Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli

Autores
Yep Rodríguez, Alejandra
Año de publicación
2004
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
tesis doctoral
Estado
versión publicada
Colaborador/a o director/a de tesis
Preiss, Jack
Goldbaum, Fernando
Descripción
La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana.
Fil: Yep Rodríguez, Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.
Materia
GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLGA
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
GT-B
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar
Repositorio
Biblioteca Digital (UBA-FCEN)
Institución
Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
OAI Identificador
tesis:tesis_n3769_YepRodriguez
Acceder
id BDUBAFCEN_8c5d385ae5112ca8160a264eb997561a
oai_identifier_str tesis:tesis_n3769_YepRodriguez
network_acronym_str BDUBAFCEN
repository_id_str 1896
network_name_str Biblioteca Digital (UBA-FCEN)
spelling Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coliStructure-function relationships in the Escherichia coli glycogen synthaseYep Rodríguez, AlejandraGLUCOGENOGLUCOGENO SINTETASAGLGAGLICOSILTRANSFERASAALMIDONGT-BGLYCOGENGLYCOGEN SYNTHASEGLGAGLYCOSYLTRANSFERASESTARCHGT-BLa glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana.Fil: Yep Rodríguez, Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y NaturalesPreiss, JackGoldbaum, Fernando2004info:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_db06info:ar-repo/semantics/tesisDoctoralapplication/pdfhttps://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguezspainfo:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/arreponame:Biblioteca Digital (UBA-FCEN)instname:Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturalesinstacron:UBA-FCEN2025-09-04T09:48:13Ztesis:tesis_n3769_YepRodriguezInstitucionalhttps://digital.bl.fcen.uba.ar/Universidad públicaNo correspondehttps://digital.bl.fcen.uba.ar/cgi-bin/oaiserver.cgiana@bl.fcen.uba.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:18962025-09-04 09:48:15.099Biblioteca Digital (UBA-FCEN) - Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturalesfalse
dc.title.none.fl_str_mv Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
Structure-function relationships in the Escherichia coli glycogen synthase
title Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
spellingShingle Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
Yep Rodríguez, Alejandra
GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLGA
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
GT-B
title_short Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_full Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_fullStr Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_full_unstemmed Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_sort Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
dc.creator.none.fl_str_mv Yep Rodríguez, Alejandra
author Yep Rodríguez, Alejandra
author_facet Yep Rodríguez, Alejandra
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Preiss, Jack
Goldbaum, Fernando
dc.subject.none.fl_str_mv GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLGA
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
GT-B
topic GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLGA
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
GT-B
dc.description.none.fl_txt_mv La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana.
Fil: Yep Rodríguez, Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.
description La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana.
publishDate 2004
dc.date.none.fl_str_mv 2004
dc.type.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
http://purl.org/coar/resource_type/c_db06
info:ar-repo/semantics/tesisDoctoral
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.none.fl_str_mv https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez
url https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez
dc.language.none.fl_str_mv spa
language spa
dc.rights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar
eu_rights_str_mv openAccess
rights_invalid_str_mv https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
publisher.none.fl_str_mv Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital (UBA-FCEN)
instname:Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
instacron:UBA-FCEN
reponame_str Biblioteca Digital (UBA-FCEN)
collection Biblioteca Digital (UBA-FCEN)
instname_str Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
instacron_str UBA-FCEN
institution UBA-FCEN
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital (UBA-FCEN) - Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
repository.mail.fl_str_mv ana@bl.fcen.uba.ar
_version_ 1842340697750896640
score 12.623145

Publicaciones similares