Desarrollo, caracterización y producción a escala piloto de agonistas de la respuesta inmune innata de uso potencial como adyuvantes
- Autores
- Hiriart, Yanina
- Año de publicación
- 2013
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- tesis doctoral
- Estado
- versión aceptada
- Colaborador/a o director/a de tesis
- Rumbo, Martín
- Descripción
- Se seleccionó flagelina de Salmonella Typhimurium como agonista modelo para comenzar a trabajar, por sus cualidades como adyuvante y otras potenciales aplicaciones. A fin de optimizar un protocolo que permitiese un cambio de escala en la producción de flagelina se evaluaron distintas condiciones de cultivo de Salmonella y distintas condiciones de manipulación del cultivo post-cosecha tendientes a maximizar la cantidad de flagelo recuperado. Para mejorar la purificación de flagelina se incorporó al protocolo de producción un paso de cromatografía de afinidad utilizando anticuerpos monoclonales anti-flagelina. Las características de algunos de los monoclonales obtenidos permitieron su aplicación en un ensayo de aglutinación para la detección de S. Typhimurium. Se generó una molécula novedosa con potencial capacidad adyuvante, a partir de una proteína de fusión entre la flagelina de S. Typhimurium y la lumazina sintasa de Brucella spp. (BLS). La quimera FliC-BLS fue caracterizada estructural y biológicamente para evaluar su capacidad como agonista dual TLR-4/TLR-5. La estructura decamérica de BLS permite presentar diferentes antígenos repetidamente, lo cual induce una fuerte respuesta inmune. Esta cualidad sumada a la presencia de 2 agonistas TLR en la misma molécula postulan a FliC-BLS como un novedoso inmunoestimulador, conjugando las propiedades de flagelina como adyuvante y de BLS como plataforma vacunal
Doctor en Ciencias Exactas, área Ciencias Biológicas
Universidad Nacional de La Plata
Facultad de Ciencias Exactas - Materia
-
Ciencias Exactas
Biología
inmunidad innata
flagelina
Salmonella typhimurium
Adyuvantes Inmunológicos
plataforma vacunal
adyuvantes - Nivel de accesibilidad
- acceso abierto
- Condiciones de uso
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- Institución
- Universidad Nacional de La Plata
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Se seleccionó flagelina de Salmonella Typhimurium como agonista modelo para comenzar a trabajar, por sus cualidades como adyuvante y otras potenciales aplicaciones. A fin de optimizar un protocolo que permitiese un cambio de escala en la producción de flagelina se evaluaron distintas condiciones de cultivo de Salmonella y distintas condiciones de manipulación del cultivo post-cosecha tendientes a maximizar la cantidad de flagelo recuperado. Para mejorar la purificación de flagelina se incorporó al protocolo de producción un paso de cromatografía de afinidad utilizando anticuerpos monoclonales anti-flagelina. Las características de algunos de los monoclonales obtenidos permitieron su aplicación en un ensayo de aglutinación para la detección de S. Typhimurium. Se generó una molécula novedosa con potencial capacidad adyuvante, a partir de una proteína de fusión entre la flagelina de S. Typhimurium y la lumazina sintasa de Brucella spp. (BLS). La quimera FliC-BLS fue caracterizada estructural y biológicamente para evaluar su capacidad como agonista dual TLR-4/TLR-5. La estructura decamérica de BLS permite presentar diferentes antígenos repetidamente, lo cual induce una fuerte respuesta inmune. Esta cualidad sumada a la presencia de 2 agonistas TLR en la misma molécula postulan a FliC-BLS como un novedoso inmunoestimulador, conjugando las propiedades de flagelina como adyuvante y de BLS como plataforma vacunal |
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