Estudio cinético de la reacción de hidrólisis de lecitina de soja pura en polvo con fosfolipasa A<SUB>2</SUB> inmovilizada

• Autores: Maroto, Beatriz G.; Camusso, C.; Zaritzky, Noemí E.
• Año de publicación: 2001
• Idioma: inglés
• Tipo de recurso: artículo
• Materia: Química; Química; enzima inmovilizada; fosfolipasa A2; hidrólisis enzimática; lecitina de soja; soybean lecithin; A2 phospholipase enzyme; enzymatic hydrolysis; immobilized enzymes
• Institución: Universidad Nacional de La Plata

La enzima fosfolipasa A₂ inmovilizada promueve la reacción hidrolítica de lecitina de soja pura en polvo liberando un mol de ácido graso de la posición C-2. El principal propósito de este trabajo fue determinar los parámetros cinéticos de la reacción cuando la enzima fue adsorbida sobre alúmina o sobre DEAE-sephadex. Las mejores condiciones para la reacción son: temperatura 45-48ºC: concentración de iones Ca 6mM y pH 8,65. Las concentraciones de sustrato ensayadas fueron 6,3; 12,7; 19 y 25 mM trabajando en un reactor tipo batch y con la enzima inmovilizada. El tiempo de incubación no modificó la actividad enzimática. La actividad hidrolítica de fosfolipasa A₂ adsorbida sobre alúmina o sobre sephadex fue menor que la de la enzima soluble porque las propiedades intrínsecas de la enzima se modificaron con la inmovilización. Para concentraciones de sustrato entre 6 y 19 mM las constantes de velocidad para cinética de 1er orden fueron k = 9,88.10^-2 min^-1 para enzima inmovilizada sobre alúmina y k = 1,766.10^-1 min^-1 para enzima inmovilizada sobre DEAEsephadex. Para los mismos soportes, pero a mayores concentraciones de sustrato (25mM) las constantes de velocidad para cinética de orden cero fueron k = 1,62.10^-3 mol.l^-1min^-1 (alúmina) y k = 3,58. 10^-3 mol.l^-1 min^-1 (DEAE-sephadex).
Immobilized A₂ phospholipase enzyme promotes the hydrolytic reaction of pure powder soybean lecithin releasing a mole of fatty acid from C-2 position. The main purpose of this paper was to determine the kinetic parameters of this reaction when the enzyme was adsorbed on alumina or DEAE-sephadex. The best conditions for the reaction were: temperature: 45-48°C, Ca ions concentration: 6mM, pH: 8,65. Tested conditions for substrate concentration were: 6,3; 12,7; 19 and 25 mM working in a batch type reactor and with the immobilized enzyme. The incubating time did not change the enzymatic activity. The hydrolytic activity of alumina or DEAE-sephadex adsorbed A₂ phospholipase enzyme was lower than of the soluble enzyme because the intrinsic properties are modified by immobilization. For substrate concentrations ranging between 6 and 19 mM first order kinetic velocity constants were k = 9, 88. 10^-2 min^-1 and k = 1,766. 10^-1 min^-1 for alumina and DEAEsephadex respectively. For the same supports but at higher substrate concentration (25mM) the zero order kinetic velocity constants were k= 1,62. 10^-3 mol.l^-1. min^-1 (alumina) and k = 3,58. 10^-3 mol.l^–1.min^-1 (DEAE-sephadex).
Facultad de Ciencias Exactas