Síndrome de Sjögren : relevancia del sistema VIP/VPAC en el mantenimiento y pérdida de la homeostasis tisular

• Autores: Hauk, Vanesa Cintia
• Año de publicación: 2015
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Pérez Leirós, Claudia
• Materia: SINDROME DE SJÖGREN; HOMEOSTASIS GLANDULAR; PEPTIDO INTESTINAL VASOACTIVO; MACROFAGOS REGULATORIOS; FAGOCITOSIS; CELULAS EPITELIALES DE GLANDULA SUBMAXILAR; SJÖGREN SYNDROME; GLAND HOMEOSTASIS; VASOACTIVE INTESTINAL PEPTIDE; REGULATORY MACROPHAGES; PHAGOCYTOSIS; GLANDULAR EPITHELIAL CELLS
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

El Síndrome de Sjögren (SS) es una enfermedad autoinmune crónica que se caracteriza por una progresiva disfunción secretoria con escasa correlación con el daño tisular en las glándulas. No hay evidencias claras sobre su patogenia y el tratamiento es sintomático con un alivio meramente marginal. Se ha propuesto que previo al ataque autoinmune hay una pérdida en el equilibrio homeostático de las glándulas con activación de células acinares que podrían aumentar la susceptibilidad del tejido a una respuesta autoinmune. Los ratones diabéticos no obesos (NOD) son un modelo muy interesante para estudiar el SS ya que desarrollan una disfunción secretoria conpérdida de temprana de la homeostasis glandular con una moderada infiltración linfocitaria. Los macrófagos son células plásticas que tienen un papel central en elmantenimiento de la homeostasis tisular por su función fagocítica para la remoción deproductos de degradación y células apoptóticas, función que realizan en forma ‘silenciosa’ y rápida evitando una respuesta inflamatoria deletérea. El péptido intestinal vasoactivo (VIP) es un neurotransmisor autonómico pro‐secretorio y vasodilatador, que tiene efecto trófico sobre acinos y, junto a sus receptores VPAC, se localiza en células inmunes con un marcado efecto anti‐inflamatorio einmunomodulador. Basados en los efectos pro‐secretorios y tróficos del VIP sobre los acinos como de suspropiedades anti‐inflamatorias hipotetizamos que la liberación local de VIP por diversos tipos celulares podría modular procesos apoptóticos e inflamatorios en la interacción de células inmunes con células epiteliales contribuyendo al mantenimientode la homeostasis tisular glandular. Asimismo, hipotetizamos que estos mecanismos modulados por VIP se verían alterados en condiciones de ruptura de la homeostasis tisular. En este trabajo en primer lugar se estudio el papel del VIP en el mantenimiento de lahomeostasis glandular en el modelo murino NOD. Se observo que hay una disminuciónen la expresión de VIP en las glándulas salivales de ratones NOD que no se observa enla cepa control. La pérdida en la expresión del VIP endógeno se ve asociada con lapérdida de células acinares. Por otro lado, el ‘clearance’ de acinos apoptóticos pormacrófagos se encuentra desregulado en los macrófagos NOD. Sin embargo durante elproceso fagocítico dichos macrófagos adquieren un perfil alternativo de activación. Finalmente, se analizó la contribución del sistema VIP/VPAC en un modelo in vitro deco‐cultivo de células mononucleares totales o monocitos de pacientes con síndrome de Sjögren y células epiteliales de glándula submaxilar (HSG). En primer lugarcaracterizamos el sistema VIP/VPAC en monocitos y su capacidad fagocítica de células HSG apoptóticas donde observamos que los monocitos de pacientes con SS presentan incrementada la expresión del receptor VPAC2 ausente en los monocitos controles y sucapacidad fagocítica se ve alterada. No solo fagocitan en menor cantidad sino queadquieren un perfil fenotípico inflamatorio que no puede ser modulado por VIP. En losco‐cultivos se estudió el perfil funcional y fenotípico de ambos tipos celulares luego dela interacción. Nuestros resultados indican que la interacción puede modular tanto alas células epiteliales como a los monocitos contribuyendo a la generación de unmicroambiente proinflamatorio, donde el VIP fue capaz de modular parcialmente dicho microambiente.
Sjögren’s Syndrome (SS) is a chronic autoimmune disease characterized by a deepsecretory dysfunction that correlates poorly with moderate gland damage. SSpathogenesis is still not clearly elucidated and the treatment is symptomatic. It hasbeen proposed that homeostatic loss and acinar activation in the glands precedes theautoimmune response. Non obese diabetic mice (NOD) are a suitable model to study SS since they develop secretory dysfunction with early gland homeostasis loss and a moderate mononuclear infiltration of submandibular glands. Macrophages are plasticcells with a central role in tissue homeostasis maintenance due to their phagocyticfunction to ‘silently’ and rapidly remove apoptotic cells to prevent an inflammatorydeleterious response. Vasoactive intestinal peptide (VIP) is an autonomicneurotransmitter with secretory and vasodilator effects that exerts trophic effects onacini and, along with its VPAC receptors, localizes in immune cells with a strong anti‐inflammatory and immunomodulatory effect. Based on the pro‐secretory and trophic activities of VIP on acini as well as its anti‐inflammatory effect we hypothesized that the local release of VIP by various cell typescould modulate inflammatory and apoptotic processes at the immune‐epithelial cellinteraction contributing to tissue homeostasis maintenance. We hypothesized thatthese VIP‐modulated mechanisms could be altered in homeostasis loss conditions. In this work we first studied the role of VIP in gland homeostasis maintenance in the NOD model. We observed a reduced expression of VIP in salivary glands of NOD micecompared with control mice. The loss of VIP expression was associated with reducednumber of acini. Moreover, apoptotic cell clearance by NOD macrophages wasdefective but the cells acquired an alternative activation profile after phagocytosis. Finally, the contribution of VIP/VPAC system in an in vitro model of immune‐epithelialinteraction was assessed. We co‐cultured PBMC or monocytes from individual SSpatients or control subjects with epithelial cells from a human salivary gland (HSG line). First, we characterized VIP/VPAC system in monocytes and phagocytosis of HSGapoptotic epitelial cells. An increased expression of VPAC2 and reduced phagocytosisof apoptotic cells was found only in SS monocytes. These monocytes also failed toexpress an anti‐inflammatory response upon phagocytosis of apoptotic cells. Thefunctional and phenotypic profile of both epithelial cell and monocytes uponinteraction was then studied. Our results indicate that the interaction can modulateboth epithelial cells and monocytes contributing to the generation of a pro‐inflammatory microenvironment where VIP could only partially modulate these signals.
Fil: Hauk, Vanesa Cintia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.