Aprovechamiento de cascara de huevo como fuente de biomateriales para la regeneración ósea

Autores
Vega, Jazmín
Año de publicación
2024
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Las cáscaras de huevo constituyen un residuo domiciliario e industrial interesante parasu reaprovechamiento como fuente de colágeno e hidroxiapatita para el desarrollo debiomateriales para la regeneración ósea. El objetivo global del trabajo es obtenercolágeno de tipo 1 para emplearlo como adhesivo natural para mejorar la interaccióncelular con una matriz porosa de quitosano-carboxi metil celulosa, desarrolladapreviamente. En esta primera parte, el objetivo es el aislamiento y caracterización decolágeno tipo 1 a partir de la membrana de la cáscara de huevo.El colágeno fue obtenido a partir de la hidrólisis de las membranas de huevo en0,5%v/v ácido acético a 25°C, bajo agitación a 500rpm durante 10 días. El hidrolizadose filtró y el colágeno se precipitó agregando de sulfato de amonio o cloruro de sodiocon posterior reposo por 24h, luego de lo cual se centrifugó a 10000g. El precipitadose lavó con agua destilada y resuspendió en 0,5M de ácido acético. Las pruebas decaracterización realizadas fueron: contenido total de proteínas por el método deBradford; contenido de colágeno empleando el método de Sirius red; espectroscopíainfrarroja por transformadas de Fourier (FTIR), espectroscopía UV-visible y porelectroforesis en tiras de acetato de celulosa. Se realizaron dos aislamientosindependientes empleando sulfato de amonio (M1) o cloruro de sodio (M2) comoprecipitante. El contenido total de proteínas para M1 fue de 1893 + 64 mg/ml; mientrasque para M2 fue de 1171 + 31 mg/ml. El contenido total de colágeno por muestra fuede 713 + 87 ug/ml para M1 y de 266 + 17 ug/ml para M2. El rendimiento promedioobtenido en la precipitación con sulfato de amonio fue de 22%, mientras queempleando cloruro de sodio fue de 7%. Los espectros UV-visible para las muestraspresentaron una banda de absorción a 273nm. La pureza y estabilidad de la muestrafue estudiada empleando electroforesis en acetato de celulosa, y la identidad porFTIR.En conclusión, nuestros resultados muestran que se pudo obtener, de manera sencilla,colágeno de tipo 1 a partir de membrana óvea. Seleccionamos como método deobtención la purificación con sulfato de amonio por presentar mejores rendimientoscon igual pureza y estabilidad, obteniéndose colágeno de características adecuadaspara la aplicación propuesta. En un futuro se adicionará el colágeno sobre las matricespara evaluar si efectivamente mejora las propiedades de biocompatibilidad de lasmatrices previamente sintetizadas.
Carrera: Licenciatura en Bioquímica Lugar de trabajo: Laboratorio de Investigaciones en Osteopatias y Metabolismo Mineral (LIOMM) Organismo: PBA Año de inicio de beca: 2023 Año de finalización de beca: 2025 Apellido, Nombre del Director/a/e: Molinuevo , María Silvina Lugar de desarrollo: Laboratorio de Investigaciones en Osteopatias y Metabolismo Mineral (LIOMM) Áreas de conocimiento: Bioquímica, Genética y Biología Molecular Tipo de investigación: Básica
Facultad de Ciencias Exactas
Materia
Bioquímica, Genética y Biología Molecular
cascara de huevo
biomateriales
regeneración ósea
aislamiento
caracterización
eggshell
biomaterials
bone regeneration
isolation
characterization
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
Repositorio
SEDICI (UNLP)
Institución
Universidad Nacional de La Plata
OAI Identificador
oai:sedici.unlp.edu.ar:10915/173431

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Carrera: Licenciatura en Bioquímica Lugar de trabajo: Laboratorio de Investigaciones en Osteopatias y Metabolismo Mineral (LIOMM) Organismo: PBA Año de inicio de beca: 2023 Año de finalización de beca: 2025 Apellido, Nombre del Director/a/e: Molinuevo , María Silvina Lugar de desarrollo: Laboratorio de Investigaciones en Osteopatias y Metabolismo Mineral (LIOMM) Áreas de conocimiento: Bioquímica, Genética y Biología Molecular Tipo de investigación: Básica
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description Las cáscaras de huevo constituyen un residuo domiciliario e industrial interesante parasu reaprovechamiento como fuente de colágeno e hidroxiapatita para el desarrollo debiomateriales para la regeneración ósea. El objetivo global del trabajo es obtenercolágeno de tipo 1 para emplearlo como adhesivo natural para mejorar la interaccióncelular con una matriz porosa de quitosano-carboxi metil celulosa, desarrolladapreviamente. En esta primera parte, el objetivo es el aislamiento y caracterización decolágeno tipo 1 a partir de la membrana de la cáscara de huevo.El colágeno fue obtenido a partir de la hidrólisis de las membranas de huevo en0,5%v/v ácido acético a 25°C, bajo agitación a 500rpm durante 10 días. El hidrolizadose filtró y el colágeno se precipitó agregando de sulfato de amonio o cloruro de sodiocon posterior reposo por 24h, luego de lo cual se centrifugó a 10000g. El precipitadose lavó con agua destilada y resuspendió en 0,5M de ácido acético. Las pruebas decaracterización realizadas fueron: contenido total de proteínas por el método deBradford; contenido de colágeno empleando el método de Sirius red; espectroscopíainfrarroja por transformadas de Fourier (FTIR), espectroscopía UV-visible y porelectroforesis en tiras de acetato de celulosa. Se realizaron dos aislamientosindependientes empleando sulfato de amonio (M1) o cloruro de sodio (M2) comoprecipitante. El contenido total de proteínas para M1 fue de 1893 + 64 mg/ml; mientrasque para M2 fue de 1171 + 31 mg/ml. El contenido total de colágeno por muestra fuede 713 + 87 ug/ml para M1 y de 266 + 17 ug/ml para M2. El rendimiento promedioobtenido en la precipitación con sulfato de amonio fue de 22%, mientras queempleando cloruro de sodio fue de 7%. Los espectros UV-visible para las muestraspresentaron una banda de absorción a 273nm. La pureza y estabilidad de la muestrafue estudiada empleando electroforesis en acetato de celulosa, y la identidad porFTIR.En conclusión, nuestros resultados muestran que se pudo obtener, de manera sencilla,colágeno de tipo 1 a partir de membrana óvea. Seleccionamos como método deobtención la purificación con sulfato de amonio por presentar mejores rendimientoscon igual pureza y estabilidad, obteniéndose colágeno de características adecuadaspara la aplicación propuesta. En un futuro se adicionará el colágeno sobre las matricespara evaluar si efectivamente mejora las propiedades de biocompatibilidad de lasmatrices previamente sintetizadas.
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