Expresión de interferón lambda en células de neuroblastoma humano SH-SY5Y infectadas con BoHV-1 o BoHV-55

Autores
Rosales Hurtado, Juan José; Burucúa, Mercedes María; Marin, Maia Solange; Nieto Farías, María Victoria; Perez, Sandra
Año de publicación
2022
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Los interferones (IFN) son componentes del sistema inmunológico innato con un papel predominante en la respuesta inicial a las infecciones virales. Los IFN de tipo I (IFN-α / β) fueron reconocidos como la primera barrera inmunológica tras la infección por un virus. En 2003, los IFN de tipo III (IFN-λ), se describieron como mecanismos antivirales adicionales de la inmunidad innata, induciendo un estado antiviral en las células. Los alfaherpesvirus bovinos (BoHV) tipo 1 y 5 son neuroinvasivos. El BoHV-5 es el agente causal de meningoencefalitis necrotizante en terneros, mientras el BoHV-1 solo ocasionalmente se asocia con cuadros neurológicos. El objetivo de este estudio fue determinar y comparar los niveles de expresión del IFNλ en células de neuroblastoma humano SH-SY5Y infectados experimentalmente con BoHV-1 o 5. Materiales y métodos: Las células SH-SY5Y se sembraron en botellas T25 con medio D-MEM, F-12 y 10 % de suero fetal bovino, las células se infectaron con una moi=1, para este estudio se utilizaron las cepas LA, Cooper (BoHV-1), 97/613 (BoHV5) y A663 recombinante natural. Se tomaron como horario de infección 6 h y 24 h. El ARN se extrajo con Trizol y cuantificado con Nanodrop. El ADN genómico se digirió con DNase I, el ARN se transcribió a cDNA y la expresión del gen IFNλ3 se cuantificó con la técnica RT-qPCR. Las infecciones con BoHV-1 se expresaron 6 veces más que el control a las 6 h y el BoHV-5 no tuvo diferencias con el control, pero a las 24 h la expresión de las diferentes cepas disminuyó significativamente con respecto al horario anterior. Según lo descrito en la bibliografía los IFN-λ son homólogos a la IL-10 con actividad antiinflamatoria, las infecciones de BoHV-1 expresar mayor cantidad de IFN-λ en comparación con BoHV-5, disminuyendo los casos de meningoencefalitis en BoHV-1 y siendo más persistentes en infecciones con BoHV-5.
Fil: Rosales Hurtado, Juan José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina
Fil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina
Fil: Nieto Farías, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
XIII Jornadas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria y I Reunión de la Red Latinoamericana de Inmunología Veterinaria
General Pico
Argentina
Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria
Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Veterinarias
Materia
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acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
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El BoHV-5 es el agente causal de meningoencefalitis necrotizante en terneros, mientras el BoHV-1 solo ocasionalmente se asocia con cuadros neurológicos. El objetivo de este estudio fue determinar y comparar los niveles de expresión del IFNλ en células de neuroblastoma humano SH-SY5Y infectados experimentalmente con BoHV-1 o 5. Materiales y métodos: Las células SH-SY5Y se sembraron en botellas T25 con medio D-MEM, F-12 y 10 % de suero fetal bovino, las células se infectaron con una moi=1, para este estudio se utilizaron las cepas LA, Cooper (BoHV-1), 97/613 (BoHV5) y A663 recombinante natural. Se tomaron como horario de infección 6 h y 24 h. El ARN se extrajo con Trizol y cuantificado con Nanodrop. El ADN genómico se digirió con DNase I, el ARN se transcribió a cDNA y la expresión del gen IFNλ3 se cuantificó con la técnica RT-qPCR. Las infecciones con BoHV-1 se expresaron 6 veces más que el control a las 6 h y el BoHV-5 no tuvo diferencias con el control, pero a las 24 h la expresión de las diferentes cepas disminuyó significativamente con respecto al horario anterior. Según lo descrito en la bibliografía los IFN-λ son homólogos a la IL-10 con actividad antiinflamatoria, las infecciones de BoHV-1 expresar mayor cantidad de IFN-λ en comparación con BoHV-5, disminuyendo los casos de meningoencefalitis en BoHV-1 y siendo más persistentes en infecciones con BoHV-5.Fil: Rosales Hurtado, Juan José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Nieto Farías, María Victoria. 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Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaXIII Jornadas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria y I Reunión de la Red Latinoamericana de Inmunología VeterinariaGeneral PicoArgentinaAsociación Argentina de Inmunología VeterinariaUniversidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias VeterinariasUniversidad Nacional de La Pampa. 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Fil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina
Fil: Nieto Farías, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
XIII Jornadas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria y I Reunión de la Red Latinoamericana de Inmunología Veterinaria
General Pico
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Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria
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description Los interferones (IFN) son componentes del sistema inmunológico innato con un papel predominante en la respuesta inicial a las infecciones virales. Los IFN de tipo I (IFN-α / β) fueron reconocidos como la primera barrera inmunológica tras la infección por un virus. En 2003, los IFN de tipo III (IFN-λ), se describieron como mecanismos antivirales adicionales de la inmunidad innata, induciendo un estado antiviral en las células. Los alfaherpesvirus bovinos (BoHV) tipo 1 y 5 son neuroinvasivos. El BoHV-5 es el agente causal de meningoencefalitis necrotizante en terneros, mientras el BoHV-1 solo ocasionalmente se asocia con cuadros neurológicos. El objetivo de este estudio fue determinar y comparar los niveles de expresión del IFNλ en células de neuroblastoma humano SH-SY5Y infectados experimentalmente con BoHV-1 o 5. Materiales y métodos: Las células SH-SY5Y se sembraron en botellas T25 con medio D-MEM, F-12 y 10 % de suero fetal bovino, las células se infectaron con una moi=1, para este estudio se utilizaron las cepas LA, Cooper (BoHV-1), 97/613 (BoHV5) y A663 recombinante natural. Se tomaron como horario de infección 6 h y 24 h. El ARN se extrajo con Trizol y cuantificado con Nanodrop. El ADN genómico se digirió con DNase I, el ARN se transcribió a cDNA y la expresión del gen IFNλ3 se cuantificó con la técnica RT-qPCR. Las infecciones con BoHV-1 se expresaron 6 veces más que el control a las 6 h y el BoHV-5 no tuvo diferencias con el control, pero a las 24 h la expresión de las diferentes cepas disminuyó significativamente con respecto al horario anterior. Según lo descrito en la bibliografía los IFN-λ son homólogos a la IL-10 con actividad antiinflamatoria, las infecciones de BoHV-1 expresar mayor cantidad de IFN-λ en comparación con BoHV-5, disminuyendo los casos de meningoencefalitis en BoHV-1 y siendo más persistentes en infecciones con BoHV-5.
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