Caracterización morfológica y funcional de vesículas extracelulares de cestodes y su interacción con el hospedero

• Autores: Ancarola, María Eugenia
• Año de publicación: 2021
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Cucher, Marcela Alejandra; Poncini, Carolina Verónica
• Materia: CESTODO; ECHINOCOCCUS; TAENIA; VESICULAS EXTRACELULARES; ARN EXTRACELULAR; MICRORNA; CESTODE; ECHINOCOCCUS; EXTRACELLULAR VESICLES; EXTRACELLULAR RNA; MICRORNA
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Los cestodos son platelmintos parásitos que producen infecciones relevantes para la salud humana y animal como la equinococosis y la cisticercosis, causadas por los estadios larvarios de Echinococcus spp. y de Taenia solium, respectivamente. En esta tesis se analizó la secreción de vesículas extracelulares (VE) en cestodos como mecanismo de interacción entre parásito y hospedero. Primero, se evaluó y cuantificó la secreción de VE por diferentes estadios larvarios de Echinococcus spp. Se observó que las características morfológicas del estadio larvario pueden influir en la liberación de VE al medio extra-parasitario. Luego, se caracterizó la composición de las VE de cestodos y se identificaron proteínas enriquecidas en VE de eucariotas, proteínas utilizadas para diagnóstico y proteínas hipotéticas específicas de cestodos. Además, se encontró que las VE de cestodos transportan ARNs pequeños, principalmente microRNAs y secuencias derivadas de ARNt y de ARNr, y se observó la presencia de ARNs del hospedero en el fluido interno de los parásitos. Mediante ensayos de co-incubación se determinó que las VE de origen parasitario pueden ser internalizadas por células de hospedero representativas del sitio de infección. Por último, se predijeron transcriptos blanco de microRNAs en el hospedero in silico y se evaluaron cambios en el perfil de expresión post-incubación con VE. Los resultados de esta tesis contribuyen al entendimiento de la relación parásito-hospedero y a la búsqueda racional de marcadores diagnósticos y/o terapéuticos.
Cestodes are parasitic flatworms that produce severe infections relevant for human and animal health, such as echinococosis and cysticercosis, caused by the larval stages of Echinococcus spp. and Taenia solium, respectively. This thesis aimed to analyse the secretion of extracellular vesicles (EV) in cestodes as a mean of parasite-host communication pathway. First, we evaluated and quantified EV secretion in larval stages from Echinococcus spp. We observed that larval stage morphological characteristics can determine EV secretion toward the extra-parasite milieu. Then, we characterized cestode EV content and identified aukaryotic EV-enriched proteins, antigenic proteins used for cestode disease diagnosis and cestode-specific hypothetical proteins. In addition, we showed that cestode EV carry small RNAs, mainly microRNAs and rRNA- and tRNA-derived sequences, and that host RNA could be detected in parasite internal fluid. Next, we performed a co-incubation assay with host cells related to the infection site and observed internalization of parasite EV. Finally, we identified microRNA target transcripts in host by in silico analysis and evaluated expression profile changes after incubation with parasite EV. In summary, results from this thesis contribute to understanding parasite-host interplay and provide useful information for rational research of diagnostic and/or therapeutic biomarkers.
Fil: Ancarola, María Eugenia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.