Optimización del medio de cultivo para la multiplicación y elongación in vitro de portainjertos de duraznero: enfoque basado en el Diseño y Optimización de Experimentos

Autores
Soria, Florencia Elizabeth; Valentini, Gabriel Hugo; Sanchez, Gerardo
Año de publicación
2023
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Poster
La utilización de brotes in vitro como fuente de explantos puede facilitar el desarrollo de protocolos eficientes y reproducibles de transformación genética en portainjertos de duraznero (Prunus persica). Sin embargo, las especies del género Prunus se caracterizan por ser recalcitrantes al cultivo in vitro. En este sentido, la estrategia de Diseño y Optimización de Experimentos (DOE) podría resultar en una herramienta útil para determinar cómo influyen e interactúan los factores relacionados a la composición del medio de cultivo sobre las variables respuestas asociadas a eficiencia de la inducción de brotes a partir de segmentos nodales y establecer las formulaciones de medios de cultivos que maximicen la multiplicación y elongación in vitro de portainjertos de duraznero. En este trabajo se estudió el efecto de seis factores y sus interacciones en un diseño de Screening full factorial a dos niveles con ocho bloques (n tratamientos = 26 = 64) sobre siete variables respuesta. Para ello, se establecieron in vitro segmentos nodales de ocho portainjertos (= bloques) provenientes de nuestra colección de germoplasma, en medio WPM suplementado con 30 g/L de sacarosa y pH 5,7 a 24 ± 1 °C y un fotoperiodo de 16 h luz bajo mediasombra por dos semanas. Aquellos explantos que no presentaron contaminación, se transfirieron a los medios definitivos de los tratamientos, cuyas unidades experimentales quedaron definidas por 21 explantos. Los factores estudiados fueron: medio basal (WPM y ¾ MS), fuente de carbono (glucosa y sacarosa a 30 g/L), pH (5,2 y 5,8), tipo de citoquinina (4,44 µmol/L BAP y 2,46 µmol/L 2iP), tipo de auxina (2,85 µmol/L IAA y 0,25 µmol/L IBA) y suplementación con ácido giberélico (presencia o ausencia de 1,44 µmol/L GA3). Las unidades experimentales fueron mantenidas a 24 ± 1 °C con un fotoperiodo de 16 h luz. Al cabo de cuatro y ocho semanas de iniciado el ensayo se registraron los datos de las variables respuestas: % de brotación, longitud brote, número de brotes/explanto inicial, vigor (escala cualitativa: 0, 25, 50, 75 y 100), número de hojas/brote, % hojas cloróticas y % hojas necróticas. El análisis de los datos permitió identificar factores principales e interactivos con efecto estadísticamente significativo (p< 0,05) y modelos predictivos para cada variable respuesta (modelos parciales). Asimismo, se probó la eficiencia del DOE para obtener medios de cultivo cuya composición maximizan la propagación y elongación de brotes in vitro de portainjertos de duraznero como fuente de explantos para futuros desarrollos biotecnológicos.
EEA San Pedro
Fil: Soria, Florencia Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; Argentina
Fil: Valentini, Gabriel Hugo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; Argentina
Fil: Sánchez, Gerardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; Argentina
Fuente
XIV Simposio REDBIO Argentina. Biotecnología para un mundo en cambio. Ciudad Autónoma de Buenos Aires. 28 al 30 de junio 2023.
Materia
Prunus persica
Frutales
Cultivo in Vitro
Diseño Experimental
Propagación de Plantas
Medio de Cultivo
Portainjertos
Explantes
Biotecnología
Durazno
Fruit Crops
In Vitro Culture
Experimental Design
Plant Propagation
Culture Media
Rootstocks
Explants
Biotechnology
Peaches
Diseño y Optimizacion de Experimentos
Experimental Design and Optimization
Nivel de accesibilidad
acceso restringido
Condiciones de uso
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
Repositorio
INTA Digital (INTA)
Institución
Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria
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En este sentido, la estrategia de Diseño y Optimización de Experimentos (DOE) podría resultar en una herramienta útil para determinar cómo influyen e interactúan los factores relacionados a la composición del medio de cultivo sobre las variables respuestas asociadas a eficiencia de la inducción de brotes a partir de segmentos nodales y establecer las formulaciones de medios de cultivos que maximicen la multiplicación y elongación in vitro de portainjertos de duraznero. En este trabajo se estudió el efecto de seis factores y sus interacciones en un diseño de Screening full factorial a dos niveles con ocho bloques (n tratamientos = 26 = 64) sobre siete variables respuesta. Para ello, se establecieron in vitro segmentos nodales de ocho portainjertos (= bloques) provenientes de nuestra colección de germoplasma, en medio WPM suplementado con 30 g/L de sacarosa y pH 5,7 a 24 ± 1 °C y un fotoperiodo de 16 h luz bajo mediasombra por dos semanas. 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El análisis de los datos permitió identificar factores principales e interactivos con efecto estadísticamente significativo (p< 0,05) y modelos predictivos para cada variable respuesta (modelos parciales). Asimismo, se probó la eficiencia del DOE para obtener medios de cultivo cuya composición maximizan la propagación y elongación de brotes in vitro de portainjertos de duraznero como fuente de explantos para futuros desarrollos biotecnológicos.EEA San PedroFil: Soria, Florencia Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; ArgentinaFil: Valentini, Gabriel Hugo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; ArgentinaFil: Sánchez, Gerardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). 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La utilización de brotes in vitro como fuente de explantos puede facilitar el desarrollo de protocolos eficientes y reproducibles de transformación genética en portainjertos de duraznero (Prunus persica). Sin embargo, las especies del género Prunus se caracterizan por ser recalcitrantes al cultivo in vitro. En este sentido, la estrategia de Diseño y Optimización de Experimentos (DOE) podría resultar en una herramienta útil para determinar cómo influyen e interactúan los factores relacionados a la composición del medio de cultivo sobre las variables respuestas asociadas a eficiencia de la inducción de brotes a partir de segmentos nodales y establecer las formulaciones de medios de cultivos que maximicen la multiplicación y elongación in vitro de portainjertos de duraznero. En este trabajo se estudió el efecto de seis factores y sus interacciones en un diseño de Screening full factorial a dos niveles con ocho bloques (n tratamientos = 26 = 64) sobre siete variables respuesta. Para ello, se establecieron in vitro segmentos nodales de ocho portainjertos (= bloques) provenientes de nuestra colección de germoplasma, en medio WPM suplementado con 30 g/L de sacarosa y pH 5,7 a 24 ± 1 °C y un fotoperiodo de 16 h luz bajo mediasombra por dos semanas. Aquellos explantos que no presentaron contaminación, se transfirieron a los medios definitivos de los tratamientos, cuyas unidades experimentales quedaron definidas por 21 explantos. Los factores estudiados fueron: medio basal (WPM y ¾ MS), fuente de carbono (glucosa y sacarosa a 30 g/L), pH (5,2 y 5,8), tipo de citoquinina (4,44 µmol/L BAP y 2,46 µmol/L 2iP), tipo de auxina (2,85 µmol/L IAA y 0,25 µmol/L IBA) y suplementación con ácido giberélico (presencia o ausencia de 1,44 µmol/L GA3). Las unidades experimentales fueron mantenidas a 24 ± 1 °C con un fotoperiodo de 16 h luz. Al cabo de cuatro y ocho semanas de iniciado el ensayo se registraron los datos de las variables respuestas: % de brotación, longitud brote, número de brotes/explanto inicial, vigor (escala cualitativa: 0, 25, 50, 75 y 100), número de hojas/brote, % hojas cloróticas y % hojas necróticas. El análisis de los datos permitió identificar factores principales e interactivos con efecto estadísticamente significativo (p< 0,05) y modelos predictivos para cada variable respuesta (modelos parciales). Asimismo, se probó la eficiencia del DOE para obtener medios de cultivo cuya composición maximizan la propagación y elongación de brotes in vitro de portainjertos de duraznero como fuente de explantos para futuros desarrollos biotecnológicos.
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