Estudio de la familia génica Asr de tomate (Lycopersicon esculentum)

• Autores: Maskin, Laura
• Año de publicación: 2003
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Iusem, Norberto Daniel
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

En este trabajo se estudiaron los miembros de la familia génica Asr detomate (Asr1, Asr2 y Asr3). Por métodos computacionales se compararon las secuencias aminoacídicasde las proteinas codificadas y se realizó una búsqueda de proteinas homólogas quereveló la existencia de moléculas proteicas conservadas que se acumulan ensituaciones de variados tipos de estrés y/o en fruto. La comparación de todas estasproteínas "tipo ASR", provenientes de muy distintas especies, mostró que lahomología se encuentra concentrada en dos dominios particulares. Además, todascomparten caracteristicas estructurales como la alta hidrofilicidad,alta carga, sitiosconservados de miristoilación y dos regiones hidrofóbicas. Por otro lado, se evaluó la expresión de cada uno de los miembrosconocidos de esta familia génica en tomate (L. esculentum), determinándose queposeen un nivel de expresión variable en condiciones basales en los órganosanalizados y que se inducen diferencialmente en respuesta al estrés hídrico, aldaño, al frio y durante la maduración del fruto. Se observó que la expresión basal de Asr1 y Asr2 en hoja se limitaespecificamente a células acompañantes del floema. En condiciones de falta deagua, la expresión en hoja y en raíz se visualiza también en las célulasparenquimáticas adyacentes. Se muestran evidencias de que ASR forma agregados in vitro (dímeros ytrímeros). Finalmente, ensayos preliminares de expresión en sistemas heterólogosdemuestran que ASR1 provoca un aumento de la viabilidad de levaduras sometidasa estrés salino.
This work reports the study of the members of the tomato Asr gene family (Asr1, Asr2 and Asr3). Using computational methods, the amino acidic sequences were compared. A search of homologous proteins reveled the presence of conserved molecules thataccumulate in responses to various types of stress and/or in fruit. Comparison of allthese ASR-like proteins from different plant species showed that homology isconcentrated at two particular domains. Besides, all of them share structuralfeatures like high hydrophilicity, high charge, a conserved myristoylation signal andtwo hydrophobic zones. In addition, the expression of each known member of the Asr family in tomato (L. esculentum) were evaluated. The results showed variable basal expression levelin all the analyzed organs and differential induction in response to water stress,wounding, cold and during fruit ripening. In leaves, Asr1 and Asr2 basal expression was restricted to the companionphloem cells. Under water deficit conditions, this expression was also visualized inleaf and root parenchyma adjacent cells. Evidences that ASR form aggregates in vitro (dimers and trimers) are shown. Finally, preliminar assays in heterologous expression systems showed that ASR1 causes an increment in viability of yeast subjeted to salt stressed.
Fil: Maskin, Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.