilglicerol (DAG) y los esteres de forbol. En mamíferos los genes CHN1 (o α) y CHN2 (o β) codifican para las cuatro isoformas conocidas, α1 y β1 presentan un dominio C1 y un dominio de GAP, mientras que α2 y β2 poseen un dominio adicional SH2. En el primer capitulo de este trabajo se muestra que el gen beta codifica para al menos 3 nuevas isoformas. La resolución de la estructura cristalográfica de β2-chimaerin. Se demuestra que es necesaria la unión del ligando al dominio C1 y la interacción con fosfolípidos de membrana para la activación del GAP. En el tercer capitulo se muestra que el dominio SH2 de β2-chimaerin es capaz de unir proteínas fosforiladas en tirosina y se identifican tres de estas proteínas. En el capitulo cuarto se reporta el clonado y caracterización de z-chimaerin, el producto del único gen de quimerinas presente en el pez cebra. Esta proteína posee características similares a las de mamíferos y se expresa de forma materna y zigotica a lo largo del desarrollo embrionario. En el ultimo capitulo se estudia la función de z-chimaerin en el desarrollo embrionario. Se determino que su actividad de GAP es necesaria en la capa sincitial del saco vitelino para regular el movimiento de epíboli.
Chimaerins are a family of GAPs (GTPase Activating Proteins) specific for the Rac small GTPases regulated by the second messenger diacylglycerol (DAG) and the phorbol esters. In mammalians the genes CHN1 (or α) and CHN2 (or β) encode the four known isoforms, α1 and β1 that posses a C1 and a GAP domain, and α2 and β2 that have an additional SH2 domain. The first chapter describes the existence of at least three novel β isoforms. The 3-D structure of β2-chimaerin reveals that it is autoinhibited with the C1 and GAP domains sterically blocked. In the second chapter a mechanism for lipid activation of β2-chimaerin is proposed. In the third part of this thesis it is shown that the SH2 domain of β2-chimaerin binds phosphotyrosine proteins. Three proteins that interact with β2-chimaerin were isolated. The fourth chapter reports the cloning and characterization of z-chimaerin, the product of the only chimaerin gene in the zebrafish. This protein is similar to the mammalian isoforms and it is maternally and zygotically expressed during embryogenesis. In the last chapter we analyzed the function of z-chimaerin during early development and found that its GAP activity is necessary in the yolk syncytial layer for the regulation of epiboly
Fil: Coluccio Leskow, Federico. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.